学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

空间搭载紫花苜蓿种子第一代植株表型变异及基因多态性分析

作　者: 范润钧
导　师: 陈本建；邓波
学　校: 甘肃农业大学
专　业: 草业科学
关键词: 空间搭载 紫花苜蓿 SSR分子标记 遗传多态性
分类号: S541.9
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 38次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


本研究以经过“神舟三号”卫星搭载的紫花苜蓿种子第一代植株为材料,利用SSR(简单重复序列)分子标记技术,对供试紫花苜蓿的基因多态性进行分析。主要研究结果如下:1.紫花苜蓿SSR-PCR反应体系的建立:根据正交试验设计原理,设计了探索正交试验和细调正交试验来确定紫花苜蓿SSR-PCR反应体系中各成分的浓度,从dNTP、Taq酶、Primers、Mg2+ 4种因素对紫花苜蓿SSR-PCR反应体系进行了优化,得到适合紫花苜蓿的SSR-PCR最佳反应体系,即25μl的反应体系中含有dNTP0.2 mmol/L、TaqDNA聚合酶2U、引物0.7μmol/L、Mg2+2.5 mmol/L、以及2.5μl 10×buffer和60ng模板DNA。循环参数为:94℃预变性3min,95℃变性1min,52℃退火1.5min,72℃延伸60s,共循环35次,最后72℃保温8min,4℃保存。2. SSR引物的筛选与PCR扩增:从17对SSR引物中筛选出6对扩增产物具有稳定多态性的引物。对材料进行检测,共检测到25个等位基因,每对引物检测出2～8个等位基因,平均为4.17个。结合4个突变指标,检测经过筛选的植株的等位基因频率及每个位点的多态性信息量(PIC),PIC变化于0.2216～0.8328之间,平均为0.6366,根据检测结果可以说明航天搭载可导致被搭载的多个紫花苜蓿种子基因组产生变异,有些甚至出现多个等位基因变异。3.经过基因多样性检测初步筛选出突变单株:在224个SP1植株中,56株(总株数的25%)的基因组DNA可扩增出与地面对照不同的差异带,其中有13株具3个以上多态性等位基因,占总株数的5.81%。这13株分别是:DEFI-04、DEFI-07、DEFI-50、DERBY-15、DERBY-35、Algonguin-01、Algonguin-10、Algonguin-28、Algonguin-35、Algonguin-43、Algonguin-65、Sanditi-21、Sanditi-49。4.对筛选出的突变单株作进一步的育种展望:用分子标记技术分析了航天搭载后种子长出的第一代植株、后继世代以及选育出的多个稳定突变株系基因组的多态性,跟踪分析突变株系基因组多态性来源,特点及其在世代之间的遗传;对其中具有植株较高、叶色较深、叶片较大、多叶等4个主要变异性状的突变植株进行图谱分析,以了解空间诱变的基因组变化特点和规律,为空间诱变手段在育种中的应用提供一定的依据。

全文目录


摘要  2-3
ABSTRACT  3-8
第一章 文献综述  8-29
  1. 航天育种的研究概况  8-12
    1.1 航天育种简介  8-9
    1.2 航天育种诱变机理  9-11
    1.3 航天育种研究进展  11-12
  2. 紫花苜蓿的研究概况  12-17
    2.1 紫花苜蓿的形态、生理学特征及其营养特性  12-14
    2.2 紫花苜蓿的地理分布及生产应用  14-15
    2.3 紫花苜蓿育种的研究现状  15-17
  3. 分子标记技术及其在植物育种中的应用  17-27
    3.1 分子标记技术概述  17-21
    3.2 分子标记技术在植物育种中的应用  21-25
    3.3 分子标记技术在牧草中的应用  25-27
  4. 本研究的目的和意义  27-28
  5. 本研究的主要内容  28
  6. 主要技术路线  28-29
第二章 材料与方法  29-39
  1. 试验材料  29-32
    1.1 试验植物  29
    1.2 设备仪器  29-30
    1.3 主要化学药品的来源  30-31
    1.4 主要试剂的配制  31-32
  2. 实验方法  32-37
    2.1 叶片的采集  32
    2.2 紫花苜蓿叶片DNA 的提取及检测  32-33
    2.3 SSR-PCR 扩增  33-36
    2.4 琼脂糖电泳检测  36
    2.5 PAGE 胶电泳分离  36
    2.6 聚丙烯酰胺凝胶的银染  36-37
  3. 数据统计与分析  37-39
第三章 结果与分析  39-52
  1. 紫花苜蓿基因组DNA 的提取  39
  2. SSR-PCR 反应体系的构建与优化  39-42
    2.1 探索正交试验结果与分析  39
    2.2 细调正交试验结果与分析  39-42
  3. 引物的筛选和最佳退火温度的确定  42-43
  4.SS R 扩增位点多态性分析  43-49
    4.1 筛选表型变异单株  43
    4.2 植株基因多态性分析  43-49
  5. 筛选株系后代植株表型及基因组变异展望  49-52
    5.1 后续世代的种植和筛选方法  49
    5.2 筛选株系后代植株表型及基因组变异探讨  49
    5.3 稳定突变体的生理生化指标检测  49-52
第四章 结论  52-54
第五章 讨论与展望  54-56
参考文献  56-61
致谢  61-62
作者简介  62-63
导师简介  63-64

相似论文

  1. 氮肥对紫花苜蓿根系形态发育的影响,S541.9
  2. 紫花苜蓿根系生长与地上部生长的相关性分析,S541.9
  3. 西藏地区紫花苜蓿和多年生黑麦草干草调制与贮藏技术的研究,S816.53
  4. 黄瓜渐渗系抗南方根结线虫病遗传规律及分子标记研究,S436.421
  5. 黄瓜—酸黄瓜抗霜霉病渐渗系分子标记的筛选及细胞程序性死亡相关基因的表达分析,S436.421.11
  6. 高温胁迫条件下紫花苜蓿抑制消减cDNA文库的构建与初步分析,S541.9
  7. 血红素加氧酶-1参与水杨酸对镉诱导的紫花苜蓿根部氧化胁迫的调节作用,S541.9
  8. 番茄抗TYLCV相关分子标记筛选及其分子标记辅助选择抗性聚合研究,S641.2
  9. 多环芳烃污染土壤的植物—微生物联合修复效应,X53
  10. 东北地区玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum）生理分化和遗传多态性研究,S435.131
  11. 光周期对不同秋眠类型紫花苜蓿phyA、phyB mRNA和植物激素含量的影响,S541.9
  12. 太原盆地紫花苜蓿水分利用效率研究,S541.9
  13. 低温胁迫对紫花苜蓿根颈膜脂脂肪酸含量的影响,S541.9
  14. 2型脱碘酶Thr92Ala多态性与甲亢性心脏病的相关性研究,R541.85
  15. 新疆野核桃资源及遗传多样性的分析,S664.1
  16. 新疆维、汉族人群MTHFR C677T多态性遗传流行病学调查,R394
  17. 构建日本血吸虫抗原Sj23的毕赤酵母和转基因紫花苜蓿表达系统,Q943.2
  18. 哈萨克羊、阿勒泰羊、巴什拜羊遗传多样性的AFLP分析,S826
  19. 小麦抗条锈病基因YrC25的遗传分析和分子标记,S512.1
  20. 聚天门冬氨酸对紫花苜蓿的生长、产量和品质的影响,S541.9
  21. 4个紫花苜蓿品种空间诱变效应的研究,S541.9

中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 饲料作物、牧草 > 多年生豆科牧草 > 其他
© 2012 www.xueweilunwen.com