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犊牛与某些禽类肠道寄生虫感染情况调查及隐孢子虫遗传特征分析

作　者: 孙艳茹
导　师: 张龙现；宁长申
学　校: 河南农业大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 肠道寄生虫感染特禽犊牛隐孢子虫基因亚型 18S rRNA GP60
分类号: S858.23
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

隐孢子虫病是重要的人兽共患寄生虫病之一,目前已有21个有效种,其中最主要的3个人兽共患虫种分别为寄生于人的人隐孢子虫(Cryptosporidium hominis),寄生于禽类的火鸡隐孢子虫(C. meleagridis)和寄生于牛的微小隐孢子虫(C. parvum)。国内对火鸡隐孢子虫和微小隐孢子虫的基因型和亚型分析很少,故笔者进行了相关调查研究,以期为国内禽类和奶牛携带的人兽共患的隐孢子虫虫种的动力学传播及其风险评估提供参考资料。为了解郑州市住院病人肠道寄生虫感染状况,尤其是人兽共患寄生虫的流行情况,用饱和蔗糖溶液漂浮法、甲醛-乙酸乙酯-改良抗酸染色法和卢戈碘液染色法对该地区某医院住院病人4836份粪便样品进行了检查。检出肠道寄生虫6种,总感染率为1.3%,发现了环孢子虫感染病例,且感染率最高,为0.5%;贾第虫、圆线虫和钩虫感染率次之,均为0.2%;蛲虫和蛔虫感染率均为0.1%,混合感染病例一例,感染率为0.02%。郑州市住院病人肠道寄生虫感染率较低,但机会性原虫感染病例增加,应加强健康教育,普及卫生知识,提高自我保健意识和能力,预防寄生虫病的发生和流行。为了进一步掌握河南省郑州郊区和武陟县两个地区鹌鹑肠道寄生虫的感染情况,于2008年9月至2009年4月对这两个地区的19个鹌鹑养殖场进行了调查,共采集1360份粪样。经饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检查,结果发现鹌鹑感染5种肠道寄生虫。寄生虫总感染率为98.3%,其中鹌鹑球虫感染率最高,为97.2%,鹌鹑隐孢子虫感染率为6.3%,鹌鹑圆线虫感染率为23.2%,鹌鹑蛔虫感染率为2.1%,鹌鹑毛细线虫感染率为1.2%.本次调查结果表明鹌鹑肠道寄生虫感染较为普遍和严重,各年龄段鹌鹑感染率均较高,应加强鹌鹑寄生虫病的防治工作。为了解特禽肠道寄生虫感染情况,于2008年12月至2009年10月对郑州、许昌、平顶山三地的几个特禽养殖场的雏禽进行了抽样调查,共调查450份粪便样品,发现阳性样品379份,总感染率高达84.2%;共检出5种肠道寄生虫,球虫为主要感染虫种,总感染率为72.4%,隐孢子虫的总感染率为2.7%,毛细线虫感染率为10.9%,圆线虫和蛔虫的总感染率分别为18. 2%和12.4 %。378份阳性样品中,143份为两种或两种以上寄生虫混合感染,占阳性样品37.8%。本次调查结果表明所调查的特禽肠道寄生虫感染较为普遍和严重,应加强特禽的寄生虫病的防治工作,以期减少损失增加经济效益。为了解禽类所感染的隐孢子虫种类,对所调查到的86份鹌鹑隐孢子虫阳性样品和12份其它特禽隐孢子虫阳性样品,进一步用巢式PCR扩增18S rRNA基因基因,经测序和序列比对,共鉴定出2个隐孢子虫种类,为火鸡隐孢子虫(C. meleagridis)和贝氏隐孢子虫(C.baileyi)本试验分离到了鹌鹑源、元宝鸡源、贵妃鸡源、山鸡源贝氏隐孢子虫,鹌鹑源、火鸡源、观赏鸽源火鸡隐孢子虫。为了解郑州地区某奶牛场3月龄内的犊牛肠道寄生虫感染情况,于2008年8月至2009年月11月,对该场381头犊牛单圈饲养的新生犊牛进行追踪调查。结果发现球虫总感染率为49.9%,贾第虫的总感染率为31%,隐孢子虫的总感染率为26.2%,环孢子虫的总感染率为4.7%,圆线虫和蛔虫的总感染率分别为1.6%和0.3%。为了解所分离到的隐孢子虫的种类,笔者进一步用巢式PCR扩增18S rRNA基因和60-kDa糖蛋白(GP60),经测序和序列比对,共鉴定出4个隐孢子虫种类,包括分别是C. hominis ,C. parvum,C. bovis和,C. ryanae。本试验分离到了1个C. hominis分离株属于C. hominisⅠb亚型家族,命名为ⅠbA20G2。61个C. parvum分离株属于C. parvumⅡd亚型家族,命名为ⅡdA19G1。

全文目录

致谢  4-7
摘要  7-9
文献综述  9-23
  1 隐孢子虫的概述  9
  2 隐孢子虫种、基因型、基因亚型定义  9-10
  3 感染牛的隐孢子虫种类和在中国的流行情况  10-15
  4 感染禽类的隐孢子虫种类和在中国的流行情况  15-19
  5 基因分型工具  19-21
  6 结语  21-23
第一部分郑州市某医院住院病人肠道寄生虫感染情况调查  23-28
  引言  23
  1 材料与方法  23
  2 结果与分析  23-25
  3 讨论与分析  25-28
第二部分河南省某些禽类肠道寄生虫感染情况调查及隐孢子虫种类鉴定  28-42
  试验一：鹌鹑肠道寄生虫感染情况调查  28-32
    引言  28
    1 材料和方法  28
    2 结果与分析  28-30
    3 结论与讨论  30-32
  试验二：河南省部分特禽肠道寄生虫感染情况调查  32-35
    引言  32
    1 材料和方法  32
    2 结果与分析  32
    3 结论与讨论  32-35
  试验三：河南省部分禽类隐孢子虫种类鉴定  35-42
    引言  35
    1 材料与方法  35-37
    2 结果与分析  37-38
    3 结论与讨论  38-42
第三部分郑州地区某奶牛场犊牛隐孢子虫季节追踪调查及隐孢子虫种类鉴定  42-50
  引言  42
  1 材料与方法  42-45
  2 结果与分析  45-48
  3 结论与讨论  48-50
结论和创新点  50-51
参考文献  51-60
英文摘要  60-62
个人简历  62

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