学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

不同基因型毛白杨离体再生及细胞悬浮培养的比较研究

作　者: 姚娜
导　师: 张志毅
学　校: 北京林业大学
专　业: 林木遗传育种
关键词: 毛白杨 基因型 组织培养 再生 悬浮培养
分类号: S792.11
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 148次
引　用: 2次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


毛白杨(Populus tomentosa Carr．)是我国特有的乡土树种，在我国北方林业生产和生态环境建设中占有重要地位。目前杨树育种工作面临问题主要是杨树的定向改良和缩短育种周期。利用组织培养技术可实现毛白杨的快速繁殖和种质资源保存，并为毛白杨定向改良提供技术基础。本研究以多个毛白杨优良基因型为试验材料，利用组织养技术，开展毛白杨无菌培养、叶片再生和细胞培养研究，为毛白杨遗传转化和体细胞胚胎发生研究奠定基础。通过试验得到如下主要结果：1．以水培嫩茎为外植体，对多个毛白杨基因型进行无菌培养。发现不同基因型外植体最佳消毒方法存在差异。基因型TC152、TC333和TC504外植体最佳消毒组合为70％乙醇30s±0.1％升汞7min；基因型TC121、TC342、TC503、TC510和TC970外植体最佳消毒组合为70％乙醇60s+0.1％升汞7min；基因型TC332外植体最佳消毒组合为70％乙醇30s+0.1％升汞9min；基因型TC414外植体最佳消毒组合为70％乙醇60s+0.1％升汞9min。2．筛选出了不同毛白杨基因型最佳茎段增殖培养基。基因型TC121和TC152最佳增殖培养基为MS+0.5mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA；基因型TC332、TC333、TC510和TC970最佳增殖培养基为MS+0.7mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA。同时发现，不同毛白杨基因型在MS+0.7mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA培养基上，增殖能力存在差异。基因型TC121和TC152增殖能力最强，增殖系数达到4.0以上；基因型TC332和TC333增殖系数最低，均低于3.0。3．筛选出了不同毛白杨基因型最佳生根培养基。基因型TC121、TC152、TC332、TC333、TC510和TC970最佳生根培养基均为1/2MS+0.60mg/L IBA。4．以毛白杨无菌苗叶片为外植体，建立叶片离体再生体系。分别筛选出不同毛白杨基因型最佳叶片再生培养基：基因型TC121在MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L KT培养基上再生系效率最高，达到48.45％；基因型TC152在MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA上再生效率可达到97.78％；基因型TC332最佳再生培养基为MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/L NAA+1.0mg/L ZT，再生效率达到98.89％；基因型TC333最佳叶片再生培养基为MS+1.5mg/L 6-BA+1.0mg/L KT+1.0mg/L ZT，再生效率达到86.67％；基因型TC970最佳再生培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA，再生效率达到93.33％。5．以毛白杨愈伤组织为外植体建立悬浮细胞培养体系。基因型TC152最佳悬浮细胞启动培养基为MS+1.0mg/L 2，4-D，基因型TC332最佳悬浮细胞启动培养基为MS+2.5mg/L 2，4-D，基因型TC510和TC970最佳悬浮细胞启动培养基为MS+2.0mg/L 2，4-D；4个毛白杨基因型悬浮细胞最佳继代培养基均为MS+0.8mg/L 2，4-D。以毛白杨无菌苗叶片为材料，进行悬浮培养，获得悬浮细胞，基因型TC152和TC970叶片在MS+3.0mg/L 2，4-D液体培养基中培养30d，可获得大量悬浮细胞。6．以毛白杨基因型TC152悬浮细胞为材料，初步开展悬浮细胞再生研究，获得无菌生根苗。基因型TC152细胞在MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+0.5mg/L ZT或MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+1.0mg/L ZT培养基中进行悬浮培养，可获得大量再生不定芽，每个培养瓶中可得到40-50个芽；悬浮细胞通过固体培养法获得愈伤组织后在MS+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA+1.0mg/L ZT固体培养基上不定芽再生效率可达到70.00％。悬浮细胞再生不定芽在1/2MS+0.60mg/L IBA培养基上培养，可获得无菌生根苗。

全文目录


摘要  5-7
英文摘要  7-13
引言  13-14
1 文献综述  14-24
  1.1 杨树组织培养研究概况  14-18
    1.1.1 植物组织培养技术概述  14
    1.1.2 杨树组织培养研究进展  14-15
    1.1.3 毛白杨组织培养研究  15-16
    1.1.4 组织培养在杨树育种中的应用  16-18
      1.1.4.1 花药培养和单倍体育种  16
      1.1.4.2 体细胞胚胎发生和离体胚培养  16-17
      1.1.4.3 体细胞融合  17
      1.1.4.4 基因转移  17
      1.1.4.5 体细胞突变体的筛选  17-18
      1.1.4.6 离体快繁和脱毒培养  18
  1.2 杨树器官再生研究进展  18-21
    1.2.1 对接种外植体的研究  18-19
    1.2.2 对再生培养基的研究  19-21
  1.3 植物细胞培养研究概况  21
  1.4 存在的问题  21-22
  1.5 本研究的方法与技术路线  22-24
2 毛白杨无菌培养  24-31
  2.1 材料与方法  24-26
    2.1.1 供试材料  24
    2.1.2 培养基和培养条件  24
      2.1.2.1 基本培养基  24
      2.1.2.2 培养条件  24
    2.1.3 植物生长调节剂  24
    2.1.4 主要仪器和工具  24-25
    2.1.5 无菌培养评价方法  25
    2.1.6 试验设计  25-26
      2.1.6.1 外植体消毒方法的选择  25
      2.1.6.2 增殖培养基的筛选  25-26
      2.1.6.3 生根培养基的筛选  26
    2.1.7 统计方法及数据处理  26
  2.2 结果与分析  26-30
    2.2.1 不同基因型毛白杨外植体消毒方法的筛选  26-28
    2.2.3 不同浓度6-BA对毛白杨增殖培养的影响  28
    2.2.4 不同毛白杨基因型间茎段增殖能力的差异  28-30
    2.2.5 生长素对毛白杨生根的影响  30
  2.3 小结  30-31
3 毛白杨叶片离体再生培养  31-42
  3.1 材料与方法  31-33
    3.1.1 供试材料  31
    3.1.2 培养基和培养条件  31
      3.1.2.1 基本培养基  31
      3.1.2.2 培养条件  31
    3.1.3 植物生长调节剂  31
    3.1.4 主要仪器和工具  31
    3.1.5 叶片再生培养评价方法  31
    3.1.6 试验设计  31-33
    3.1.7 统计方法及数据处理  33
  3.2 结果与分析  33-40
    3.2.1 6-BA和NAA对叶片再生的影响  33-35
    3.2.2 6-BA、NAA和ZT对叶片再生的影响  35-36
    3.2.3 TC121叶片再生培养基筛选  36-38
    3.2.4 TC333叶片再生培养基筛选  38-40
  3.3 小结  40
  3.4 讨论  40-42
    3.4.1 不同基因型毛白杨叶片再生培养基的差异  40-41
    3.4.2 不同基因型毛白杨再生能力的差异  41
    3.4.3 不同基因型毛白杨叶片再生不定芽生长状况的差异  41-42
4 毛白杨悬浮细胞培养和植株再生  42-57
  4.1 材料与方法  42-46
    4.1.1 供试材料  42
    4.1.2 培养基和培养条件  42
      4.1.2.1 基本培养基  42
      4.1.2.2 培养条件  42
    4.1.3 植物生长调节剂  42
    4.1.4 主要仪器和工具  42-43
    4.1.5 毛白杨细胞培养评价方法  43
    4.1.6 试验设计  43-44
      4.1.6.1 毛白杨愈伤组织诱导培养基筛选  43
      4.1.6.2 毛白杨悬浮细胞系的启动  43
      4.1.6.3 愈伤组织继代次数对悬浮系启动的影响  43-44
      4.1.6.4 毛白杨器官直接启动悬浮细胞系  44
      4.1.6.5 毛白杨悬浮细胞系的继代  44
      4.1.6.6 毛白杨悬浮细胞系的再生  44
      4.1.6.7 毛白杨悬浮系再生植株生根  44
    4.1.7 统计方法及数据处理  44-46
  4.2 结果与分析  46-54
    4.2.1 毛白杨细胞悬浮培养  46-51
      4.2.1.1 不同毛白杨基因型愈伤组织诱导培养基的筛选  46-48
      4.2.1.2 2，4-D浓度对悬浮细胞系启动的影响  48
      4.2.1.3 愈伤组织继代次数对悬浮系启动的影响  48-49
      4.2.1.4 通过器官悬浮培养获得悬浮细胞  49-50
      4.2.1.5 毛白杨悬浮细胞继代培养  50-51
    4.2.2 毛白杨悬浮细胞再生植株  51-54
      4.2.2.1 细胞悬浮培养法  51-52
      4.2.2.2 固体平板培养法  52-53
      4.2.2.3 液体浅层培养法  53-54
    4.2.3 悬浮细胞系再生不定芽生根培养  54
  4.3 小结  54-55
  4.4 讨论  55-57
    4.4.1 植物生长调节剂对愈伤组织生长的影响  55
    4.4.2 植物生长调节剂对悬浮细胞系的影响  55
    4.4.3 愈伤组织继代次数对悬浮细胞系建立的影响  55
    4.4.4 植物生长调节剂对悬浮细胞再生的影响  55-57
5 结论  57-58
6 下一步研究展望  58-59
参考文献  59-66
图版1  66-67
图版2  67-68
作者简介  68-69
导师简介  69-70
致谢  70

相似论文

  1. 金属蜂窝与再生冷却通道的传热特性研究,V215.4
  2. 鹿茸配合生血汤治疗慢性再生障碍性贫血的临床观察,R259
  3. 光调控对花烛组织培养及试管苗光合特性的影响,S682.14
  4. 再生混凝土微粉/水泥基透水性复合材料的试验研究,TU528
  5. 能源植物绿玉树快速繁殖研究,Q949.93
  6. 综合利用建筑废渣灰、旧砂再生粉尘和污泥制备轻集料的研究,TU528.042
  7. 再生混凝土多孔砖用骨料及配合比试验研究,TU528
  8. 离子交换法去除原水中六价硒,X703
  9. 再生骨料半干硬性混凝土制备与成型的试验研究,TU528
  10. 聚丙烯腈基两性离子交换纤维的制备及性能研究,TQ342.31
  11. 哈尼族聚落乡土建筑“再生”之路研究,C95
  12. 蝴蝶兰新品种‘恒巨双龙’花梗离体培养技术的研究,S682.31
  13. 公共政策执行再生性梗阻与症解研究,D035
  14. 水稻生产力的基因型与播期效应模拟研究,S511
  15. 赣东北再生稻轻型化种植模式播期优化及其对源库关系的影响,S511
  16. 小麦品质性状的环境效应和配合力与杂种优势研究,S512.1
  17. 农杆菌介导GmWRKY21基因转化大豆的研究,S565.1
  18. 不同基因型烤烟生物碱表现及与香气物质、感官质量的关系,S572
  19. 遗传因素和施氮量对豫中烤烟品质和风格特色的影响,S572
  20. 稻米外观品质氮素效应的解剖学与生化学分析,S511
  21. 小麦生产力的基因型与气候效应模拟,S512.1

中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 阔叶乔木 > 杨
© 2012 www.xueweilunwen.com