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巨龙竹胚胎学及离体器官的脱分化研究
作 者: 王曙光
导 师: 普晓兰
学 校: 西南林学院
专 业: 植物学
关键词: 巨龙竹 配子体发育 离体培养
分类号: S795
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 96次
引 用: 1次
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内容摘要
巨龙竹(Dendrocalamus sinicus)是禾本科(Bambusoideae)竹亚科(Bambusoideae)牡竹属(Dendrocalamus)是世界上秆形最大的工业用材竹种,其秆高可达30m,直径20-30cm,具有重要的经济价值和广阔的开发前景。由于巨龙竹结实率低,在实际很难采到种子,因此采用传统的育苗法,育苗的成活率极低,发笋率也低,其分布区狭窄,种源稀少无法满足种苗的需求。本研究针对此种现状,对巨龙竹的胚胎发育过程进行研究,探讨巨龙竹结实率低的原因,并采用组织培养手段,对不同外植体进行愈伤组织诱导,为以后的遗传育种工作打下坚实的基础。胚胎发育研究的主要研究结果如下:(1)巨龙竹的雄蕊发育正常。从雄蕊原基开始形成到发育到成熟的花药,无论是纤维层还是绒毡层,均未见发育、结构异常,花药壁的结构发育是正常的。从孢原细胞的产生到花粉粒的形成,在各个发育阶段,也均未见到任何结构出现发育异常。花药成熟以后花粉散落出来,并且可以正常萌发,萌发速度快,萌发率也较高,30min后萌发率可达92.2%。(2)巨龙竹的雌蕊发育正常。从雌蕊原基产生及生长,子房的生长,花柱的伸长。双层珠被的形成,倒生胚珠的产生,均发育正常。孢原细胞的形成,大孢子母细胞以及四分体的产生,到形成完整的胚囊结构,未见结构发育异常。巨龙竹的胚囊具有完整的结构,卵细胞、助细胞、中央细胞以及反足细胞的结构均正常。(3)巨龙竹为雌雄异熟,授粉方式为异花授粉,大部分小穗同步开花。巨龙竹的受精正常,并且可以产生正常的胚、胚乳以及种子。在巨龙竹的子房中产生了正常的胚和胚乳。以后胚发育成正常的种子。因此可以认为,在巨龙竹的受精阶段并未出现发育异常。可见巨龙竹的结实率低亦并不由于巨龙竹的受精出现异常造成的。从卵细胞受精到发育成正常的种子,未见任何发育异常。通过对巨龙竹的不同材料进行愈伤组织诱导,认为:(1)在种胚、小穗和茎节诱导愈伤组织难易程度上,由于种胚具有胚性组织,小穗具有发达的居间分生组织和胚性细胞,因此种胚和小穗较茎节更容易诱导愈伤组织,而种胚较小穗则更易一些,主要是由于小穗消毒不易。往往容易遭受到药害或者是被污染导致死亡。而成年竹诱导愈伤组织不容易主要是因为成年的竹节已经成熟,脱分化比较困难。种胚与小穗诱导的愈伤组织颜色是鲜嫩乳白色的,而竹节诱导的愈伤组织颜色发黄,易褐化死亡。种胚最佳的培养基为:MS+2,4-D3.0+KT1.0+蔗糖25。而小穗的最佳的培养基为:MS+2,4-D2.0+KT0.5+蔗糖25。(2)巨龙竹成年竹的愈伤组织诱导比较困难。其试管引入、侧芽的萌发、愈伤组
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全文目录
摘要 4-6 Abstract 6-10 前言 10 研究意义和目的 10-12 1. 研究进展 12-19 1.1 植物胚胎学研究 12-14 1.1.1 国外胚胎学研究现状 13 1.1.2 国内胚胎学研究现状 13-14 1.2 竹子胚胎学方面国内外研究现状 14-16 1.3 竹类植物离体培养的国内外研究现状 16-19 1.3.1 国外竹子组织培养的研究概况 16-17 1.3.2 国内竹子组织培养的研究概况 17-19 2 巨龙竹的胚胎学研究 19-31 2.1 材料与方法 19-24 2.1.1 材料的保存及固定 19 2.1.2 形态观察 19 2.1.3 石蜡制片 19-23 2.1.4 显微摄影 23 2.1.5 巨龙竹的花粉萌发试验 23-24 2.2 结果与分析 24-28 2.2.1 巨龙竹小穗的形态特征 24 2.2.2 巨龙竹的雌雄蕊发育及授粉状况 24-25 2.2.3 巨龙竹的果实发育状况 25 2.2.4 大孢子的发生及雌配子体的发育 25-26 2.2.5 小孢子发生及雄配子体发育 26 2.2.6 花药壁的发育 26-27 2.2.7 巨龙竹花粉萌发的结果观察 27-28 2.2.8 巨龙竹胚的发育 28 2.3 结论及问题讨论 28-31 2.3.1 主要结论 28-29 2.3.2 主要创新点 29 2.3.3 问题讨论 29-30 2.3.4 今后深化研究的方向 30-31 3 巨龙竹离体器官的脱分化研究 31-41 3.1 植物组织培养的实验原理 31-32 3.1.1 细胞学说 31 3.1.2 植物细胞全能性学说 31 3.1.3 植物再生作用 31 3.1.4 细胞分化的形态建成 31-32 3.2 巨龙竹种子的离体培养及愈伤组织诱导 32-35 3.2.1 材料与方法 32-33 3.2.2 试验结果与分析 33-35 3.3 巨龙竹小穗的离体培养及愈伤组织诱导 35-37 3.3.1 材料与方法 35 3.3.2 引入生长观测记录与分析 35-36 3.3.3 试验结果与分析 36-37 3.4 巨龙竹茎段的离体培养及愈伤组织诱导 37-38 3.4.1 材料与方法 37-38 3.4.2 试验结果与分析 38 3.5 主要的研究结论及问题讨论 38-41 3.5.1 主要研究结论 38-39 3.5.2 技术关键和主要创新点 39-40 3.5.3 问题讨论 40 3.5.4 今后深化研究的方向 40-41 参考文献 41-49 致谢 49-50 附录 50-54
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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 竹
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