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KRAB锌指蛋白ZNF331基因的转录调控研究
作 者: 陈玉娟
导 师: 肖翠英
学 校: 四川大学
专 业: 医学遗传学
关键词: 锌指蛋白 ZNF463基因 ZNF331基因 细胞定位 转录调控
分类号: Q75
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
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内容摘要
第一部分:锌指蛋白ZNF463基因是我室新近克隆的精子发生相关基因。该基因是锌指蛋白基因ZNF331的一种剪接体。为了进~步研究KRAB锌指蛋白ZNF463基因表达的亚细胞定位,用RT-PCR法从正常人睾丸组织中扩增得到人ZNF463基因的翻译区全长cDNA,并定向克隆到真核表达载体pEGFP-Cl质粒中,构建了ZNF463-GFP融合基因表达载体。然后以脂质体介导转入Cos-7细胞中,荧光显微镜观察显示:在转染重组真核表达载体pEGFP-ZNF463的Cos-7细胞中,荧光主要集中在细胞核内,而在转染空白载体pEGFP-Cl的细胞中,荧光布满整个细胞。本实验表明转染的Cos-7细胞能表达人ZNF463蛋白,该蛋白定位于细胞核内,与其所属家族成员作为转录因子发挥作用的特征相符。 第二部分:ZNF331基因是与甲状腺肿瘤发生密切相关的KRAB锌指蛋白基因。其异常表达可能是甲状腺肿瘤发生的分子机制之一。迄今尚未见有关该基因在转录水平调节的报道。为了从转录水平了解其调控机制,首先取其5′端启动子区域1.31kb片段及其8个不同长度的缺失体连接到含有萤火虫荧光素酶基因但无启动子的
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全文目录
中文摘要 4-6 英文摘要 6-9 前言 9-11 第一部分 ZNF463/荧光蛋白融合基因表达载体的构建及其在Cos-7细胞中的表达与定位 11-18 材料与方法 11-13 结果 13-14 讨论 14-18 第二部分 ZNF331基因启动子区的转录调控研究 18-30 材料与方法 18-24 结果 24-27 讨论 27-30 参考文献 30-39 全文总结 39-40 文献综述 40-55 致谢 55-56
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中图分类: > 生物科学 > 分子生物学 > 分子遗传学
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