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云南几种濒危野生兰花菌根真菌的筛选及菌根结构研究

作　者: 吕梅
导　师: 马焕成；雷伟
学　校: 西南林学院
专　业: 生态学
关键词: 云南野生兰菌根真菌筛选菌根结构
分类号: S682.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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引　用: 2次
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内容摘要

本研究应用显微技术从地生兰与其菌根真菌的共生培养体系，研究地生兰与菌根真菌之间的相互作用。广义的兰花是整个兰科植物(Orchidaceae)的总称。从我国传统的“兰花”概念上说，中国兰花仅指产于我国的兰科、兰属(Cymbidium)植物，而且主要指其中的地生兰。地生兰是一类观赏价值和经济价值极高的花卉。云南是全国兰科植物分布最丰富的地区，但目前的开发与利用仍处于初级阶段，由于供需矛盾突出，在经济利益驱动下，农民上山大量采挖野生地生国兰，野生兰花资源受到严重破坏，为保护濒危兰花资源，需大量繁殖。繁殖方法多采用组培，但移栽无菌组培苗成活率低，生长缓慢，开花延迟，花小甚至不开花。成年兰花与真菌共生形成菌根是自然界的一种普遍现象，菌根真菌为兰科植物提供生长所必需的营养物质。因此，组培苗菌根化是促进地生兰快速繁殖的重要技术，也是解决濒危兰花资源人工栽培的关键。为探讨菌根真菌与兰科植物间的相互作用机制，在盆栽和纯培养条件下，用分离获得的真菌菌株分别接种春兰(Cymbidium goeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)、虎头兰(C.hookerianum)及齿瓣石斛(Dendrobium devonianum)。通过组培苗人工接种菌根技术，筛选出与兰花有效共生并能明显促进兰苗生长的优良菌株。从生物量增长、显微和超显微结构、重分离接种菌株等方面获得的证据表明，已成功建立了春兰等种子繁育组培幼苗和丝核菌共培养体系；用超薄切片技术及电子显微镜，对兰花营养根消化菌根真菌过程和细胞超微结构的变化进行了研究，探索利用兰科内生菌根真菌促进地生兰种子繁育组培幼苗生长发育的方法，为解决兰科珍贵花卉人工栽培提供理论依据。研究结果表明： 1．春兰、虎头兰和齿瓣石斛的种子在人工培养基上均可诱导发芽并最终形成试管苗，三种种子培养基配方中添加适量的椰乳及购置专门的兰花营养液等，给种子提供了多种必需的营养生长物质和环境条件，有利于种子的正常生长和发育；此外种子的成熟度与在培养基上的萌发时间的长短密切相关，成熟度越高，萌发时间越短，种子苗成活率越高；另还与抑制褐变的活性碳及维生素C有关。春兰的茎尖组织培养研究筛选出有利于原球茎诱导增殖的培养基为1／2MS+NAA0.5mg／L+6-BA3.0mg／L；有利于不定芽的分化的培养基1／2MS+6-BA 1.0 mg／L+NAA 0.05mg／L，有利于不定芽的增殖的培养基1／2MS+6-BA 2.0 mg／L+NAA 0.1mg／L，增殖率为4：有利于生根的培养基为1／2MS+NAA0.5mg／L。 2．从云南省兰科植物的主要产区的8个地区12品种89株兰科植物的营养根上共分离获得真菌菌株185个，其中出现频率较高或者文献曾报道为兰科内生菌根真菌的有

全文目录

1 研究背景  11-19
  1.1 兰科植物的研究概况  11-12
  1.2 兰科植物内生真菌的研究概况  12-16
    1.2.1 兰科植物内生真菌分类地位和专一性研究  12-15
    1.2.2 兰科植物内生真菌的作用  15-16
  1.3 兰科内生真菌对兰花组培苗作用的研究  16-17
  1.4 本研究的目的和意义  17-19
2 地生兰组培快繁及栽培技术研究  19-31
  2.1 材料与方法  19-22
    2.1.1 材料  19-21
    2.1.2 方法  21-22
  2.2 结果与分析  22-26
    2.2.1 种子繁育培养基配方试验  22-24
    2.2.2 茎尖培养基配方试验  24-26
  2.3 结论与讨论  26-31
3 云南几种地生兰内生菌根真菌的分离  31-53
  3.1 材料与方法  31-33
    3.1.1 材料  31-32
    3.1.2 方法  32-33
  3.2 结果与分析  33-39
    3.2.1 分离试验结果  33-34
    3.2.2 性状观察与子实体诱导结果  34-39
  3.3 结论与讨论  39-53
4 云南几种地生兰内生菌根真菌的筛选  53-64
  4.1 材料与方法  53-56
    4.1.1 材料  53-55
    4.1.2 方法  55-56
  4.2 结果与分析  56-61
  4.3 结论与讨论  61-64
5 春兰、墨兰、虎头兰、齿瓣石斛、铁皮石斛、玫瑰石斛、卡特兰的菌根显微结构观察  64-75
  5.1 材料与方法  64
    5.1.1 材料  64
    5.1.2 方法  64
  5.2 结果与分析  64-67
  5.3 结论与讨论  67-75
    5.3.1 侵入途径  67-68
    5.3.2 菌丝、菌丝结在根中的分布  68
    5.3.3 菌丝的活力  68-69
    5.3.4 针状结晶  69
    5.3.5 淀粉粒  69-75
6 春兰、墨兰、虎头兰菌根的超微结构观察  75-84
  6.1 材料与方法  75
    6.1.1 材料  75
    6.1.2 方法  75
  6.2 结果与分析  75-78
    6.2.1 春兰菌根的超微结构  75-76
    6.2.2 墨兰菌根的超微结构  76-77
    6.2.3 虎头兰菌根的超微结构  77-78
  6.3 结论与讨论  78-84
参考文献  84-89
致谢  89

云南几种濒危野生兰花菌根真菌的筛选及菌根结构研究

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