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牛血SOD的分离纯化及性质研究

作　者: 孟静波
导　师: 赵寿经；胡铁军
学　校: 吉林大学
专　业: 农业工程
关键词: 牛血 Cu·Zn-SOD 提取分离纯化性质冻干粉稳定性
分类号: S852.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
下　载: 585次
引　用: 3次
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内容摘要

SOD（超氧化物歧化酶的简称）是一种抗氧化酶,它所催化反应的作用底物是氧自由基（O₂^-）,因而它是作用机制很清楚的氧自由基清除剂,而自由基又是人体代谢过程中最主要的破坏分子,也就是说机体的生老病死与自由基的关系最大。本文以牛血为材料,对血液中的SOD进行了提取、分离和纯化等研究,不同于以往的有机溶剂如丙酮、乙醇—氯仿等沉淀提取、柱层析纯化等方法,同时探讨了工艺的稳定性及可行性,从而解决集中屠宰带来的大量血污染问题,又给人类的健康带来保障。本文主要技术在于无机溶剂（氯化铜）提取等分离纯化,经过多次试验,证明该工艺提取的SOD粗酶液收率高,而经乙醇—硫酸铵变性沉淀所得的SOD产品比活大,较以往的有机溶剂提取生产周期短,成本低,无有机溶剂的毒副作用,该工艺避免了柱层析生产不上规模的瓶颈问题,可操作性强,实现了大量的血资源的利用。

全文目录

第一章绪论  10-32
  1.1 选题的目的和意义  10
  1.2 文献综述  10-15
    1.2.1 SOD 种类、分布与分子进化  11-13
    1.2.2 SOD 的结构与分子进化  13-15
      1.2.2.1 Cu·Zn-SOD 的结构与分子进化  13-14
      1.2.2.2 Mn-SOD、Fe-SOD 的结构与分子进化  14-15
  1.3 SOD 的催化作用机制  15-19
    1.3.1 SOD 的作用底物—自由基  15-16
    1.3.2 自由基引起的疾病  16-17
    1.3.3 自由基的产生  17-18
    1.3.4 SOD 的催化作用机制  18-19
  1.4 SOD 的理化性质  19-25
    1.4.1 SOD 的电泳性质  20-21
    1.4.2 SOD 的光谱性质  21-22
    1.4.3 SOD 的电子顺磁波谱  22
    1.4.4 SOD 的稳定性  22-25
  1.5 SOD 的生理功能  25-28
    1.5.1 SOD 人体的营养保健作用  25
    1.5.2 SOD 在医药上的应用  25-26
    1 5.3 SOD 在食品工业上的应用  26-27
    1.5.4 SOD 与美容保健  27-28
    1.5.5 SOD 与抗衰老  28
  1.6 SOD 的基因工程进展  28
  1.7 SOD 来源制备及分离提纯  28-30
    1.7.1 由动物血提取  28-29
    1.7.2 从植物中提取  29
    1.7.3 微生物SOD 的研究  29
    1.7.4 应用基因工程生产SOD  29
    1.7.5 SOD 的分离提纯  29-30
  1.8 SOD 活力测定  30-32
    1.8.1 如何才能准确测活  31
    1.8.2 曲线的直线化  31-32
第二章 SOD 的分离纯化  32-44
  2.1 引言  32
  2.2 材料和方法  32-38
    2.2.1 材料  32-33
      2.2.1.1 原料  32
      2.2.1.2 试剂  32-33
    2.2.2 仪器  33-34
    2.2.3 实验所用缓冲液的配方  34
    2.2.4 实验方法  34-38
      2.2.4.1 验证工艺路线的可行性  34-35
      2.2.4.2 具体的实验操作  35-36
      2.2.4.3 重要的实验操作  36-38
  2.3 数据与结果  38-41
    2.3.1 工艺流程  38
    2.3.2 牛血中分离SOD 的pH 确定  38-39
    2.3.3 Cu2+浓度在SOD 提取中对SOD 活力的影响  39-40
    2.3.4 最佳热变性的温度  40-41
  2.4 分析与讨论  41-44
    2.4.1 pH 对SOD 酶活力的影响  41
    2.4.2 加入Cu2+对SOD 酶活力的影响  41-42
    2.4.3 热变性温度对SOD 酶活力的影响  42
    2.4.4 超滤浓缩法对SOD 纯化技术可操作性强的应用  42-44
第三章 SOD 的稳定性及性质研究  44-58
  3.1 引言  44
  3.2 材料和方法  44-47
    3.2.1 试剂  44-45
    3.2.2 仪器  45
    3.2.3 方法  45-47
      3.2.3.1 牛血SOD 的敏感性试验  45
      3.2.3.2 牛血SOD 的热稳定性  45-46
      3.2.3.3 糖类对牛血SOD 活力的影响  46
      3.2.3.4 有机酸对牛血SOD 活力的影响  46-47
      3.2.3.5 小分子抗氧剂茶多酚对牛血SOD 活力的影响  47
  3.3 数据与结果  47-56
    3.3.1 牛血SOD 的敏感性试验  47-48
      3.3.1.1 牛血SOD 对H_2O_2 的敏感性  47-48
      3.3.1.2 牛血SOD 对NaN_3 的敏感性  48
      3.3.1.3 牛血SOD 对乙醇—氯仿的敏感性  48
    3.3.2 牛血SOD 的热稳定性  48-51
    3.3.3 糖类对SOD 活力的影响  51-53
      3.3.3.1 海藻糖对牛血SOD 活力的影响  51-52
      3.3.3.2 果糖对牛血SOD 活力的影响  52
      3.3.3.3 蔗糖对牛血SOD 活力的影响  52-53
      3.3.3.4 葡萄糖对牛血SOD 活力的影响  53
      3.3.3.5 乳糖对牛血SOD 活力的影响  53
    3.3.4 有机酸对SOD 活力的影响  53-55
      3.3.4.1 柠檬酸对牛血SOD 活力的影响  53-54
      3.3.4.2 草酸对牛血SOD 活力的影响  54-55
      3.3.4.3 磺基水杨酸对牛血SOD 活力的影响  55
    3.3.5 茶多酚对SOD 活力的影响  55-56
  3.4 分析与讨论  56-58
    3.4.1 牛血SOD 的敏感性  56
    3.4.2 牛血SOD 的热稳定性  56
    3.4.3 糖类对SOD 活力的影响  56
    3.4.4 有机酸对SOD 活力的影响  56
    3.4.5 小分子抗氧剂对SOD 活力的影响  56-58
第四章全文总结  58-61
  4.1 结论  58-60
  4.2 建议  60-61
参考文献  61-64
摘要  64-67
Abstract  67-70
致谢  70

牛血SOD的分离纯化及性质研究

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