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磁性微粒在靶向载药及免疫学检测中的应用研究
作 者: 张连营
导 师: 崔亚丽;陈超
学 校: 西北大学
专 业: 微生物学
关键词: 磁性微粒 靶向治疗 免疫学检测 丙型肝炎病毒抗体 白细胞介素-8
分类号: R318.08
类 型: 硕士论文
年 份: 2006年
下 载: 198次
引 用: 5次
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内容摘要
磁性微粒(magnetic particles)是由超顺磁性纳米粒子与高分子或无机材料等形成的胶态液体复合材料,兼有在外磁场中可分离性和对生物分子可标记性,近年来,磁性微粒作为一种新型磁性载体,广泛应用于靶向载药、免疫学检测、细胞分选及核酸分离纯化等生物医学领域。 本文主要探讨了磁性微粒在靶向载药及免疫学检测中的应用。 在靶向载药实验中,应用磁性壳聚糖微球(magnetic chitosan nanoparticles)为载体,偶联药物阿霉素(doxorubicin,DOX),比较了载阿霉素磁性壳聚糖微球与单纯阿霉素在肝瘤SD大鼠血液及各主要组织中的含量及分布差异。结果表明:磁性壳聚糖微球载药后,可避免药物在血液中只形成一次血浆峰浓度,延长血药时间,并改变药物在各主要组织中的分布;磁性壳聚糖微球可明显提高药物在靶组织中的浓度,降低药物在心脏等非靶组织中的浓度,对于提高肿瘤治疗,降低药物对正常组织的毒副作用具有重要意义。 以磁性微粒作为固相载体,包被丙型肝炎病毒(HCV)重组抗原一多蛋白融合抗原(MpAg),建立了定性检测血液中的抗-HCV抗体的方法。对该方法的稳定性、可靠性等进行了考察,并应用该方法检测献血员及临床病人血液中的抗-HCV抗体。结果表明:以磁性微粒为载体进行血液抗-HCV抗体检测,稳定性好,结果可靠,符合临床要求。 以磁性微粒作为固相载体,包被人白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)单克隆抗体,定量检测血液中的IL-8含量。通过对HRP-标记抗体稀释度及温育时间的优化,建立了IL-8测定的标准曲线,确定了该方法的最低检测限、回收率等参数,并应用该方法测定了正常人及肝细胞癌(HCC)患者血液中IL-8的含量。结果表明:与传统酶标板相比较,磁性微粒作为固相载体可明显提高检测的灵敏性,其回收率等参数均符合免疫学检测要求。
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全文目录
目录 4-6 常用缩略词表 6-7 中文摘要 7-8 ABSTRACT 8-10 第一章: 文献综述 10-28 1 磁性微粒概述 10-11 2 磁性微粒的分类及制备 11-15 2.1 磁性流体 11 2.2 磁性高分子复合微粒 11-13 2.3 磁性无机物复合微粒 13-15 3 磁性微粒在生物医学中的应用 15-28 3.1 免疫学检测 15-17 3.2 靶向载药 17-21 3.3 细胞分选 21-23 3.4 酶的固定化 23-24 3.5 分子生物学 24-28 第二章: 磁性壳聚糖微球载阿霉素在肝瘤大鼠血液及组织中的含量及分布 28-37 1 材料和方法 28-32 1.1 材料 28-29 1.2 方法 29-32 2 结果与讨论 32-36 2.1 磁性壳聚糖微球吸附DOX的实验结果 32-33 2.2 肝脏肿瘤模型的建立 33 2.3 阿霉素在大鼠血液中的含量变化 33-34 2.4 阿霉素在各组织中的分布 34-36 3 结论 36-37 第三章: 磁性微粒检测抗-HCV抗体方法的建立 37-47 1 材料和方法 37-41 1.1 材料 37-39 1.2 方法 39-41 1 .2.1应用金磁微粒检测抗-HCV抗体的原理 39-40 1.2.2 HCV Mp Ag的包被 40 1.2.3 磁性微粒检测抗-HCV抗体的基本步骤 40-41 2 结果与讨论 41-46 2.1 Mp Ag的包被 41-42 2.2 包被抗原量和抗体最佳工作浓度的选择 42-43 2.3 温育时间的选择 43-44 2.4 稳定性考察 44-45 2.5 临界值的确定 45-46 2.6 血样检测 46 3 结论 46-47 第四章: 磁性微粒检测IL-8方法的建立 47-57 1 材料和方法 47-50 1.1 材料 47-48 1.2 方法 48-50 2 结果与讨论 50-56 2.1 抗体的包被 50-51 2.2 金磁微粒检测IL-8条件的优化 51-53 2.3 IL-8标准曲线的制作 53 2.4 方法学考证 53-54 2.5 肿瘤病人血样的IL-8含量 54-56 3 结论 56-57 全文小结 57-58 参考文献 58-66 致谢 66-67 攻读硕士学位期间的科研成果 67
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医用一般科学 > 生物医学工程 > 一般性问题 > 生物材料学
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