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衣霉素预处理对脓毒症乳鼠心肌细胞活性及线粒体功能的影响

作　者: 闫姮
导　师: 姚尚龙
学　校: 华中科技大学
专　业: 麻醉学
关键词: 衣霉素内质网应激 GRP78 脓毒症心肌细胞线粒体
分类号: R459.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:观察衣霉素预处理诱导适度内质网应激对脓毒症乳鼠心肌细胞活性及线粒体功能的影响。方法:分离纯化乳鼠心肌细胞,进行体外培养。第一部分:观察不同浓度衣霉素对心肌细胞内质网应激的影响。实验分为4组:对照组(C),0.05μg/ml衣霉素组(T0.05),0.1μg/ml衣霉素组(T0.1),0.5μg/ml衣霉素组(T0.5)。Western Blot测定各组心肌细胞GRP78蛋白表达变化,确定适宜衣霉素浓度。第二部分:观察衣霉素预处理诱导适度内质网应激对脓毒症乳鼠心肌细胞活性及线粒体功能的影响。实验分为四组:对照组,衣霉素组,LPS组,衣霉素预处理+ LPS组。MTT测定各组心肌细胞存活率,荧光显微镜观察线粒体膜电位变化,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)产量。结果:第一部分:与对照组相比T0.05,T0.1组GRP78蛋白表达无明显变化,T0.5组表达显著增加(P<0.01)。第二部分:单纯0.5μg/ml衣霉素作用对心肌细胞活力及线粒体功能无明显影响。1μg/ml LPS对心肌细胞存活率无明显影响,但可致线粒体膜电位下降,ROS产量明显增高(P<0.05)。衣霉素预处理可改善LPS所致心肌细胞线粒体膜电位的丧失,同时细胞内ROS产量明显减低(P<0.01)。结论:0.5μg/ml衣霉素可诱导原代乳鼠心肌细胞产生适度内质网应激,上调GRP78蛋白表达,不降低细胞存活率,对线粒体功能无影响。1μg/ml LPS对心肌细胞存活率无影响,但可致乳鼠心肌细胞线粒体损伤,氧化应激增强。衣霉素预处理诱导适度内质网应激可减轻或逆转继发的LPS刺激所致心肌细胞损害。

全文目录

中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
前言  8-9
材料与方法  9-16
结果  16-20
讨论  20-23
结论  23
参考文献  23-26
综述  26-36
  参考文献  33-36
致谢  36

衣霉素预处理对脓毒症乳鼠心肌细胞活性及线粒体功能的影响

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