学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示
西罗莫司对大鼠调节性T细胞的分化、增殖的影响及其意义
作 者: 饶建华
导 师: 张峰
学 校: 南京医科大学
专 业: 普外科
关键词: 西罗莫司 TGF-β 调节性T细胞 CD4~+CD25~+T细胞 FoxP3 IL-10 肝脏 缺血再灌注损伤
分类号: R965
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 16次
引 用: 0次
阅 读: 论文下载
内容摘要
第一部分:西罗莫司体外诱导大鼠初始CD4+T细胞为调节性T细胞目的:采用西罗莫司在体外诱导初始CD4+T细胞为调节性T细胞,并了解其诱导的机制。方法:体外分离出大鼠外周血PBMC内的Naive CD4(CD4+CD25- CD62L+T)细胞,在体外经过anti-CD3/CD28-beads的TCR刺激后,伴有IL-2,和/或TGF-β,和/或西罗莫司诱导7天后,检测细胞表面CD4+、CD25+、CD127low等和细胞内的FoxP3,CTLA-4等的表达。通过混合淋巴细胞培养分析诱导后细胞体外抑制活性。结果:西罗莫司能够诱导TCR刺激后的Na?ve CD4细胞成为FoxP3+T细胞,西罗莫司的该作用在加入ALK5阻断剂后消失。西罗莫司联合TGF-β能够诱导出免疫抑制功能的CD4SRL,该细胞表达膜表面的TGF-β,其体外抑制功能在加入ALK5阻断剂后丧失。结论:西罗莫司能够增加CD4+T细胞FoxP3的表达依赖于TGF-β信号;西罗莫司能够联合TGF-β在体外诱导出类似于nTreg表型的FoxP3+ T细胞。这群细胞高表达趋化因子的受体,该细胞本身在TCR刺激时并不在增殖。西罗莫司联合TGF-β诱导的Treg表达膜表面的TGF-β,其抑制活性依赖于mTGF-β。第二部分:西罗莫司诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞的增殖目的:探讨西罗莫司(SRL)对大鼠体内CD4+CD25+ FoxP3+调节性T细胞的影响。方法:将200+220g的清洁级大鼠20只随机分成实验组和对照组(10只/组),实验组每只灌胃SRL 2mg/kg/d,对照组灌胃每天给予等体积的生理盐水,共两周。无菌件下下腔静脉采血,并分离脾脏及胸腺,制备单个核细胞悬液。采用流式细胞术检测大鼠外周血,脾脏及胸腺内CD4+CD25+T细胞的占单个核细胞的比例,实时定量PCR(real-time PCR)检测大鼠脾脏细胞FoxP3 mRNA的表达,采用ELISA检测外周血血清的TGF-β和IL-10的含量。结果:实验组大鼠外周血,脾脏和胸腺中CD4+CD25+T细胞的比例较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。real-time PCR显示实验组大鼠脾脏细胞FoxP3 mRNA的表达明显高于对照组,约为对照组的4.1倍。外周血ELISA结果显示实验组TGF-β和IL-10显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论: SRL能够诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+调节性T细胞增殖,且增加体内免疫抑制性细胞因子TGF-β和IL-10的分泌。第三部分:西罗莫司预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用目的:探讨西罗莫司(SRL)预处理对大鼠肝脏缺血再灌注的保护作用及机制。方法:将220-250克雄性SD大鼠48只随机分成4组(12只/组),A组:生理盐水假手术组,B组:西罗莫司假手术组,C组:生理盐水实验组,D组:西罗莫司实验组。西罗莫司组每只灌胃西罗莫司2mg/kg/d,生理盐水组每天灌胃等体积无菌生理盐水,共两周。建立大鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型,复流24h后采集标本,测定血清中转氨酶ALT和AST,光镜下观察HE染色肝组织的变化,采用流式细胞术检测大鼠肝脏组织中CD4+CD25+T细胞占单个核细胞的比例,real-time PCR检测大鼠肝脏细胞FoxP3 mRNA的表达,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中TGF-β,IL-10的含量。结果:西罗莫司实验组ALT及AST较生理盐水实验组明显降低(P<0.05),组织学损伤也明显减轻;各组肝组织中CD4+CD25+T细胞占单个核细胞的比例分别是(6.12±1.87)%,(22.36±6.75)%,(4.53±1.02)%和(13.29±3.16)%,且西罗莫司预处理组Foxp3 mRNA表达明显高于生理盐水组(P<0.05);ELISA结果显示,西罗莫司预处理能明显增加外周血TGF-β和IL-10的含量(P<0.05)。结论:西罗莫司预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有明显的保护作用,这可能与西罗莫司预处理预先诱导大鼠体内CD4+CD25+FoxP3+T调节细胞分化,增加TGF-β,IL-10的分泌,抑制炎症反应有关。
|
全文目录
缩略词 4-6 摘要 6-9 ABSTRACT 9-13 第一部分 西罗莫司体外诱导大鼠初始CD4+T 细胞为调节性T 细胞 13-31 前言 13 1. 材料与方法 13-16 2. 结果 16-25 3. 讨论 25-26 4. 小结 26-28 参考文献 28-31 第二部分 西罗莫司诱导大鼠体内CD4~+CD25~+FoxP3~+调节性T 细胞的增殖 31-40 前言 31 1 材料与方法 31-33 2. 结果 33-35 3. 讨论 35-36 4. 小结 36-38 参考文献 38-40 第三部分 西罗莫司预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 40-51 前言 40 1. 材料与方法 40-44 2. 结果 44-48 3. 讨论 48-49 4. 小结 49-50 参考文献 50-51 文献综述 51-61 参考文献 56-61 附录 61-72 致谢 72-73
|
相似论文
- 松萝酸与依托红霉素致肝脏毒性的GC-MS代谢组学研究,R965
- TRAIL对肿瘤侵润CD4~+CD25~+ Treg的调节作用,R730.2
- 蛋内注射leptin对肉鸡肝脏胆固醇代谢相关基因及microRNA表达的影响,S831
- GATA2与Smad4相互作用对TGFβ信号通路负调控的初步研究,R363
- 骨髓间充质干细胞预移植1周对大鼠心肌缺血再灌损伤的修复作用,R542.22
- 腺苷介导的侧脑室吗啡预处理对缺血后心肌保护作用,R542.22
- 维生素A不同给药途径对持续性哮喘大鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞及IL-4、IFN-γ细胞因子的影响,R562.25
- 肝脏部分缺血/再灌注损伤对小鼠术后认知功能的影响,R614
- 经鼻给予转化生长因子-β1对氯化锂—匹罗卡品诱导的癫痫持续状态大鼠海马神经元的保护作用,R742.1
- 瘦素对鸡肝脏脱碘酶基因表达与活性的影响,S831
- 金钗石斛多糖减轻脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退及机制研究,R285.5
- 万胜化风丹的急性肝肾毒性及对脑缺血再灌注损伤的保护作用,R285.5
- 葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血压的影响及其机制研究,R544.1
- 长期高盐饮食诱导Wistar大鼠血管重构的机制及替米沙坦干预,R544.1
- Nrf2-ARE通路在离体鼠心缺血/吡那地尔后处理中作用的研究,R96
- ERK1/2和JNK信号通路对大鼠再生肝8种细胞的增殖和凋亡调控作用研究,Q418
- 草鱼NCCRP-1和IL-10基因的克隆和表达,S917.4
- 乙醛脱氢酶2在法舒地尔心肌保护中的作用探讨,R54
- 自体冷血心脏停搏液对婴幼儿体外循环心肌MMP-2影响,R726.5
- 肝脏部分切除对肝脏干细胞增殖的影响,R657.3
- 全脑缺血再灌注大鼠海马CA1区Ngb与Caspase-3的相关性研究,R741
中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
© 2012 www.xueweilunwen.com
|