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珍稀植物连香树组织培养技术体系研究
作 者: 袁丽洁
导 师: 叶永忠
学 校: 河南农业大学
专 业: 植物资源学
关键词: 连香树 组织培养 外植体 快速繁殖
分类号: S792.99
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
下 载: 182次
引 用: 4次
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内容摘要
连香树(Cercidiphyllum japonicum Sieb. et Zucc.)为东亚著名孑遗植物,是国家二级珍贵树种和二级重点保护植物。连香树雌雄异株,结实少。种子细小,天然更新困难,在自然状态下已处于濒危状态。为保护这一珍贵植物资源,利用组织培养技术扩大其种群数量,是保护稀有和珍贵树种的有效手段。为探索连香树组织培养快速繁殖体系,本试验以连香树一年生带腋芽茎段、叶片、叶柄、芽、当年生带芽茎段、未成熟的种子作外植体,建立了以当年生带芽茎段和未成熟种子为外植体的组织培养体系,研究结果如下:1.当年生带芽茎段是良好的外植体材料。取材季节、取材部位、消毒时间等对启动培养的诱导率影响较大。6月份为最佳的取材季节,顶芽下第1-4芽是取材的较好部位。消毒灭菌用70%酒精10s,然后用0.1% HgCl6-8min为宜。尽管一年生带芽茎段的芽具有良好的萌发潜力,但因污染率较高,导致最终诱导率较低,仅为4.4%,故不是好的外植体材料。同样,越年生冬芽因污染率较高,诱导率仅为4.7%,也不是好的外植体材料。2.授粉后60d左右未成熟的连香树种子无休眠特性,在不加任何激素的MS培养基上能顺利萌发,萌发率达95%。在加有6-BA和NAA的培养基上,种子萌发后胚轴显著加粗,还能产生少量的愈伤组织。3.幼嫩的叶片、叶柄在适宜的培养基上能诱导产生愈伤组织。叶柄比叶片更容易诱导出愈伤组织,诱导率较高,最低的为66.7%,最高可达100%,随培养基激素水平的不同,愈伤组的颜色、质地有差别。叶柄诱导出愈伤组织所需的时间较短,但诱导的量比叶片少得多。4.培养条件以光照白天14h,温度26℃,夜晚10h,温度24℃,光强2000-3000lx为宜。5.当年生带芽茎段最佳启动诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,启动率可达98.2%;最佳继代增殖培养基为:1/2或1/3MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L,增殖系数可达5.3;生根培养基为:1/2MS或1/3MS+6-BA0.05 mg/L或0.1mg/L+IBA1.0mg/L或1.3mg/L,生根率可达90%。未成熟种子初代萌发最佳培养基MS+KT0.5mg/L,萌发率达95%;继代增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L或MS+6-BA0.5mg/L,增殖系数可达6.3;在生根培养基1/2MS+IBA1.0mg/L中,9d即可长出的短根,生根率达95%以上,根数为4-9条。6.连香树幼苗长至4-5cm时即可炼苗。移栽在到蛭石:珍珠岩为1:1的基质上,温度25-30℃,相对湿度80%,成活率可达95%。
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全文目录
致谢 4-8 摘要 8-9 1 文献综述 9-15 1.1 植物组织培养的研究概况 9 1.2 连香树的研究进展 9-15 1.2.1 概述 9-11 1.2.1.1 形态特征与生物学特性 10 1.2.1.2 地理分布和生境 10 1.2.1.3 应用价值 10-11 1.2.1.4 生存现状 11 1.2.2 研究进展 11-15 1.2.2.1 进化与系统学研究 11-12 1.2.2.2 群落及生态学研究 12 1.2.2.3 人工繁育及栽培技术研究 12-14 1.2.2.4 组织培养研究 14-15 2 引言 15-16 3 材料与方法 16-22 3.1 试验整体设计 16 3.2 试验材料 16 3.3 试验方法 16-22 3.3.1 外植体的选择 16-19 3.3.1.1 一年生枝条带腋芽茎段 17 3.3.1.2 幼嫩叶片、叶柄 17-18 3.3.1.3 芽 18 3.3.1.4 当年生带芽茎段 18-19 3.3.1.5 未成熟种子 19 3.3.2 组织培养体系的建立 19-22 3.3.2.1 当年生带芽茎段初代启动培养 19-20 3.3.2.2 继代增殖培养 20 3.3.2.3 生根培养 20-21 3.3.2.4 未成熟种子初代培养 21 3.3.2.5 继代增殖培养 21-22 3.3.2.6 生根培养 22 3.3.3 炼苗移栽 22 3.3.4 试验结果的观测 22 3.3.5 数据分析 22 4. 结果与分析 22-36 4.1 外植体的筛选 22-29 4.1.1 一年生枝条带腋芽茎段 22-23 4.1.2 幼嫩叶片、叶柄 23-25 4.1.3 芽 25 4.1.4 当年生带芽茎段 25-29 4.1.4.1 取材时间、取材部位 25-28 4.1.4.2 组织培养条件的筛选 28-29 4.1.5 未成熟种子 29 4.2 组织培养体系的建立 29-36 4.2.1 当年生带芽茎段 29-34 4.2.1.1 初代启动培养基的筛选 29-30 4.2.1.2 继代增殖培养 30-32 4.2.1.3 生根 32-34 4.2.2 幼种培养 34-36 4.2.2.1 初代培养 34-35 4.2.2.2 继代增殖 35-36 4.2.2.3 生根培养 36 4.3 炼苗移栽 36 5 结论与讨论 36-42 5.1 结论 36-37 5.2 讨论 37-41 5.2.1 外植体的选择 37-38 5.2.2 种子培养 38-39 5.2.3 褐化问题的解决途径 39 5.2.4 愈伤组织发生的形态 39 5.2.5 无菌苗的变异 39 5.2.6 生根培养 39-40 5.2.7 与前人所作工作的比较 40-41 5.3 进一步研究工作的设想 41-42 参考文献 42-45 英文摘要 45-47 图版说明 47-54
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中图分类: > 农业科学 > 林业 > 森林树种 > 阔叶乔木 > 其他
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