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唑来膦酸联合甲氨蝶呤对骨肉瘤细胞增殖抑制作用研究

作　者: 龚海洋
导　师: 蔡郑东
学　校: 第二军医大学
专　业: 外科学
关键词: 骨肉瘤 MG63细胞系二膦酸盐唑来膦酸甲氨蝶吟协同作用
分类号: R738.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:1、观察第三代二膦酸盐类药物唑来膦酸(zoledronic acid,ZOL)及甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)单用在体外对人骨肉瘤细胞株MG63生长的影响。2、进一步研究唑来膦酸与甲氨蝶呤合用对MG63细胞的生长抑制是否具有协同作用。为下一步的试验或临床治疗提供依据。方法:本试验分为单一用药试验、联合用药试验、细胞周期检测三个阶段,采用噻唑盐(MTT)比色法。第一阶段,测定单一使用不同浓度的唑来膦酸与甲氨蝶呤分别在48h,72h,96h对MG-63细胞的生长抑制作用,得出结果后计算IC50值,为第二阶段联合用药提供参考。第二阶段,以适宜配比的唑来膦酸与甲氨蝶呤联合应用,测定其在48h,72h,96h对MG-63细胞的生长抑制作用。并进行统计学分析。第三阶段,采用流式细胞仪检测细胞的生长周期。结果:第一阶段的单药试验结果显示唑来膦酸与甲氨蝶呤对骨肉瘤MG63细胞均有不同程度的生长抑制效应。都有时间-效应、浓度-效应关系。相比之下唑来膦酸作用的时间、浓度依赖性更明显。唑来膦酸对MG63细胞作用72h的IC50值为9.39μmol/L,甲氨蝶呤对MG63细胞作用72h的IC50值为IC50值为50.99mg/L。第二阶段,联合用药试验结果显示单药唑来膦酸组剂量为10μmol/L时,MG63细胞凋亡率分别为48.95%,单用甲氨蝶呤(1、10、100mg/L)时细胞凋亡率为37.68%、45.93%、52.418%,当唑来膦酸(10μmol/L)联合甲氨蝶呤(1、10、100mg/L)时.MG63细胞的凋亡率分别为51.96%、66.77%、69.23%,联合用药组与单药组相比差异有显著性(P＜0.05)。第三阶段试验显示唑来膦酸可将细胞周期阻滞在S期,并可引起细胞凋亡。结论:唑来膦酸与甲氨蝶呤均对人骨肉瘤细胞株MG63有生长抑制作用,均呈时间、剂量依赖关系。唑来膦酸可增强骨肉瘤MG63细胞对甲氨蝶呤的敏感性,两者合用有协同作用。

全文目录

中文摘要  6-7
英文摘要  7-8
英文缩略词表  8-9
前言  9-11
第一阶段试验唑来膦酸、甲氨蝶呤单一作用于骨肉瘤细胞系MG-63的研究  11-18
  (一) 试验目的  11
  (二) 材料和方法  11-15
  (三) 结果  15-17
  (四) 结论  17-18
第二阶段试验唑来膦酸、甲氨蝶呤联合作用于骨肉瘤细胞系MG-63的研究  18-24
  (一) 实验目的  18
  (二) 材料和方法  18-21
  (三) 结果  21-23
  (四) 结论  23-24
第三阶段试验唑来膦酸、甲氨蝶呤对于MG-63细胞周期作用的研究  24-30
  (一) 试验目的  24
  (二) 材料和方法  24-27
  (三) 结果  27-29
  (四) 讨论  29-30
总结  30-32
参考文献  32-34
文献综述  34-47
在读期间发表论文  47
在读期间参加学术会议  47-48
致谢  48

唑来膦酸联合甲氨蝶呤对骨肉瘤细胞增殖抑制作用研究

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