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水体中溶藻细菌EG_(46)的分离及其溶藻特性研究
作 者: 李文波
导 师: 梁运祥
学 校: 华中农业大学
专 业: 发酵工程
关键词: 溶藻细菌 溶藻特性 蜡样芽孢杆菌 土生席藻 水华鱼腥藻 弱细颤藻 小环藻 水华
分类号: X52
类 型: 硕士论文
年 份: 2008年
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内容摘要
本文是为获得水华的应急控制方法而开展的有关溶藻细菌的工作。主要结果如下:1.从发生水华的景观水体中分离到60株细菌,其中编号为EG46的菌株表现出较强的溶藻效果。经16S rDNA序列分析,EG46为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。毒性检测试验表明EG46不产生毒素。2.试验发现,EG46对选用的土生席藻、水华鱼腥藻、弱细颤藻等蓝藻及小环藻均有很强的溶解作用。该菌通过分泌胞外物质溶藻,且从对数期开始分泌溶藻物质,到稳定期溶藻活性物质量达到最大;菌体浓度为5×107 cfu/mL时,7d后对土生席藻去除率达到87.5%。3.光照、pH、盐度及硝酸钠和氯化钙浓度对细菌EG46溶藻效力有较大影响。在光周期(L:D=16 h:8 h)、中性(pH 7)、盐度(4‰NaCl)以及培养基中硝酸钠和氯化钙浓度加倍的环境条件下,EG46具有更强的溶藻效力。4.试验表明EG46对野生藻种具有一定的溶解作用,说明其可能独立应用于小水体来控制藻类水华。
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全文目录
摘要 7-8 Abstract 8-9 1 前言 9-24 1.1 蓝藻水华的成因 9-12 1.2 蓝藻水华的危害 12-13 1.3 水华的主要防治措施 13-22 1.3.1 物理方法 14-15 1.3.2 化学方法 15-16 1.3.3 生物方法 16-22 1.3.3.1 蓝藻病毒防治水华 17-18 1.3.3.2 真菌防治水华 18 1.3.3.3 原生动物防治水华 18-19 1.3.3.4 高等水生生物防治水华 19 1.3.3.5 细菌防治水华 19-22 1.4 溶藻细菌的研究趋势 22-23 1.4.1 PCR技术和16Sr RNA序列分析相结合 22 1.4.2 在分子水平上研究细菌的溶藻机制 22 1.4.3 细菌溶藻能力与生态因素的关系 22-23 1.5 本课题的目的和意义 23-24 2 材料与方法 24-34 2.1 材料 24-28 2.1.1 供试藻种 24 2.1.2 培养基 24-26 2.1.2.1 藻类培养基 24-26 2.1.2.2 细菌培养基 26 2.1.3 试剂 26-27 2.1.4 主要仪器设备 27 2.1.5 采样点 27-28 2.2 方法 28-34 2.2.1 藻的叶绿素a含量测定 28 2.2.2 溶藻细菌的分离和纯化 28 2.2.3 溶藻细菌的溶藻范围试验 28-29 2.2.4 溶藻细菌EG_(46)对土生席藻的溶藻特性 29-30 2.2.4.1 溶藻方式探讨 29 2.2.4.2 不同接菌量下EG_(46)的溶藻效果 29 2.2.4.3 EG_(46)不同生长期上清液溶藻效果比较 29 2.2.4.4 光照条件对EG_(46)溶藻作用的影响 29-30 2.2.4.5 不同pH值下EG_(46)的溶藻效应 30 2.2.4.6 硝酸钠和氯化钙对EG_(46)溶藻作用的影响 30 2.2.4.7 不同盐度下EG_(46)的溶藻效应 30 2.2.5 EG_(46)的16S rDNA序列分析 30-32 2.2.5.1 菌株总DNA的抽提 30-31 2.2.5.2 PCR引物 31 2.2.5.3 PCR扩增目的基因片段 31-32 2.2.6 EG_(46)毒性检测试验 32 2.2.7 EG_(46)对野生藻种的溶解试验 32-34 3 结果与分析 34-49 3.1 溶藻细菌的分离 34 3.2 溶藻细菌的溶藻范围 34 3.3 溶藻细菌EG_(46)对土生席藻的溶藻特性 34-45 3.3.1 溶藻方式探讨 34-35 3.3.2 EG_(46)对土生席藻作用的显微镜观察 35-36 3.3.3 不同接菌量下EG_(46)的溶藻效果 36-37 3.3.4 EG_(46)不同生长期上清液溶藻效果比较 37-39 3.3.5 光照条件对EG_(46)溶藻作用的影响 39-40 3.3.6 不同pH值下EG_(46)的溶藻效应 40-42 3.3.7 硝酸钠和氯化钙对EG_(46)溶藻作用的影响 42-43 3.3.8 不同盐度下EG_(46)的溶藻效应 43-45 3.4 EG_(46)的16S rDNA序列分析 45-46 3.5 EG_(46)毒性检测结果 46-47 3.6 EG_(46)对野生藻种的溶解效果 47-49 4 小结与讨论 49-53 4.1 溶藻细菌的分离 49 4.2 EG_(46)溶藻的作用过程 49-50 4.3 不同菌浓度下EG_(46)的溶藻效力 50 4.4 环境因子对EG_(46)溶藻效力的影响 50-52 4.5 EG_(46)应用前景 52-53 参考文献 53-59 致谢 59
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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境污染及其防治 > 水体污染及其防治
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