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基因芯片筛选TOCP暴露鸡中枢神经OPIDN相关差异表达基因

作　者: 吕虹
导　师: 朴丰源
学　校: 大连医科大学
专　业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 双受体假说有机磷化合物迟发性神经毒性基因芯片
分类号: R318.0
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的以有机磷化合物与PMSF双受体影响假说为理论依据,利用基因芯片技术筛选TOCP暴露鸡迟发性神经毒性相关差异表达基因,为探讨OPIDN作用机制提供特征性基因信息谱。方法成年罗曼鹤母鸡42只,分两批饲养。第一批鸡取24只,随机分为4组,既对照组、750 mg/kg TOCP组、1000 mg/kg TOCP组和1000mg/kg TOCP+40 mg/kg PMSF组。每组6只,动物正常喂养21天,每日观察和记录鸡的行为症状,最后将动物麻醉放血处死。第二批取与第一批同龄18只鸡,随机分为3组,既对照组、1000 mg/kg TOCP组和1000mg/kg TOCP+40 mg/kg PMSF组。每组6只,饲养7天后麻醉放血处死。取各组受试动物的大脑和腰椎,其称重后制成匀浆,对所取组织依次进行总RNA提取、纯化、体外转录合成cRNA探针、cRNA探针生物素标记、与Chiken Genome 4302.0 Araay基因芯片杂交、扫描杂交信号、最后进行芯片数据处理和生物学信息分析。结果两组TOCP暴露组的鸡出现OPIDN症状,并随时间的增加而加重,尤其高剂量TOCP组其6只鸡在第21天全部出现OPIDN症状。然而对照组和TOCP+PMSF组的鸡没有出现OPIDN症状。基因芯片分析结果显示,鸡大脑全基因谱共有基因37894个,腰椎全基因谱共有基因38536个。根据有机磷化合物与PMSF双受体影响假说,对对照组、TOCP组和TOCP+PMSF组鸡的基因表达进行系统分析和比较。其结果表明,大脑组织中OPIDN相关差异表达基因为115个,其中上调基因64个,下调基因51个；腰椎神经组织中与OPIDN相关差异表达基因为100个,其中上调基因41个,下调基因59个。在OPIDN相关差异表达基因中,尤其SLCs家族基因在TOCP暴露组鸡的大脑和腰椎神经组织均有显著的差异表达。其中大脑中SLC16A10基因表达下调3.33倍；SLC9A2、SLC47A2, SLC25A14和SLC19A1基因表达分别上调2.14、2.27、3.18和2.64倍。此外,谷氨酸受体2(GRIN2B)基因表达上调2.74倍,微管蛋白1 (TUBB1)下调3.32倍。腰椎中SLC16A1、SLC35A3和SLC26A8基因表达分别下调2.47、2.75和4.93倍；SLC9A2和SLC25A14基因表达上调2.50和3.67倍。PDEs家族基因在大脑均表达上调,即PDE6B、PDE5A、PDE1A和PDE10A的基因表达分别上调26.75、2.32、2.31和2.38倍,其下游基因CREB5基因在大脑中表达也上调2.21倍。而PDEs家族基因在腰椎中表达却无差异。结论TOCP暴露组鸡的大脑组织中有115个基因的差异表达与OPIDN诱发相关,而腰椎神经组织中有100个基因的差异表达与OPIDN诱发相关。尤其SLCs家族基因和PDEs家族基因的差异表达与OPIDN诱发密切相关。

全文目录

一、摘要  5-9
  (一) 中文摘要  5-7
  (二) 英文摘要  7-9
二、文献综述  9-18
  (一) 综述  9-15
  (二) 参考文献  15-18
三、正文  18-37
  (一) 前言  18-19
  (二) 材料和方法  19-22
  (三) 结果  22-29
  (四) 讨论  29-33
  (五) 结论  33-34
  (六) 参考文献  34-37
四、附录  37-38
五、致谢  38-39

基因芯片筛选TOCP暴露鸡中枢神经OPIDN相关差异表达基因

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