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苦参碱对脂多糖诱导的人胚肾小球系膜细胞STAT1、3及CTGF、PDGF表达的影响

作　者: 苏婕
导　师: 金玉
学　校: 兰州大学
专　业: 儿科学
关键词: 信号转导子与转录激活子系膜细胞脂多糖苦参碱结缔组织生长因子血小板源性生长因子
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

[目的]:原代培养人胚肾小球系膜细胞,观察苦参碱(Ma)对脂多糖(LPS)诱导的人胚肾小球系膜细胞(MC)中信号转导子与转录激活子(STAT)分子1、3,结缔组织生长因子(CTGF)及血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响,探讨苦参碱对原代培养系膜细胞的作用及其抑制增殖的可能机制。[方法]:原代培养人胚肾小球系膜细胞并鉴定,取4—10代细胞进行实验研究。实验分为正常对照组、脂多糖(10μg/ml)组、脂多糖(10μg/ml)+苦参碱(320μg/ml)组,分别于12、24、48h采用Real Time PCR检测STAT1、3、CTGF及PDGF mRNA表达及Western blot检测p-STAT1、3蛋白表达。[结果]:经倒置相差显微镜及细胞免疫荧光鉴定原代培养细胞为肾小球系膜细胞。与正常对照组相比,在12、24、48h时间段,10μg/ml的脂多糖均能够促进原代培养人胚肾小球系膜细胞的增殖,且48h＞24h＞12h(P＜0.01),320μg/ml的苦参碱对脂多糖预处理的系膜细胞均有抑制增殖作用,表现为24、48h抑制更明显(P＜0.01);与正常对照组相比,脂多糖组STAT1、3 mRNA在12h表达增高(P＜0.05),以24、48h增高明显(P＜0.01),CTGF、PDGF mRNA亦明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01),苦参碱处理组较脂多糖预处理组表达明显降低,12h即可抑制(P＜0.05),但在24、48h抑制明显(P＜0.01);与正常对照组相比,脂多糖组P-STAT1在12、24、48h蛋白表达均上调,P-STAT3在24、48h蛋白表达明显上调(P＜0.01),与脂多糖组相比,苦参碱处理组p-STAT1、3蛋白表达均下调,但P-STAT3在12h表达下调不明显(P＞0.05)。[结论]:脂多糖能够刺激人胚肾系膜细胞的增殖,苦参碱能够抑制脂多糖诱导的人胚肾小球系膜细胞的增殖。JAK/STAT信号转导通路分子STAT1、3参与了系膜增生性肾小球疾病形成的信号转导过程。苦参碱抑制增殖的机制有可能是通过下调STAT1、3,降低CTGF及PDGF的分泌实现的。

苦参碱对脂多糖诱导的人胚肾小球系膜细胞STAT1、3及CTGF、PDGF表达的影响

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