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白花曼陀罗提取物杀虫活性研究
作 者: 崔正芳
导 师: 王沫;陈根强
学 校: 华中农业大学
专 业: 农药学
关键词: 植物源杀虫剂 白花曼陀罗 杀虫活性 生物碱 棉铃虫
分类号: S482.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
从植物中寻找具有农药活性的物质,研究开发植物源农药是新农药创制的一条重要途径。我国地域辽阔,拥有丰富的植物资源,这就使得在植物源农药研究开发方面占有很大的资源优势。本研究在前人的研究基础上,以白花曼陀罗为供试材料并对其主要成分、杀虫活性部位进行较为深入的研究,对活性较强的组分进行分离、纯化、光谱分析等,最终明确白花曼陀罗植株主要杀虫活性的化学成分,结果如下:(1)用不同极性的溶剂甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、石油醚提取白花曼陀罗的根、茎、叶、种子和种皮,结果显示,白花曼陀罗中极性成分含量较高,在供试浓度为20mg/mL时,白花曼陀罗叶的乙醇提取物具有多种的作用方式,但对棉铃虫拒食作用最强,72h拒食率为56.4%。(2)采用试管法对白花曼陀罗叶粗提物的成分预试试验表明,白花曼陀罗叶提取物以生物碱成分为主,提取物呈弱碱性,同时也含有鞣质类、萜类、皂甙类和黄酮等物质。(3)以甲基红-溴甲酚绿为指示剂,采用滴定法测得白花曼陀罗不同部位总生物碱的含量分别为:叶提取液的总生物碱含量最高,为2.53 mg/g,其次是种子,为2.31 mg/g,根为1.62 mg/g,茎为1.03 mg/g,种皮含量最小,为0.29 mg/g。不同部位提取物总生物碱含量与杀虫效果呈正相关,即:叶粗提物的拒食作用最大,其次是种子,种皮的拒食作用最小。因此可以初步确定白花曼陀罗中杀虫活性成分主要为生物碱类物质。(4)采用酸性乙醇冷浸法提取白花曼陀罗叶中的生物碱,明确了白花曼陀罗生物碱提取效果的影响因素,结果显示乙醇浓度、提取次数、冷浸时间和固液比对提取效果均有影响,并经L9(34)正交表优化显示最佳的提取工艺为:采用pH 3的80%酸性乙醇溶液提取4次(固液比为1:20),可以较大限度的提取出曼陀罗中的总生物碱。(5)经TLC摸索提取分离条件,采用棉铃虫拒食活性跟踪和柱层析分离相结合的方法从白花曼陀罗叶的氯仿萃取物中分离获得2个单体化合物S1和S2,经鉴定分别为莨菪碱、东莨菪碱。
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全文目录
摘要 8-9 ABSTRACT 9-11 第一章 文献综述 11-23 1 植物源农药的概况 11-21 1.1 植物源农药的研究现状 12-14 1.1.1 植物源杀虫剂的研究现状 12-13 1.1.2 植物源杀菌剂的研究现状 13 1.1.3 植物源除草剂的研究现状 13-14 1.2 生物碱的主要提取方法 14-16 1.2.1 醇—酸水提取法 14 1.2.2 酸水—有机溶剂提取法 14 1.2.3 碱水—有机溶剂提取法 14-15 1.2.4 微波萃取法 15 1.2.5 超临界流体萃取法 15 1.2.6 其它提取方法 15-16 1.3 曼陀罗(Datura stramonium L.)研究概况 16-21 1.3.1 曼陀罗的种类与分布 16 1.3.2 曼陀罗的化学成分 16 1.3.3 曼陀罗在农业上的应用 16-20 1.3.4 曼陀罗在医学方面的应用 20-21 2 问题的提出及论文设计思路 21-23 第二章 白花曼陀罗粗提物生物活性筛选 23-33 1 试验材料和方法 23-25 1.1 供试植物材料 23 1.2 供试虫体 23 1.3 主要试剂及仪器 23-24 1.4 试验方法 24-25 1.4.1 生物活性测定方法 24-25 1.4.2 植物提取液的制备方法 25 2 结果与分析 25-32 2.1 白花曼陀罗各部位不同溶剂粗提物的提取率 25 2.2 活性跟踪标准试虫筛选择结果 25-30 2.2.1 拒食作用测定结果 25-27 2.2.2 触杀作用测定结果 27-30 2.2.3 胃毒作用测定结果 30 2.3 提取部位的选择 30-31 2.4 提取溶剂的筛选结果 31-32 3 结论与讨论 32-33 第三章 白花曼陀罗化学成分的预试验及总生物碱含量测定 33-40 1 试验材料制备和方法 33-35 1.1 白花曼陀罗试液的制备 33 1.2 试剂配制 33-34 1.3 化学成分的测定方法 34 1.4 白花曼陀罗总生物碱含量测定方法 34-35 1.4.1 样品溶液的制备 34 1.4.2 空白滴定试验 34 1.4.3 不同部位的样品溶液总碱含量测定 34-35 1.4.4 加样回收率试验 35 2 试验结果与分析 35-39 2.1 白花曼陀罗叶的化学成分预试验 35-36 2.2 空白滴定试验 36-37 2.3 不同部位的样品总生物碱含量 37-38 2.4 加样回收试验 38-39 3 分析与讨论 39-40 第四章 白花曼陀罗叶生物碱提取工艺研究 40-46 1 材料和方法 40-41 1.1 材料 40 1.2 方法 40-41 1.2.1 乙醇浓度的选择 40 1.2.2 提取溶剂 PH的选择 40-41 1.2.3 提取次数 41 1.2.4 冷浸时间 41 1.2.5 固液比 41 1.2.6 正交试验设计 41 2 白花曼陀罗总生物碱的试验结果 41-45 2.1 乙醇浓度对白花曼陀罗叶生物碱提取效果的影响 41-42 2.2 提取溶剂pH的对白花曼陀罗叶生物碱提取效果的影响 42 2.3 提取次数对白花曼陀罗叶生物碱提取效果的影响 42-43 2.4 提取时间对白花曼陀罗叶生物碱提取效果的影响 43 2.5 固液比对白花曼陀罗叶中总碱提取效果的影响 43-44 2.6 白花曼陀罗总碱提取工艺的优化 44-45 3 结论与讨论 45-46 第五章 白花曼陀罗杀虫活性成分追踪分离与结构鉴定 46-52 1 材料与方法 46-48 1.1 试验材料 46-47 1.1.1 试虫 46 1.1.2 乙醇提取物的制备 46 1.1.3 主要试剂 46-47 1.1.4 主要仪器 47 1.2 方法 47-48 1.2.1 白花曼陀罗叶乙醇提取物分离 47 1.2.2 活性物质纯度检测 47-48 2 结果 48-51 2.1 各萃取物的杀虫活性测定结果 48 2.2 氯仿提取物 TLC检测结果 48 2.3 曼陀罗生物碱一级柱层析结果 48-49 2.4 白花曼陀罗生物碱二级柱层析及纯化结果 49-50 2.5 结构鉴定 50-51 2.5.1 化合物S1的结构鉴定 50 2.5.2 化合物S2的结构鉴定 50-51 3 分析与讨论 51-52 尚待深入研究的问题 52-53 参考文献 53-59 致谢 59-60 附录 60-63
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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 农药防治(化学防治) > 各种农药 > 杀虫剂
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