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肺癌患者TCR Vβ亚家族表达及T细胞功能的研究

作　者: 郭宁宁
导　师: 肖兰凤
学　校: 广东药学院
专　业: 肿瘤内科学
关键词: 肺癌 TCR Vβ亚家族 T细胞功能
分类号: R734.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


背景近年来,随着机体免疫研究的发展,肿瘤免疫治疗已成为肿瘤疾病生物治疗的热点。虽然免疫系统中的T细胞及位于T细胞表面能识别、结合抗原并参与特异性免疫应答的蛋白分子T细胞受体( T cells receptor , TCR)及其Vβ亚家族已有一定的研究,但是,对于肿瘤患者Vβ亚家族的表达特点、规律性及作用机制目前尚不清楚,且国内外对肺癌患者此方面的研究甚少,未能完全明确肺癌患者Vβ亚家族的特征及T细胞的功能特点。目的本实验对肺癌患者外周血T细胞和胸水肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)的TCR Vβ24个亚家族表达、杀伤作用及其免疫记忆进行研究。寻找并分析健康人和肺癌患者Vβ亚家族表达、对肺癌细胞杀伤作用及免疫记忆的规律性及特点,为进一步探讨他们之间的联系及Vβ24个亚家族各自的功能特点,以及更深入的了解肺癌患者机体的基础免疫状态提供理论基础。方法1、分离健康人和肺癌患者的T细胞,按照人TCR Vβ试剂盒要求用流式细胞术方法检测Vβ亚家族的表达,统计分析Vβ24个亚家族的规律性和特点。2、从健康人和肺癌患者体内分离T细胞,经体外IL-2和OKT3刺激,培养20天后,采用MTT法检测健康人和肺癌患者T细胞对肺癌细胞的杀伤效应。3、采用流式细胞术方法检测CD45RO及CD28的表达,统计分析健康人和肺癌患者记忆性T细胞表达的特点。4、流式细胞术检测CD4、CD8及CD4/CD8比值,分析肺癌患者基础免疫状态。结果1、健康人外周血T细胞TCR Vβ24个亚家族全部表达,肺癌患者表达部分Vβ亚家族。49例肺癌患者外周血T细胞Vβ亚家族高表达Vβ3(9/49)、Vβ9(10/49)、Vβ13.2(6/49);31例肺癌患者胸水TIL的Vβ亚家族高表达Vβ3(7/31)、Vβ9(5/31)、Vβ21.3(3/31);Vβ5.2、Vβ5.3、Vβ7.2、Vβ12、Vβ14、Vβ23分散在个别患者中高表达。肺癌患者外周血T细胞与胸水TIL有相同的高表达Vβ亚家族,分别是Vβ3和Vβ9,且胸水TIL比肺癌患者外周血T细胞表达的亚家族少。2、肺癌患者外周血T细胞(46/75)及胸水TIL(53/75)对肿瘤细胞的杀伤作用均高于健康人外周血T细胞(p<0.05),且胸水TIL具有比肺癌患者外周血T细胞的杀伤作用更强的趋势。3、35例肺癌患者外周血T细胞表达记忆表型(29/35)明显多于健康人(4/35)(p﹤0.05),且以终末效应记忆性T细胞表型(17/35)为主;胸水TIL几乎均表达记忆表型;健康人表达初始T细胞表型(31/35)为主。4、肺癌患者T细胞CD4+T和CD8+T及CD4+/CD8+比值表达不在健康值范围内,呈现不规律及比值倒置现象。结论对肺癌患者外周血T细胞及胸水TIL的研究表明,其TCR Vβ24个亚家族存在选择性表达的情况;肺癌患者T细胞杀伤作用高于健康人;肺癌患者T细胞多数表达记忆性T细胞表型,CD4+、CD8+及CD4+/CD8+比值表达紊乱,不在正常值范围内,患者基础免疫紊乱。

全文目录


中文摘要  8-10
英文摘要  10-13
前言  13-15
第一部分 健康人与肺癌患者外周血及胸水 T 细胞 TCR Vβ 亚家族的表达对比  15-29
  引言  15-17
  1.1 材料与方法  17-23
    1.1.1 材料  17-20
    1.1.2 方法  20-23
  1.2 结果  23-26
    1.2.1 健康人、肺癌患者外周血及胸水 T 细胞的 Vβ表达情况  23-26
  1.3 讨论  26-29
第二部分 健康人及肺癌患者胸水T 细胞功能的研究  29-45
  引言  29-33
  2.1 材料与方法  33-35
    2.1.1 材料  33
    2.1.2 方法  33-35
  2.2 结果  35-40
    2.2.1 健康人与肺癌患者 T 细胞杀伤作用的对比  35-37
    2.2.2 记忆性 T 细胞 CD45RO 和 CD28 在健康人、肺癌患者外周血及胸水中的表达  37-39
    2.2.3 健康人、肺癌患者外周血及胸水 T 细胞 CD4、CD8 及 CD4/CD8 比值的表达  39-40
  2.3 讨论  40-45
全文小结  45-46
参考文献  46-52
综述  52-62
  参考文献  59-62
硕士研究生期间发表文章  62-63
中英文缩略语对照  63-65
致谢  65

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 呼吸系肿瘤 > 肺肿瘤
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