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消风散治疗风热犯表型瘾疹（急性荨麻疹）患者的体外实验研究

作　者: 董佩晶
导　师: 高进
学　校: 湖北中医学院
专　业: 中西医结合临床
关键词: 急性荨麻疹消风散外周血单个核细胞细胞因子白细胞介素-4 干扰素-γ型
分类号: R275
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的急性荨麻疹是一种常见的皮肤粘膜过敏性疾病,其特征为具有剧痒的一过性局限性水肿性皮疹。临床上常呈反复发作趋势,给患者带来极大痛苦,对于伴有呼吸道及消化道粘膜水肿的严重病例,可危及生命。因此,对急性荨麻疹的发病机制及其防治的研究已成为医学界的重要课题。现代医学研究发现:T辅助细胞亚群（Th1/Th2）功能失衡与荨麻疹的发病密切相关。荨麻疹患者外周血单一核细胞（PBMC）分泌的Th1细胞因子水平下降,而Th2细胞因子水平升高,经治疗后Th1/Th2细胞因子趋向平衡。荨麻疹属中医“瘾疹”范畴,祖国医学历年来保留了许多治疗荨麻疹的有效方剂,但是对它的研究大多限于临床上的观察,缺乏更深入的实验研究。本实验选用祖国医学中治疗荨麻疹的经典方剂消风散,研究它对风热犯表型瘾疹患者外周血单个核细胞（PBMC）分泌的Th1|Th2细胞因子影响,并对其作用机制进行初步的探讨,为经典方剂消风散治疗分热犯表型瘾疹（急性荨麻疹）提供科学的理论依据。方法1急性荨麻疹患者的选用标准:1.1皮肤粘膜表面复发性风团,持续时间不超过24小时。1.2每周急性发作不少于2次。1.3病程不超过6周。1.4 1周内未使用抗组胺药物,1月内未使用类固醇激素药物及免疫抑制药物。2急性荨麻疹患者排除标准:2.1排除由寒冷、压力、振动、日光、运动、情绪、摩擦等引起的物理性荨麻疹。2.2排除自身免疫性疾病。如甲状腺疾病,白癜风,胰岛素依赖性糖尿病,类风湿性关节炎等。3荨麻疹患者中医辨证分型标准:3.1风热犯表型:风团鲜红,灼热剧痒。伴有发烧、恶寒、咽喉肿痛,遇热则皮疹加重。舌苔薄白或薄黄,脉浮数;3.2风寒束表型:皮疹色白,遇风寒加重,得暖则减,口不渴。舌质淡,舌苔白,脉浮紧;3.3血虚风燥型:反复发作,迁延日久,午后或夜间加剧。伴心烦易怒,口干,手足心热。舌红少津,脉沉细。4人外周血单个核细胞的分离技术急性荨麻疹患者15例和正常人5例体外抽取患者新鲜静脉血5ml,采取Ficoll等密度沉降分离法,得到淋巴细胞和单核细胞,以RPMI1640培养液定容,制成细胞悬液,细胞浓度为1×10⁶/ml。5细胞活力的检测方法:选用台盼蓝排斥试验,以0.4%台盼蓝进行染色,在3min中内计数活细胞达95%以上。6原代细胞的培养:以RPMI1640培养液及96孔细胞培养板体外培养,37℃置CO₂,培养箱中孵育48小时,以2000r/min离心20min,收集上清液-20℃冻存待测。7用ELISA方法检测各组上清液的细胞因子（IL-4、IFN-Υ）的含量。8统计学方法:检测值使用SPSS11.5统计软件包进行方差分析和成对资料的t检验,检测值统计处理的结果用均数±标准差（（?）±S）表示。结果1外周血单个核细胞培养形态和细微结构变化观察:T细胞在体外受到植物血凝素（PHA）的刺激后,发生一系列增生反应,如细胞体积变大,细胞核明显,胞浆增多,出现空泡,染色质疏松,有团块凝集现象,证明淋巴细胞转化为淋巴母细胞。2 PHA的最佳刺激浓度的探测:不同浓度的PHA分别刺激淋巴细胞48小时后,根据INF-γ分泌量的变化发现在10ug/ml左右时达到峰值,但为了保证INF-γ分泌量的稳定性,PHA的刺激浓度最终选择8ug/ml。3消风散对正常单个核细胞增殖的影响:在PHA协同刺激下,各个浓度的消风散作用于单一核细胞的OD492处理值均高于空白对照组,并且浓度在10-3g/ml～10^-6g/ml时均有统计学差异（P＜0.05）。4消风散对荨麻疹患者PBMC上清液中IL-4、IFN-γ分泌量的影响:与空白对照组相比,加入各浓度消风散后IFN-γ含量均有不同程度的增加,且中药浓度在10-5g/ml时IFN-γ含量达到峰值,加入10^-4、10^-5g/ml消风散药液时IFN-γ的含量有统计学差异（P＜0.05）。IL-4的含量有所下降,但无统计学差异（P＞0.05）。

全文目录

中文摘要  4-7
英文摘要  7-12
缩略词表  12-13
前言  13-15
实验研究  15-24
  1 材料和方法  15-17
  2 实验步骤  17-19
  3 结果  19-24
讨论  24-31
结语  31-32
参考文献  32-34
致谢  34

消风散治疗风热犯表型瘾疹（急性荨麻疹）患者的体外实验研究

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