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反应性氮代谢物及其清除剂对NK细胞抗K562细胞作用的影响

作　者: 曾毅力
导　师: 潘敬新
学　校: 福建医科大学
专　业: 内科学
关键词: 反应氮代谢物 NK细胞 K562细胞 白介细胞素-2
分类号: R733.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


目的:探讨外源性、内源性反应性氮代谢产物(RNM)对NK细胞抗K562细胞活性的影响;硫普罗宁、还原型谷胱甘肽和二氢氯组胺清除外源性、内源性RNM、保护NK细胞的作用。方法:1.在NK+K562(E/T=10/1)细胞培养体系中,先后加入外源性ONOO-及其清除剂硫普罗宁、还原型谷胱甘肽和二氢氯组胺,分别观察RNM、K562细胞抑制率、TNF-β、IFN-γ的产量及6小时、24小时NK活细胞百分率变化。2.采用IL-2及PHA为激活剂,加入MO+NK+K562(E/T=10/1,E/MO=10/2)细胞培养体系中,产生内源性RNM,观察不同浓度的硫普罗宁、还原型谷胱甘肽和二氢氯组胺组对RNM的清除作用及K562细胞抑制率、TNF-β、IFN-γ的变化。结果:1.在NK+K562(E/T=10/1)细胞培养体系中,加入外源性ONOO-后,K562活细胞数量和NK细胞活性显著降低;而在NK+K562+ ONOO- (E/T=10/1)组中加入硫普罗宁、还原型谷胱甘肽RNM,分别从260.30±9.51umom/L降低到178.65±10.00 umom/L、185.02±8.166umom/L、二氢氯组胺组无清除作用;NK活细胞百分比分别从79.87±1.021%上升到91.133±0.67%、88.03±1.46%、82.6±0.76%;K652细胞抑制率(KIR)从43.84±0.178%上升到59.35±1.078%、56.64±0.827%、51.41±1.47%;同样TNF-β、IFN-γ产量和较对照组升高。在清除外源性RNM、保护NK细胞、提高NK细胞抗K562细胞活性方面,硫普罗宁与还原型谷胱甘肽作用相似(P>0.05),但均显著优于二氢氯组胺(P<0.01)2.在IL-2/PHA+NK+MO+K562混合培养体系中,加入不同浓度硫普罗宁、还原型谷胱甘肽和二氢氯组胺后,三种药物在清除内源性RNM方面保护NK细胞方面与清除外源性RNM作用相似,TIP组、GSH组随着各药物浓度的增加,RNM、ROM产量逐渐减少,而TNF-β、IFN-γ产量和KIR则逐渐升高;DHT不能清除RNM。结论:外源性ONOO-对NK、K562细胞有毒性,可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降;MO呼吸爆发产生的RNM、ROM可使NK细胞的抗瘤(抗K562)活性下降。硫普罗宁、还原型谷胱甘肽均可通过清除ROM、RNM保护NK细胞,提高NK细胞抗瘤活性,且对ROM、RNM的清除表现出一定的量效关系。在清除ROM、RNM及提高NK细胞对K562细胞的抑制率方面,硫普罗宁、还原型谷胱甘肽效应相当,但均优于二氢氯组胺,且毒副作用较低,有望成为新的免疫佐剂用于白血病的过继性免疫治疗中。

全文目录


一、英文缩略词表  4-5
二、中文摘要  5-6
三、英文摘要  6-8
四、正文  8-26
  引言  8-9
  一 材料与方法  9-14
  二 实验流程  14-15
  三 结果  15-21
  四 讨论  21-26
五、结论  26-27
六、参考文献  27-29
七、致谢  29-30
八、综述  30-35

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病
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