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肾脂肪囊来源脂肪干细胞的体外培养及其生物学特性的研究

作 者: 吴畏
导 师: 郑红光
学 校: 辽宁医学院
专 业: 内科学
关键词: 肾脂肪囊 脂肪干细胞 生物学特性 组织工程
分类号: R329
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 11次
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内容摘要


目的建立肾脂肪囊脂肪干细胞(ADSCs)的体外分离培养方法,鉴定并分析其特有的生物学特性,探索肾脂肪囊源性ADSCs的最佳培养条件,选择更佳的治疗肾脏疾病的干细胞来源。方法选用Wistar大鼠,无菌取出肾脂肪囊内脂肪组织,分离出ADSCs,进行体外培养并扩增,细胞达80%融合时传代,倒置相差显微镜观察细胞形态和增殖情况;采用MTT比色法测定细胞生长曲线研究增殖能力;采用流式细胞术(FCM)检测细胞表面抗原的表达。同时分离出腹股沟区脂肪组织,培养ADSCs与肾脂肪囊源性ADSCs进行对比,初步研究肾脂肪囊源性ADSCs的生物学特性。结果肾脂肪囊脂肪组织分离干细胞量大,分离出的ADSCs成梭形成纤维样细胞形态,呈束状或漩涡状排列,细胞生长活跃,5~6d可达80%融合,生长曲线显示肾脂肪囊ADSCs增殖迅速,细胞24h后进入潜伏期,3~5d为对数生长期,随后进入平台期,细胞传代至第10代,细胞形态及增殖能力未见明显异常;流式细胞术检测示干细胞相关抗原CD29表达率>99%,CD44表达率为52.92%,内皮细胞标志CD31阴性。与腹股沟区脂肪来源ADSCs比较:①相同质量肾脂肪囊和腹股沟区脂肪组织分离培养原代ADSCs显示,肾脂肪囊分离出ADSCs的数量显著超过腹股沟区脂肪组织分离量。②生长曲线分析显示肾脂肪囊ADSCs较腹股沟区ADSCs增殖迅速。③流式细胞术检测示两种干细胞的抗原表达均符合脂肪间充质干细胞抗原标记特性。结论肾脂肪囊源性ADSCs在体外生长稳定,其形态和表面标志均符合脂肪间充质干细胞特性,与腹股沟区来源ADSCs相比,肾脂肪囊来源ADSCs具有分离量大,增殖迅速等特点,可在短时间内扩增到较大数量,可能成为治疗肾脏疾病的较好干细胞来源。

全文目录


摘要  4-8
  中文论著摘要  4-6
  英文论著摘要  6-8
英文缩略语  8-9
前言  9-10
材料与方法  10-16
结果  16-20
讨论  20-23
结论  23-25
本研究创新的自我评价  25-26
参考文献  26-28
附录  28-42
  综述  28-39
  在学期间科研成绩  39-40
  致谢  40-41
  个人简介  41-42

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学
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