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D-serine及NMDAR1在中枢神经系统表达及其与难治性癫痫关系的探讨

作　者: 卢蕾
导　师: 林卫红
学　校: 吉林大学
专　业: 神经病学
关键词: 癫痫颞叶 NMDA D-serine 免疫荧光 western blot
分类号: R742.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：探讨D-serine及NMDA受体在难治性癫痫发病机制中的作用。方法：采用免疫荧光组织化学染色及western blot方法分别检测20例难治性癫痫患者与6例脑外伤患者颞叶脑组织中D-serine、NMDAR1的差异表达。结果：1.临床特点比较：病例组：20例难治性癫痫患者颞叶脑组织,其中男性11例,女性9例,年龄17岁-58岁,平均27.7±11.13(x±S)岁,病程2-29年,平均9.45士7.65(x±S)年,其中14例(70%)患者病程超过5年,7例(35%)患者病程超过10年。发作类型主要表现为复杂部分性发作、全身强直痉挛发作及单纯部分性发作。神经病理(HE染色)改变主要有神经元变性、胶质细胞增生及神经元丢失。20例难治性癫痫患者头部MRI中,4例无明显异常改变,另外16例可见与异常放电相应的异常信号,异常信号主要表现为海马体积缩小、颞叶内侧T2序列及FLAIR呈高信号、侧脑室颞角增大等。长程视频脑电监测均发现异常放电,其中3例轻度异常,17例中重度异常。对照组：6例脑外伤颞叶皮层脑组织,其中男性4例,女性2例,年龄19-55岁,平均年龄36.83±16.31岁。病例组与对照组相比,年龄、性别、所取脑组织解剖部位差异无统计学意义(P>0.05)。2.荧光免疫染色显示,D-serine在难治性癫痫颞叶脑组织中的积分光密度IOD值为13.37±1.88,对照组积分光密度IOD值为9.27±0.62,两组比较,差异有显著性(P<0.05)。3.荧光免疫双标记探讨D-serine在中枢神经系统中的定位,D-serine在难治性癫痫组与对照组中的神经元与神经胶质细胞中均有分布。4. western blot结果显示,NR1有1个出现在105kDa处的蛋白条带。病例组条带的相对灰度值(难治性癫痫组/内参)明显高于对照组的相对灰度值(对照组/内参)。病例组的相对灰度值为0.4175士0.2321,对照组的相对灰度值为0.2402士0.1558,经统计学分析,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：难治性癫痫患者颞叶脑组织中D-Serine广泛表达于星形胶质细胞及神经元,其表达与对照组相比明显增多；难治性癫痫患者颞叶脑组织NMDAR1表达与对照组相比明显增多；星形胶质细胞及神经元释放的大量D-Serine可能通过NMDA受体的过度活化、兴奋性毒性参与癫痫的发病及反复发作。

全文目录

中文摘要  4-6
Abstract  6-11
英文缩写词  11-12
第1章前言  12-14
第2章综述  14-25
  2.1 D-丝氨酸在中枢神经系统内的合成、代谢与分布  14-16
  2.2 D-丝氨酸的生物学功能  16-20
    2.2.1 NMDA受体的概况  16
    2.2.2 NMDA受体与癫痫的关系  16-18
    2.2.3 D-丝氨酸是NMDA受体的内源性配体  18-19
    2.2.4 D-丝氨酸在神经精神性疾病中的应用  19-20
  参考文献  20-25
第3章资料与方法  25-32
  3.1 实验对象  25-27
  3.2 主要试剂及仪器  27
  3.3 实验方法  27-31
    3.3.1 标本的处理  27-28
    3.3.2 D-丝氨酸免疫荧光染色  28
    3.3.3 D-丝氨酸与NeuN、GFAP免疫荧光双重染色  28-29
    3.3.4 Western blot分析  29-31
  3.4 统计学处理  31-32
第4章结果  32-38
  4.1 20例难治性癫痫患者的临床资料,见表4.1  32-35
  4.2 D-丝氨酸在难治性癫痫患者颞叶脑组织中的分布与细胞定位  35-37
  4.3 western blot分析  37-38
第5章讨论  38-42
第6章结论  42-43
参考文献  43-47
作者简介及在学期间所得的科研成果  47-48
致谢  48

D-serine及NMDAR1在中枢神经系统表达及其与难治性癫痫关系的探讨

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