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CTGF及其反义寡核苷酸对体外人晶状体上皮细胞表达COL-Ⅰ、MMP-2、TIMP-2的影响研究

作　者: 谢伟英
导　师: 徐国兴
学　校: 福建医科大学
专　业: 眼科学
关键词: 结缔组织生长因子人晶状体上皮细胞后发性白内障 I型胶原基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶抑制剂-2
分类号: R776.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:研究结缔组织生长因子(CTGF)及其反义寡核苷酸(CTGF-ASON)对体外培养人晶状体上皮细胞(HLECs)I型胶原(COL-I)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响,以期探讨CTGF在后发性白内障(after cataract)发病机制中的作用,探讨应用CTGF反义寡核苷酸预防后发性白内障的可能性。方法:(1)采用不同浓度(0、5、15、30、60ng/ml)的CTGF对体外培养的人晶状体上皮细胞(HLECs)进行诱导,培养24h后用免疫细胞化学染色法及RT-PCR法检测CTGF对HLECs诱导I型胶原(COL-I)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)表达的影响;(2)将HLECs分为正常对照组、CTGF组、CTGF+ Lipofectamine-AS组及CTGF+ Lipofectamine-SC组,分别培养24h后用免疫细胞化学染色法及RT-PCR方法检测人晶状体上皮细胞I型胶原(COL-I)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的表达情况。结果:(1)随着CTGF浓度增加,HLECs表达COL-I和MMP-2增加,并且这种作用随浓度的增加而增强,每两组之间的比较均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);对TIMP-2的表达无明显影响(P>0.05)。(2)CTGF组、CTGF+ Lipofectamine-AS组、CTGF+ Lipofectamine-SC组中HLECs表达COL-I和MMP-2较之正常对照组增加,差异有统计学意义( P<0.01或P<0.05) ; CTGF组较之CTGF+ Lipofectamine-AS组,HLECs表达COL-I和MMP-2更多,两组之间差异有统计学意义(P<0.01);CTGF组与CTGF+ Lipofectamine-SC组比较,HLECs表达COL-I和MMP-2的差异无统计学意义(P>0.05);CTGF+ Lipofectamine-AS组较之CTGF+ Lipofectamine-SC组,HLECs表达COL-I和MMP-2更少,两组之间差异有统计学意义(P<0.01)。CTGF组、CTGF+ Lipofectamine-AS组、CTGF+ Lipofectamine-SC组中HLECs表达TIMP-2较之正常对照组无明显变化,每两组之间两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)CTGF能够诱导HLECs表达COL-I和MMP-2,对HLECs表达TIMP-2无影响;这导致细胞外基质增加,MMP-2/TIMP-2的比例失调,这可能是后发性白内障的发病机制之一。(2)CTGF反义寡核苷酸能够抑制CTGF诱导的HLECs的COL-I、MMP-2表达;而对TIMP-2的表达无明显影响,为预防后发性白内障提供了一种新的思路。

全文目录

缩略语表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-12
第一部分 CTGF 对体外培养的人晶状体上皮细胞表达COL-Ⅰ、MMP-2、TIMP-2 的影响  12-29
  材料与方法  12-21
  结果  21-26
  讨论  26-29
第二部分 CTGF 反义寡核苷酸对体外培养的人晶状体上皮细胞表达 COL-Ⅰ、MMP-2、TIMP-2 的影响  29-37
  材料与方法  29-32
  结果  32-35
  讨论  35-37
结论  37-38
参考文献  38-42
致谢  42-43
综述  43-50
  参考文献  48-50

CTGF及其反义寡核苷酸对体外人晶状体上皮细胞表达COL-Ⅰ、MMP-2、TIMP-2的影响研究

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