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黑腹果蝇CG9138基因在卵子发生过程中的功能研究

作　者: 黄庆雷
导　师: 焦仁杰
学　校: 中国科学技术大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 卵子发生 粘着连接 上皮细胞完整性 滤泡细胞 卵母细胞极性
分类号: Q963
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


果蝇的卵子发生过程是研究细胞生物学和发育生物学中许多基本问题的一个良好模型。我们实验室的研究结果以及现已发表的关于CG9138基因功能的论文均表明,CG9138突变的果蝇在三龄幼虫期致死。这一现象证明CG9138基因在果蝇发育过程中起到非常重要的作用。利用FLP/FRT系统在滤泡细胞中诱导CG9138体细胞突变体克隆的实验表明:如果突变克隆位于卵室的前后两端,会导致多层滤泡细胞的表型。克隆中多层滤泡细胞的细胞极性消失,滤泡细胞间粘着连接(adherens junction)结构的核心成份DE-cadherin和Armadillo蛋白表达和定位的异常。野生型果蝇中卵子发生从第6期开始,滤泡细胞停止细胞分裂,细胞周期从有丝分裂向内复制转换。然而在CG9138突变的滤泡细胞中,额外的细胞分裂能持续到第8期。与野生型滤泡细胞相比,多层的滤泡细胞中Notch信号通路不能被激活,但多层滤泡细胞的表型并不是Notch信号通路异常所导致的。此外,我们还发现多层滤泡细胞会影响卵母细胞的细胞核和Gurken蛋白的定位。总之,CG9613突变导致的滤泡细胞的表型均表明CG9138基因可能在正常的细胞粘连过程中起作用,因而对于正常滤泡细胞单层结构完整性的维持是必须的。

全文目录


摘要  4-5
ABSTRACT  5-6
符号说明  6-9
第一章 研究背景  9-31
  1.1 卵子发生  9-23
    1.1.1 果蝇卵巢的基本结构  9-11
    1.1.2 果蝇的卵子发生过程  11-14
    1.1.3 卵子发生过程中主要信号通路的调控  14-18
    1.1.4 滤泡细胞的分化及周期调控  18-21
    1.1.5 卵母细胞极性决定和AP/DV 轴的建立  21-23
  1.2 滤泡细胞的极性  23-30
    1.2.1 细胞极性蛋白复合体  24-26
    1.2.2 细胞粘连之连接复合体  26-28
    1.2.3 细胞极性的建立及维持  28-30
  1.3 CG9138 基因的研究进展  30-31
第二章 实验材料与方法  31-43
  2.1 果蝇的研究概况  31-36
    2.1.1 果蝇的生活史  31-32
    2.1.2 Gal4 增强子陷阱  32-34
    2.1.3 FLP-FRT 系统介导有丝分裂重组  34-35
    2.1.4 FLPout 的原理  35-36
  2.2 实验果蝇  36-37
  2.3 克隆诱导  37-41
    2.3.1 生殖系克隆（GLC）  37-38
    2.3.2 体细胞克隆（somatic clone）  38-40
    2.3.3 Clonal FLPout 诱导基因异常表达  40-41
  2.4 免疫荧光染色  41-43
    2.4.1 染色步骤  41
    2.4.2 实验抗体  41-42
    2.4.3 所需溶液  42
    2.4.4 激光共聚焦显微镜图象采集  42
    2.4.5 图象处理  42-43
第三章 实验结果与分析  43-62
  3.1 果蝇品系CG9138~1的实验结果  43-50
    3.1.1 CG9138~1 基因的母性影响  43-45
    3.1.2 卵子发生受阻由生殖细胞缺陷所致  45-46
    3.1.3 CG9138~1 基因突变的滤泡细胞出现多层表型  46-47
    3.1.4 CG9138~1基因突变的滤泡细胞ARM 信号增强  47-48
    3.1.5 CG9138~1基因突变的滤泡细胞发生恶性迁移  48-50
  3.2 果蝇品系CG9138~6的实验结果  50-62
    3.2.1 CG9138~6基因的母性影响  50
    3.2.2 CG9138~6基因突变的滤泡细胞出现多层表型  50-54
    3.2.3 多层滤泡细胞影响Ajs 核心成分的表达  54-56
    3.2.4 多层滤泡细胞极性蛋白表达异常  56-57
    3.2.5 卵室后端突变滤泡细胞破坏卵母细胞极性  57-59
    3.2.6 Notch 信号通路在多层滤泡细胞中不能被激活  59-62
第四章 讨论  62-64
第五章 结论与展望  64-65
参考文献  65-72
附录  72-73
在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果  73-74
致谢  74

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中图分类: > 生物科学 > 昆虫学 > 昆虫遗传学
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