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输注人PBMC建立“人—鼠”异种移植物抗宿主病模型
作 者: 陈俊
导 师: 吴雄文
学 校: 华中科技大学
专 业: 免疫学
关键词: 器官移植 异种移植 移植物抗宿主病
分类号: R392
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 9次
引 用: 0次
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内容摘要
在人体内的实验由于道德、伦理、法律等诸方面的制约而受到严格限制,涉及人体细胞的研究一般只能进行体外实验,而体外实验的结果往往与体内情况存在一定的差别;“人-鼠”模型的建立,为在体内研究提供了可能。然而目前对人-鼠模型的报道也较多,但行之有效且较稳定的方法报道甚少。可供借鉴的异种移植物抗宿主病模型(graft-versus-host disease,GVHD)以“人-鼠”模型应用最广泛,但建立的方法也有较多的报道。本研究主要探讨选择合适小鼠品系,优化相关实验条件,建立稳定的“人-鼠”异种移植物抗宿主病(X-GVHD)模型,为研究诱导人T细胞耐受提供动物模型。主要内容与结果如下:本研究选取了裸鼠、NOD/SCID经亚致死剂量γ射线全身照射后,腹腔输注健康人外周血单核细胞(PBMC)建立异种急性X-GVHD模型。通过检测人T细胞在尾静脉血、组织、器官中的浸润情况等指标(采用流式细胞术和免疫组化技术),比较两种模型鼠中人免疫细胞的浸润率,各组生存时间,从而确定建立X-GVHD模型的合适小鼠品系,并摸索人PBMC的输注途径和合适细胞量,以及观察免疫细胞表型变化与功能的最佳时间窗口。结果显示,NOD/SCID鼠更适合诱导“人鼠”X-GVHD模型的小鼠;腹腔输注途径和尾静脉输注途径对建立“人鼠”X-GVHD模型无明显差异;腹腔输注5×107以上人PBMC可以成功建立“人鼠”X-GVHD模型。在采用优化后的实验条件建立模型中,监测人T细胞表型动态变化与功能的最佳时间窗口为7-11天;模型鼠的平均生存时间为14.16±1.77天。本研究的创新点和意义:本研究使用不同的小鼠建立模型,经检测后,建立了“人-NOD/SCID异种急性移植物抗宿主病模型”,进一步优化各项条件,建立了稳定的“人-鼠”X-GVHD模型,该模型为诱导人T细胞耐受的研究提供了实验依据。同时该模型可以用于体内药敏实验研究,预测指导临床治疗方案的选择和设计,以及探索放疗、内分泌治疗、免疫治疗、基因治疗及分子靶向治疗等新型的治疗手段。
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全文目录
英文缩略词表 5-6 中文摘要 6-8 英文摘要 8-10 前言 10-12 材料与方法 12-21 结果 21-27 讨论 27-30 小结 30-31 参考文献 31-34 综述 34-47 参考文献 44-47 致谢 47
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学
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