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水体中雌激素快速生物检测
作 者: 张洪渠
导 师: 刘勇弟;沈根祥
学 校: 华东理工大学
专 业: 环境科学与工程
关键词: 雌激素 酶联免疫法 酵母双杂交法 快速生物检测
分类号: X832
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
本研究以水体中的主要雌激素作为研究对象,引入了两种快速、灵敏、有效的雌激素生物分析方法—酶联免疫法(ELISA)和酵母双杂交法。结果显示:ELISA检测标准曲线线性强(R2>0.98)、重现性好(Pearson相关系数>0.99),对1μg/L的雌二醇(E2)标准样品进行测试,回收率92-118%,相对误差-8-18%,CV均小于30%;采用固相萃取(SPE)-ELISA检测环境样品中的E2含量,方法检测限低至0.5ng/L,CV=3-24%;比较ELISA和化学分析法(LC-MS/MS法)的分析结果,虽然前者的测定结果普遍偏高,且表现出水样组成越复杂偏高程度越大的趋势(偏高2-10倍),但二者的测定结果具有良好的线性相关性(R2=0.9526); ELISA适用于环境样品的高通量筛选或在不具备LC-MS/MS等化学分析设备的情况下对环境样品中目标雌激素进行初步判断;双杂交酵母系对E2表现出良好的剂量-效应关系(R2=0.995)和较高的灵敏度(EC50=5.73×10-11mol/L);采用酵母双杂交法检测环境样品的总雌激素活力,检测限低至6ng/L, CV介于1-17%之间;比较酵母双杂交法和由LC-MS/MS法计算的结果,两者存在显著的差别,线性相关性较差(R2=0.2756);酵母双杂交法适用于检测河流底泥、污水处理厂水样等雌激素活力较大、环境风险较高的水体,同时又可以为评价化合物的(抗)雌激素效应和定量构效关系提供参考。
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全文目录
摘要 5-6 Abstract 6-9 第一章 前言 9-25 1.1 研究背景及目的意义 9-10 1.1.1 研究背景 9-10 1.1.2 目的意义 10 1.2 国内外雌激素及其检测技术研究进展 10-23 1.2.1 雌激素概述 10-14 1.2.2 水体中雌激素的检测技术 14-23 1.3 课题研究内容和技术路线 23-25 1.3.1 研究内容 23-24 1.3.2 技术路线 24-25 第二章 检测用环境水样采集及基本理化指标 25-32 2.1 采样地点和方法 25-27 2.1.1 采样地点 25-27 2.1.2 采样方法 27 2.2 水样水质测试 27-28 2.4 水样基本理化指标 28-32 第三章 酶联免疫法检测水体中雌激素的研究 32-43 3.1 试验方法的筛选与确立 32-34 3.1.1 目标雌激素的确定 32-33 3.1.2 固相萃取浓缩水样中的雌激素 33 3.1.3 酶联免疫法检测水体中的雌激素 33-34 3.2 试验部分 34-36 3.2.1 实验材料 34 3.2.2 试验方法 34-36 3.2.3 数据处理 36 3.3 结果与讨论 36-41 3.3.1 方法的准确度和精密度 36-38 3.3.2 实际水样中雌二醇的含量 38-39 3.3.3 与化学分析结果的比较 39-41 3.3.4 方法的优缺点和适用性 41 3.4 结论 41-43 第四章 酵母双杂交法检测水体中雌激素的研究 43-53 4.1 试验方法的筛选和确立 43-44 4.1.1 目标雌激素的确定 43-44 4.1.2 酵母双杂交法检测水体中的雌激素 44 4.2 试验部分 44-47 4.2.1 试验材料 44-45 4.2.2 试验方法 45-46 4.2.3 数据处理 46-47 4.3 结果与讨论 47-52 4.3.1 方法的准确度和精密度 47-49 4.3.2 实际水样的总雌激素活力 49 4.3.3 与化学分析结果的比较 49-51 4.3.4 方法的优缺点和适用性 51-52 4.4 结论 52-53 第五章 ELISA、酵母双杂交法和LC-MS/MS法的比较和适用性分析 53-56 5.1 三种雌激素检测方法的原理 53 5.2 三种雌激素检测方法的比较 53-55 5.3 三种雌激素检测方法的适用范围 55-56 第六章 结论与展望 56-58 6.1 研究主要结论 56-57 6.2 未来工作展望 57-58 参考文献 58-63 致谢 63
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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境质量评价与环境监测 > 环境监测 > 水质监测
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