学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

桑树内生拮抗细菌Burkholderia cepacia Lu10-1的抑菌机制及对家蚕病害的防治效果研究

作　者: 董法宝
导　师: 牟志美
学　校: 山东农业大学
专　业: 特种经济动物饲养
关键词: 洋葱伯克霍尔德氏菌Lu10-1 发酵上清液 抗菌粗提物 黑胸败血菌 白僵菌 抑菌机制 防治效果
分类号: S884
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 51次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


家蚕细菌病和真菌病每年都给蚕桑生产造成严重的经济损失,现有药物虽有较好的防治效果,但也存在一些缺点,如长期使用能够使病原菌抗药性增强,污染环境,有些药物甚至对人有害等。为克服现有药物的诸多限制性问题,开发新型微生物药剂作为蚕药是一个重要的研究方向。本实验室从桑树健康叶片中分离到一株内生菌Burkholderia cepacia Lu10-1,该菌株对桑炭疽病菌(Colletotrichum morifolium)、桑粘格孢菌(Septogloeum mori)、杨树水泡溃疡病菌(Dothiorella gregaria)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)以及苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringis)等多种动植物病原菌具有较强的拮抗作用,且能够进入桑树体内稳定定殖,呈现出良好的开发前景。本研究通过形态观察法和药理实验法两种方法探讨Burkholderia cepacia Lu10-1菌株对家蚕黑胸败血菌(Bacillus bombysepticus)和白僵菌(Beauveria bassiana)的抑菌机制,研究该菌株发酵上清液对家蚕黑胸败血病和白僵病的防治效果,并探讨其对家蚕生理及茧质的影响。主要研究结果如下:1测定了Lu10-1菌株抗菌粗提物对家蚕黑胸败血菌的拮抗效果和最小抑杀菌浓度。结果表明:抗菌粗提物对黑胸败血菌具有较强的拮抗作用,其抑菌圈直径为18.20 mm;最小抑菌浓度(MIC)和杀菌浓度(MBC)分别为1.56 mg/mL和3.13 mg/mL。2采用分光光度法、电导率法和SDS-PAGE分析等方法测定了Lu10-1菌株抗菌粗提物对黑胸败血菌生长、胞外溶液电导率、胞内外总糖、胞内外蛋白质的影响。结果表明:经抗菌粗提物处理后,黑胸败血菌未出现对数生长期、细胞膜的渗透性发生改变、胞内糖和蛋白质发生渗漏、胞内分子量较大的蛋白出现降解现象。3采用扫描电镜和透射电镜分别观察了Lu10-1菌株抗菌粗提物对黑胸败血菌菌体形态和结构的破坏情况。结果表明:抗菌粗提物能够使黑胸败血菌菌体破裂,细胞内容物流出,形成空腔,最后消融。表明抗菌粗提物的抑菌机制为破坏黑胸败血菌的细胞壁或细胞膜。4测定了Lu10-1菌株抗菌粗提物对家蚕白僵菌的拮抗效果、对孢子萌发和菌丝的抑制作用。结果表明:抗菌粗提物对白僵菌具有较强的拮抗作用,其抑菌圈直径为17.00 mm;抗菌粗提物可以有效的抑制白僵菌孢子的萌发和菌丝的生长。5采用光学显微镜、扫描电镜和透射电镜分别观察了Lu10-1菌株抗菌粗提物对白僵菌孢子、菌丝的形态和结构的破坏情况。光学显微镜观察结果表明:抗菌粗提物作用于孢子后,孢子出现聚集、内容物分布不均、变形、空腔及胞壁断裂等异常,作用于菌丝后,菌丝出现变粗、扭曲、皱褶、膨大、消融等现象;电镜观察结果表明:抗菌粗提物能够使白僵菌孢子和菌丝的细胞质浓缩,质壁发生分离,细胞壁变薄、破裂,内容物流出,形成空腔。说明抗菌粗提物的抑菌机制为破坏白僵菌的细胞壁或细胞膜。6测定了Lu10-1菌株发酵上清液对家蚕黑胸败血病和白僵病的防治效果、及对家蚕生长发育和茧质的影响。结果表明:发酵上清液对黑胸败血病和白僵病具有较好的防治效果,对黑胸败血病的预防和治疗有效率分别为41.19%和24.00%,对白僵病的预防和治疗有效率分别为55.88%和34.00%;发酵上清液对家蚕的生长发育和茧质无不良影响。

全文目录


摘要  9-11
Abstract  11-14
英文缩写说明  14-15
第一章 引言  15-27
  1 抗菌物质抑菌机制研究进展  15-19
    1.1 干扰病原菌细胞壁的形成  15-16
    1.2 损伤病原菌细胞膜的功能  16-17
    1.3 抑制病原菌细胞蛋白质的合成  17
    1.4 作用于病原菌能量代谢系统  17-18
    1.5 干扰病原菌核酸合成  18-19
  2 植物内生细菌概述  19-22
    2.1 植物内生细菌的定义  19
    2.2 植物内生细菌的分布和种类  19-20
    2.3 植物内生细菌的生物学作用  20-22
      2.3.1 竞争作用  20
      2.3.2 固氮作用  20-21
      2.3.3 促生作用  21
      2.3.4 诱导植物系统抗性  21-22
  3 洋葱伯克霍尔德氏菌概述  22-25
    3.1 关于洋葱伯克霍尔德氏菌  22
    3.2 产生的抗菌物质  22-23
    3.3 洋葱伯克霍尔德氏菌在农业上的应用  23-25
      3.3.1 促进植物生长  23-24
      3.3.2 生物降解  24
      3.3.3 生物防治  24-25
  4 蚕病防治现状  25-26
  5 本研究的目的及意义  26-27
第二章 Burkholderia cepacia Lu10-1 对家蚕黑胸败血菌的抑菌机制  27-45
  1 材料与方法  27-33
    1.1 材料  27-28
      1.1.1 菌种  27
      1.1.2 培养基及缓冲液  27-28
      1.1.3 主要试剂  28
      1.1.4 主要仪器  28
    1.2 方法  28-33
      1.2.1 抗菌粗提物的制备  28
      1.2.2 抗菌粗提物抗菌活性的测定  28-29
      1.2.3 抗菌粗提物MIC 及MBC 的测定  29
        1.2.3.1 MIC 的测定  29
        1.2.3.2 MBC 的测定  29
      1.2.4 抗菌粗提物对黑胸败血菌生长量的影响  29
      1.2.5 抗菌粗提物对黑胸败血菌细胞膜渗透性的影响  29-30
      1.2.6 抗菌粗提物对黑胸败血菌胞内外总糖的影响  30-31
        1.2.6.1 葡萄糖标准曲线的制作  30
        1.2.6.2 胞内外总糖溶液的制备  30-31
        1.2.6.3 胞内外总糖溶液糖含量的测定  31
      1.2.7 抗菌粗提物对黑胸败血菌胞内外蛋白质的影响  31-32
        1.2.7.1 蛋白质标准曲线的制作  31-32
        1.2.7.2 胞内外蛋白质含量的测定  32
        1.2.7.3 胞内蛋白的SDS-PAGE 分析  32
      1.2.8 抗菌粗提物对黑胸败血菌形态的影响  32-33
      1.2.9 抗菌粗提物对黑胸败血菌结构的影响  33
  2 结果与分析  33-43
    2.1 抗菌粗提物对黑胸败血菌体外抑菌试验结果  33-34
    2.2 抗菌粗提物对黑胸败血菌的最小抑菌及杀菌浓度  34-35
    2.3 抗菌粗提物对黑胸败血菌生长曲线的影响结果  35
    2.4 抗菌粗提物对黑胸败血菌细胞膜渗透性影响结果  35-36
    2.5 抗菌粗提物对黑胸败血菌胞内外总糖影响结果  36-38
    2.6 抗菌粗提物对黑胸败血菌蛋白质影响结果  38-40
    2.7 黑胸败血菌经抗菌粗提物处理后的形态变化  40-41
    2.8 黑胸败血菌经抗菌粗提物处理后的结构变化  41-43
  3 讨论  43-45
    3.1 抑菌机制的研究方法  43
    3.2 关于抗菌粗提物对黑胸败血菌细胞壁的影响  43
    3.3 关于抗菌粗提物对黑胸败血菌细胞膜的影响  43-44
    3.4 关于抗菌粗提物对黑胸败血菌蛋白质的影响  44
    3.5 关于抗菌粗提物对黑胸败血菌的抑菌机制  44-45
第三章 Burkholderia cepacia Lu10-1 对家蚕白僵菌的抑菌机制  45-59
  1 材料与方法  45-48
    1.1 材料  45-46
      1.1.1 供试菌种  45
      1.1.2 培养基  45
      1.1.3 主要仪器  45-46
    1.2 方法  46-48
      1.2.1 Lu10-1 菌株抗菌粗提物的制备  46
      1.2.2 白僵菌孢子悬浮液的制备  46
      1.2.3 Lu10-1 菌株对白僵菌的拮抗作用  46
      1.2.4 抗菌粗提物对白僵菌生长的影响  46-47
      1.2.5 抗菌粗提物对白僵菌孢子萌发的影响  47
      1.2.6 抗菌粗提物对白僵菌孢子形态的影响  47
        1.2.6.1 光学显微镜观察  47
        1.2.6.2 扫描电子显微镜观察  47
      1.2.7 抗菌粗提物对白僵菌孢子结构的影响  47-48
      1.2.8 抗菌粗提物对白僵菌菌丝形态的影响  48
      1.2.9 抗菌粗提物对白僵菌菌丝结构的影响  48
  2 结果与分析  48-58
    2.1 Lu10-1 菌株对白僵菌的拮抗作用  48-49
    2.2 抗菌粗提物对白僵菌生长的影响结果  49-50
    2.3 抗菌粗提物抑制孢子萌发的结果  50
    2.4 抗菌粗提物对白僵菌孢子形态的影响结果  50-54
      2.4.1 光学显微镜观察结果  50-52
      2.4.2 扫描电镜观察结果  52-54
    2.5 抗菌粗提物对白僵菌孢子结构的影响结果  54
    2.6 抗菌粗提物对白僵菌菌丝形态的影响结果  54
    2.7 抗菌粗提物对白僵菌菌丝结构的影响结果  54-58
  3 讨论  58-59
    3.1 关于抗菌粗提物对白僵菌细胞壁的影响  58
    3.2 关于抗菌粗提物对白僵菌细胞膜的影响  58-59
第四章 Burkholderia cepacia Lu10-1 对两种家蚕病害的防治效果及生理茧质的影响  59-69
  1 材料与方法  59-61
    1.1 材料  59-60
      1.1.1 供试菌种及蚕品种  59
      1.1.2 培养基  59
      1.1.3 主要仪器  59-60
    1.2 方法  60-61
      1.2.1 不同浓度Lu10-1 菌株发酵上清液的制备  60
      1.2.2 Lu10-1 菌株发酵上清液对家黑胸败血病的防治试验  60
        1.2.2.1 预防试验  60
        1.2.2.2 治疗试验  60
      1.2.3 Lu10-1 发酵上清液对家蚕白僵病防治试验  60-61
        1.2.3.1 预防试验  60-61
        1.2.3.2 治疗试验  61
      1.2.4 Lu10-1 菌株发酵上清液对家蚕生理及茧质的影响试验  61
  2 结果与分析  61-67
    2.1 Lu10-1 菌株发酵上清液对黑胸败血病的防治效果  61
    2.2 Lu10-1 菌株发酵上清液对白僵病的防治效果  61
    2.3 Lu10-1 菌株发酵上清液对家蚕生理及茧质的影响结果  61-67
  3 讨论  67-69
    3.1 关于Lu10-1 菌株对家蚕病害的防治效果  67-68
    3.2 关于Lu10-1 菌株对家蚕病害的防治机制  68-69
结论  69-70
参考文献  70-76
硕士研究生期间发表论文情况  76-77
致谢  77-78

相似论文

  1. 根结线虫生防菌的筛选及其生物有机肥研制,S476.1
  2. 水稻稻瘟病和白叶枯病拮抗细菌的筛选及防治作用研究,S435.111.4
  3. 油菜田日本看麦娘的抗药性研究,S451.2
  4. 甲基硫菌灵和代森锰锌喷施对芝麻品质影响研究,S565.3
  5. 枯草杆菌脂肽抗嗜水气单胞菌的机理和应用研究,S948
  6. 具杀线虫活性植物内生细菌和根际放线菌的筛选及防效研究,S476
  7. 白僵菌产品开发及防治2种主要害虫的研究,S476.1
  8. 油松毛虫受白僵菌感染的组织病理学及菌制剂的研究,S769
  9. 扶桑绵粉蚧生物生态学特性及药剂防治,S433
  10. 葡萄根瘤蚜的化学防治研究及抗性砧木筛选,S436.631
  11. 水稻纹枯病防治药剂的筛选及田间防效,S435.111.42
  12. 纳米银材料对植物病原菌物的抑制活性研究,TB383.1
  13. 复合光触媒对烟草农艺性状、光合生理特性和花叶病防治效果的影响,S435.72
  14. 浏阳霉素毒性及防螨效果研究,S482.52
  15. 低聚糖素、植物营养液防治作物病害研究,S474.3
  16. 生防菌A168活性物质及复配物对水稻纹枯病菌抑制效果和田间防效,S435.111.42
  17. 保山市烟草丛顶病综合防治研究及应用,S435.72
  18. 内蒙古地区草地螟白僵菌的生物学特性及遗传多样性研究,S476.12
  19. 木犀草素对金黄色葡萄球菌的抑菌活性及其作用机制,Q93
  20. 榛花中抑制金黄色葡萄球菌化合物的筛选及抑菌机制研究,Q93
  21. 苹果蠹蛾的疫情监测和防治技术研究,S436.611.2

中图分类: > 农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 蚕桑 > 蚕的病虫害及其防治
© 2012 www.xueweilunwen.com