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He-Ne激光对增强UV-B辐射小麦微丝骨架的影响

作　者: 翟菁如
导　师: 韩榕
学　校: 山西师范大学
专　业: 植物学
关键词: 小麦紫外线-B He-Ne激光原生质体微丝骨架激光共聚焦显微镜
分类号: S512.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

本研究以‘晋麦8号’(Triticum aestivum)小麦为研究对象,采用He-Ne激光(5mW·mm-2)辐照和增强UV-B(10.08 kJ·m-2·d-1)辐射处理小麦,以异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽(FITC-Ph)为探针,利用激光共聚焦扫描显微镜,研究了小麦叶肉细胞原生质体及根尖细胞微丝骨架分布格局与变化,以揭示分束分裂与细胞骨架的关系,为进一步阐明细胞的抗性机理、细胞分裂的生物学机制等奠定理论基础。主要研究结果如下:1、采用适当的酶的种类及较低的酶浓度(纤维素酶R-10 1.5 %、果胶酶Y-23 0.1% ),在适宜的温度(26℃)和酶解时间(3h)内,可以获得大量的原生质体。2、利用SDS-PAGE电泳技术分析和检测小麦幼苗肌动蛋白,结果表明,增强UV-B辐射在一定程度上使肌动蛋白含量受到影响,而He-Ne激光可降低UV-B辐射造成的损伤。3、以小麦叶肉细胞原生质体为材料,在激光共焦扫描镜下,可观察到小麦叶肉细胞原生质体内精细的微丝骨架。对照组(CK)中叶肉细胞原生质体微丝呈现网状或平行状的随机排列。UV-B辐射处理(B)后微丝网络结构遭到破坏,部分聚集成束,部分或呈点状或碎片状分布于原生质体中。UV-B复合处理(BL)后,只有部分微丝网络被打乱,部分聚集成点状分布于胞质中。He-Ne激光组(L)微丝束有些变得较短且分支明显,呈随机排列的交叉网络。4、以小麦根尖细胞为材料,激光共焦扫描镜下可清晰地观察到小麦根尖细胞微丝骨架的有丝分裂时相。UV-B辐射处理后,间期细胞肌动蛋白纤丝排列紊乱;前期细胞周质中肌动蛋白纤丝变为短的片段,可见点状荧光随机分布在周质;中期细胞荧光强度明显减弱,明亮的的微丝片段消失,点状荧光也消失;有丝分裂后期到末期,成膜体区域肌动蛋白纤丝或成弥散状或完全消失,且出现落后染色体,染色体桥,不均等分裂及三束分裂等染色体畸变类型和异常分裂现象。

全文目录

摘要  3-5
Abstract  5-12
1 前言  12-26
  1.1 增强UV-B 辐射对植物的生物学效应  12-17
    1.1.1 增强UV-B 辐射对植物生长发育和形态建成的影响  12-14
    1.1.2 增强UV-B 辐射对植物生理生化效应的影响  14-16
    1.1.3 增强UV-B 辐射对植物遗传物质的影响  16
    1.1.4 植物对UV-B 辐射的相关适应  16-17
  1.2 He-Ne 激光对植物的生物学效应  17-18
    1.2.1 激光的生物学作用机理  17
    1.2.2 He-Ne 激光对植物生长发育的影响  17-18
    1.2.3 He-Ne 激光对植物生理生化活动的影响  18
    1.2.4 He-Ne 激光激光对植物染色体畸变和DNA 的作用  18
  1.3 植物细胞微丝骨架  18-23
    1.3.1 肌动蛋白的结构与性质  19
    1.3.2 肌动蛋白的鉴定  19-20
    1.3.3 肌动蛋白的分离纯化  20
    1.3.4 微丝的结构与性质  20-21
    1.3.5 植物细胞微丝的分布格局  21-22
    1.3.6 微丝骨架的功能  22-23
  1.4 本研究的意义及主要内容  23-26
2 材料与方法  26-30
  2.1 材料  26
  2.2 方法  26-30
    2.2.1 种子的萌发  26
    2.2.2 处理设置  26
    2.2.3 UV-B 辐射处理  26
    2.2.4 He-Ne 激光辐照  26-27
    2.2.5 肌动蛋白的提取  27
    2.2.6 肌动蛋白的SDS-PAGE 分析  27-28
    2.2.7 小麦叶肉细胞原生质体的制备  28
    2.2.8 原生质体活力的鉴定  28
    2.2.9 小麦叶肉细胞原生质体微丝骨架的标记  28-29
    2.2.10 小麦根尖细胞微丝骨架的标记  29
    2.2.11 图象的观察及处理  29
    2.2.12 数据统计分析  29-30
3 结果与分析  30-36
  3.1 He-Ne 激光对增强UV-B 辐射小麦幼苗肌动蛋白的影响  30-32
    3.1.1 小麦幼苗肌动蛋白最佳提取液的选择  30
    3.1.2 He-Ne 激光对增强UV-B 辐射小麦幼苗肌动蛋白含量的影响  30
    3.1.3 肌动蛋白的SDS-PAGE 电泳分析  30-32
  3.2 He-Ne 激光对增强 UV-B 辐射小麦叶肉细胞原生质体微丝骨架的影响  32-33
    3.2.1 原生质体的结构特点与生活力检测  32
    3.2.2 小麦叶肉细胞原生质体微丝骨架的分布  32
    3.2.3 不同处理对小麦叶肉细胞原生质体微丝骨架分布的影响  32-33
  3.3 增强UV-B 辐射对小麦根尖细胞微丝骨架的影响  33-36
    3.3.1 小麦根尖细胞微丝骨架有丝分裂时相  33-34
    3.3.2 增强UV-B 辐射对小麦根尖细胞微丝骨架分布的影响  34
    3.3.3 增强UV-B 辐射对小麦异常分裂细胞微丝骨架分布的影响  34-36
4 讨论  36-42
  4.1 He-Ne 激光对增强UV-B 辐射小麦幼苗肌动蛋白的影响  36-37
  4.2 He-Ne 激光对增强UV-B 辐射小麦原生质体微丝骨架的影响  37-38
  4.3 增强UV-B 辐射对小麦根尖细胞微丝骨架的影响  38
  4.4 植物微丝骨架与信号转导  38-39
  4.5 植物微丝骨架与分束分裂  39-42
5 结论  42-44
致谢  44-46
参考文献  46-58
附录  58-60
图版  60-66

He-Ne激光对增强UV-B辐射小麦微丝骨架的影响

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