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小鼠H22肝癌细胞肺高转移株的建立及其生物学特性的测定和RhoC基因的表达

作　者: 张璐
导　师: 王士勇
学　校: 中国医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: H22肝癌细胞转移 RhoC基因
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的建立小鼠H22肝癌细胞肺高转移细胞株并测定其相关生物学特性和RhoC基因的表达,为研究转移相关分子机制提供经济实用的模型。方法将小鼠H22肝癌细胞(简称为M0)接种于小鼠腹腔形成腹水瘤,取腹水瘤细胞经尾静脉注射,待其肺转移结节形成后,取其肺转移结节处肝癌细胞再次腹腔接种、形成腹水瘤,再尾静脉注射,反复进行此操作后获得第四代肺高转移肝癌细胞(简称为M4)。检测M4在昆明小鼠体内转移能力、体外细胞增殖能力、计算细胞倍增时间、计数细胞分裂指数、Giemsa染色观察其染色体形态、用流式细胞仪检测细胞周期分布,并与M0比较。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定M4细胞RhoC基因mRNA的表达水平,并应用Imagequant软件进行比较分析。结果肺高转移H22细胞M4与M0相比较,尾静脉注射后在第30天和40天,M4肺转移结节总体积明显大于M0；M0与M4细胞体外培养24h、36h、48h、60h及72h,P值均小于0.05,范围从3×10-9至7.2×10-26,M4细胞浓度明显高于M0；M0细胞倍增时间为71.98h,而M4细胞倍增时间缩短为44.10h；M4细胞分裂指数大于M0(P=0.014)；M4细胞周期G0/G1期比例较M0减少(P=0.024),S期比例增多(P=0.022)；染色体数目无差异,但高转移H22细胞染色体存在明显异型性。高转移细胞RhoC基因mRNA的表达高于M0细胞,M0细胞RhoC基因与GAPDH基因表达比值为0.486±0.045,M4细胞RhoC基因与GAPDH基因表达比值为1.011±0.163,存在统计学差异(P=0.0029)。结论建立了小鼠H22肝癌细胞肺高转移细胞株M4,M4转移能力明显增高、体外细胞生长速度快、倍增时间短、分裂期细胞比例多、细胞周期G0/G1期比例较减少、S期比例增多、染色体异型性明显。高转移细胞的RhoC基因mRNA的表达明显增高；RhoC基因的过量表达与小鼠H22肝癌细胞的高转移能力相关。

全文目录

一、摘要  4-8
  中文论著摘要  4-6
  英文论著摘要  6-8
二、英文缩略语  8-9
三、论文  9-20
  前言  9
  实验材料与方法  9-12
  结果  12-17
  讨论  17-19
  结论  19-20
四、本研究创新性的自我评价  20-21
五、参考文献  21-24
六、附录  24-32
  综述  24-30
  在学期间科研成绩  30-31
  致谢  31-32
  个人简介  32

小鼠H22肝癌细胞肺高转移株的建立及其生物学特性的测定和RhoC基因的表达

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