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胸部X-线照射对肺组织Foxp3、TGF-β1表达的影响及其临床意义

作 者: 杨生辉
导 师: 刘莉
学 校: 华中科技大学
专 业: 肿瘤学
关键词: X-线照射 放射性肺损伤 Foxp3 TGF-β1 RORγt
分类号: R818
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:研究X-线照射对小鼠肺组织中Foxp3TGF-β1表达的影响,分析Foxp3和TGF-β1的表达水平变化的意义,进一步探讨X-线照射对肺组织炎症和免疫微环境的影响及其临床意义。方法:将8周龄雌性C57/BL6小鼠随机分为实验组和对照组,实验组小鼠接受12Gy 6MV-X线胸部照射,对照组小鼠不接受照射。在照射后的每个时间点(1、6、12、24、72h及2、4、8、24w),各组均处死3只小鼠。小鼠处死后右肺组织立刻置于-80℃冰箱保存,左肺组织4%多聚甲醛固定24h后制作石蜡标本。用RT-PCR法检测Foxp3和TGF-β1基因的表达情况;采用Western blot法检测Foxp3和RORγt蛋白的表达水平;Masson染色了解肺部纤维化情况,免疫组化技术检测经X-线照射后不同时间点肺组织内Foxp3表达的变化。结果:1.实验组小鼠经X-线照射后Foxp3 mRNA表达水平下降,其中以6h、24h、72h、2w、4w和8w较为明显。Foxp3蛋白表达水平也有不同程度的下降,与对照组相比,实验组在照射后6h、24h、72h、8w时降低较明显。免疫组化结果显示Foxp3主要定位于细胞核和细胞质中,分布于淋巴细胞中。实验组Foxp3表达下降,实验组免疫组化评分(3.48±1.05)与对照组(5.89±1.53)比较,有显著性差异(P<0.05)。实验组在照射后6h、24h和4w时Foxp3较对照组表达降低,差别有显著统计学意义(P<0.01),实验组在照射后1h、12h、24w与对照组相应时间点相比较,Foxp3表达降低,差别有统计学意义(P<0.05)。2.实验组肺组织TGF-β1 mRNA水平在照射后6h、12h、2w和4w时的表达水平明显高于对照组相应的时间点。3. RORγt在照射组和对照组均表达。4. Masson染色显示,实验组小鼠经X-线照射后于24w时可以观察到肺间隔纤维化。结论:1.实验组小鼠胸部经X-线照射后,肺组织Foxp3在mRNA和蛋白水平表达下降,表明X-线照射对Foxp3的表达具有一定下调的作用。2.实验组小鼠胸部经X-线照射后,肺组织TGF-β1 mRNA水平表达高于对照组, Masson染色结果显示实验组小鼠胸部经X-线照射后于24w时可以观察到肺泡间隔纤维化,进一步验证了TGF-β1与放射性肺纤维化的关系。3.胸部X-线照射肺组织Foxp3的表达下调可能与放射性肺损伤存在一定的联系。Foxp3水平降低的机制可能与TGF-β1/RORγt信号通路激活有关,从而可能对肺组织炎症/免疫微环境产生调控作用。

全文目录


中英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-8
Abstract  8-10
前言  10-15
  参考文献  12-15
材料和方法  15-23
  1. 材料  15-16
  2. 实验方法  16-23
实验结果  23-30
讨论  30-33
参考文献  33-36
综述  36-48
  参考文献  41-48
致谢  48

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中图分类: > 医药、卫生 > 特种医学 > 放射医学 > 放射病、放射损伤
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