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TSA对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖及CXCR4表达的影响

作　者: 罗昶
导　师: 赵秋
学　校: 华中科技大学
专　业: 内科学
关键词: 人肝癌细胞株SMMC-7721 组蛋白去乙酰化酶抑制TSA 趋化因子受体CXCR4
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂,曲古霉素(TSA)对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞的增殖,以及对SMMC-7721细胞中趋化因子受体CXCR4在mRNA及蛋白水平的表达的影响。方法:1.分别用200,400,600,800nM/L TSA处理体外培养SMMC-7721细胞24小时,通过细胞增殖实验cck-8法测定TSA相应浓度下的细胞抑制率。2.细胞免疫组化法观察TSA 800nM/L处理后的SMMC-7721细胞的趋化因子受体CXCR4的表达。3.普通PCR及Real-Time PCR法检测细胞经TSA(800nM/L)处理后,CXCR4在mRNA表达上的变化。4.Western blot法检测经过TSA(400nM/L,800nM/L)处理后趋化因子受体CXCR4在蛋白水平上的变化。结果:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA具有显著抑制SMMC-7721细胞增殖的作用,且随着作用浓度的升高抑制率逐渐增强(P<0.05)。肿瘤细胞经TSA处理后,趋化因子受体CXCR4表达显著增强,细胞免疫组化可见,处理组相较对照组细胞阳性率增加,胞浆内棕色颗粒明显增多,普通PCR及Real-Time PCR结果显示,处理后肿瘤细胞中CXCR4 mRNA量较对照组增强2.116倍(P<0.05)。最后,Western blot法检测也表明,TSA处理组肿瘤细胞的CXCR4在蛋白水平也显著上调。结论:组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA在体外对人肝癌细胞株SMMC-7721具有显著的抑制细胞增殖作用,但同时其能在mRNA水平及蛋白水平上调趋化因子受体CXCR4的表达,而该受体报道与诸多恶性肿瘤的侵袭和转移密切相关。总之,我们认为组蛋白去乙酰化酶抑制剂在作为一种新的备受关注的抗肿瘤药物的同时,其可能含有潜在的促进肿瘤侵袭和转移的风险,因此值得我们予以重视,并进一步的加强对其机制的研究和探讨。

全文目录

中文摘要  5-7
Abstract  7-9
绪论  9-11
实验试剂及器材  11-15
实验方法  15-23
实验结果  23-30
讨论  30-33
参考文献  33-36
综述  36-51
  参考文献  46-51
致谢  51

TSA对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖及CXCR4表达的影响

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