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膀胱癌干细胞分离、鉴定与基因修复实验研究
作 者: 冯涛
导 师: 孙光;畅继武
学 校: 天津医科大学
专 业: 外科学
关键词: 膀胱癌干细胞 亚群细胞 裸鼠成瘤 Bmi-1基因
分类号: R737.14
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
目的“肿瘤干细胞学说”认为肿瘤组织中存在的肿瘤干细胞是肿瘤发生、发展的主要原因。肿瘤干细胞(Cancer stem cell,CSC)的提出为基因靶向治疗找到了靶细胞。几种人类肿瘤干细胞已经被成功分离鉴定,但膀胱癌干细胞仍未被分离鉴定。本实验在前期工作成果的基础上,依据畅继武教授的“两类癌”理念和30余年的相关研究,进一步验证膀胱癌干细胞亚群起始和维持肿瘤的能力,并且对膀胱癌干细胞相关基因Bmi-1进行初步的基因修复探讨,为最终分离鉴定膀胱癌干细胞和膀胱癌基因靶向治疗打下实验基础。方法利用免疫磁珠分选技术,分选EMA-CD44v6+亚群细胞,进行该亚群细胞的裸鼠荷瘤实验;通过成瘤细胞传代培养和成瘤标本病理学实验,分析该亚群细胞起始和维持肿瘤的能力。利用医学生物学技术,对膀胱癌干细胞相关基因Bmi-1进行基因信息分析,发现Bmi-1有意义的基因突变;利用RDO基因修复工具,对Bmi-1基因突变进行原位修复;通过基因修复后EMA-CD44v6+亚群细胞的裸鼠荷瘤实验,初步评估基因修复效果。结果将EMA-CD44v6+亚群细胞最小致瘤剂量降至5.0×103个,病理学实验支持该亚群细胞的肿瘤干细胞特性;Bmi-1基因第6个外显子上985bp处G-A点突变是有意义的基因突变;修复后EMA-CD44v6+亚群细胞最小致瘤剂量为1.0×104个,病理学实验证实基因修复使得该亚群成瘤能力有所减弱。结论膀胱癌EMA-CD44v6+亚群细胞有起始和维持肿瘤的能力,具有肿瘤干细胞特性;膀胱癌干细胞相关Bmi-1基因有结构异常,基因修复对降低EMA-CD44v6+亚群细胞的致瘤能力有一定效果。
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全文目录
中文摘要 4-5 Abstract 5-8 缩略语/符号说明 8-9 前言 9-12 研究现状、成果 9-11 研究目的、方法 11-12 一、具有CSC特性的膀胱癌细胞亚群的分离与鉴定 12-31 1.1 对象和方法 12-17 1.2 结果 17-24 1.3 讨论 24-30 1.4 小结 30-31 二、膀胱癌干细胞相关基因修复 31-51 2.1 对象和方法 31-38 2.2 结果 38-45 2.3 讨论 45-50 2.4 小结 50-51 结论 51-52 参考文献 52-59 发表论文和参加科研情况说明 59-60 附录 60-64 综述 64-79 肿瘤干细胞与RDO基因修复技术 64-73 综述参考文献 73-79 致谢 79
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 泌尿器肿瘤 > 膀胱肿瘤
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