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FN-整合素对哮喘大鼠气道平滑肌细胞分泌功能的调控

作　者: 孙晓丽
导　师: 刘瑾
学　校: 华中科技大学
专　业: 呼吸内科学
关键词: 纤维粘连蛋白整合素气道平滑肌细胞哮喘
分类号: R562.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的探讨纤维粘连蛋白(fibronectin, FN)-整合素对哮喘气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells, ASMCs)分泌功能的调控。方法利用组织贴壁法和多酶混合消化法原代培养大鼠ASMCs,并用细胞形态学和免疫组化SABC方法鉴定;将正常大鼠和哮喘大鼠ASMCs均分别种植在涂覆有FN的和空白(无FN涂覆)的玻片上,通过SP免疫组化方法检测细胞爬片中粘着斑蛋白的表达。整合素抗体干预如上处理的正常及哮喘ASMCs,不做干预的如上处理的正常及哮喘ASMCs作为对照组,采用RT-PCR方法检测RANTES(regulated on activated normal T cell expressed and secreted)、转化生长因子-β1(transcription gowth factor-β1, TGF-β1)mRNA的表达水平;ELISA方法检测各组培养上清中RANTES蛋白水平。结果原代培养的细胞呈典型的“谷峰状”生长,胞质内特异性的平滑肌肌动蛋白呈阳性表达,符合平滑肌细胞的形态学特征和生物学特性。FN作用的哮喘大鼠ASMCs粘着斑蛋白的表达明显增加,但未经FN作用的哮喘大鼠ASMCs及经(或未经)FN作用的正常大鼠ASMCs粘着斑蛋白均呈阴性表达。在哮喘细胞中,FN处理组较无FN处理的空白组TGF-β1、RANTES mRNA的表达水平和细胞培养上清中的RANTES蛋白水平均显著增加(P<0.05);整合素抗体+空白组的RANTES、TGF-β1 mRNA表达水平和细胞培养上清中的RANTES蛋白水平较空白组表达显著减少(P<0.05);整合素抗体+FN组的RANTES、TGF-β1 mRNA的表达和细胞培养上清中的RANTES蛋白水平较FN处理组表达显著减少(P<0.05)。结论FN促进哮喘大鼠ASMCs粘着斑蛋白的表达;FN-整合素信号通路可能参与细胞外基质对哮喘大鼠ASMCs分泌功能的调控。

全文目录

缩略词一览表  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-9
前言  9-10
材料和方法  10-17
结果  17-19
讨论  19-23
结论  23-24
参考文献  24-28
附图  28-30
综述  30-43
  参考文献  38-43
致谢  43-44

FN-整合素对哮喘大鼠气道平滑肌细胞分泌功能的调控

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