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彩色马蹄莲2n配子育种研究

作　者: 石景峰
导　师: 吴红芝
学　校: 云南农业大学
专　业: 园林植物与观赏植物
关键词: 彩色马蹄莲 2n配子未减数配子秋水仙素三倍体
分类号: S682.264
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 20次
引　用: 1次
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内容摘要

本文以彩色马蹄莲二倍体植株幼小花序为试验材料,采用化学(秋水仙素)诱导方法对彩色马蹄莲幼小花序进行2n配子诱导,并对2n配子进行鉴定,经细胞学研究,找出2n配子形成的途径及类型。通过筛选,将2n雄配子与正常的1n雌配子进行杂交,种子播种后获得的三倍体植株后代。研究结果如下:1.在彩色马蹄莲的诱导时期的选择中发现,在太阳升起温度逐渐升高的时候最适合用秋水仙素处理,大概时间为夏季8:00,冬季往后延长一小时为9:00。秋水仙素处理的最佳浓度为0.15%;2.采用不同浓度秋水仙素( 0.025%,0.05%,0.1%,0.15%,0.2%)对彩色马蹄莲处于减数分裂Ⅰ期的幼小花序进行诱导,并成功的诱导出了2n雄配子。秋水仙素处理浓度以0.15%的诱导效果最好。2n雄配子出现花粉粒变大,配子形成过程中,出现平行、融合纺锤体,中期较多的单价体,四分体时期出现二分体或三分体等较明显特征;3.彩色马蹄莲花蕾经秋水仙素诱导后,配子出现了明显的加倍现象,染色体数从16条增加到32条,同时有重复加倍现象;4.将筛选得到的2n雄配子与正常的n雌配子进行杂交,待种子成熟后通过无菌播种或无菌培养获得了杂交后代植株。通过染色体检测结果表明:诱导的2n雄配子与正常的n雌配子杂交获得了三倍体后代,染色体数为48(2n=3x=48)。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-8
1 引言  8-19
  1.1 2n 配子概述  10
  1.2 2n 配子的形成  10-12
    1.2.1 2n 配子的形成途径  10-11
    1.2.2 2n 配子形成的遗传学机制及效应  11-12
  1.3 2n 配子的鉴定  12-13
    1.3.1 花粉直径及形态  12-13
    1.3.2 花粉 DNA 含量  13
    1.3.3 细胞学特征  13
    1.3.4 杂交  13
    1.3.5 FDR 配子和SDR 配子的区别  13
  1.4 2n 配子在植物育种中的作用  13-15
    1.4.1 杂种多倍体优势  13-14
    1.4.2 转移野生种中的优良目标基因  14
    1.4.3 创造新的变异  14
    1.4.4 稳定传递杂合性，保持上位性  14
    1.4.5 缩短育种周期，培育三倍体品种  14
    1.4.6 进行有性复壮  14
    1.4.7 进行脱毒，实行实生育种  14-15
    1.4.8 克服自交不亲和性及远缘杂种利用  15
    1.4.9 提高核质兼容性  15
  1.5 2n 配子应用需要解决的问题  15-16
    1.5.1 分离纯化  15
    1.5.2 诱导变异  15-16
    1.5.3 轮回杂交  16
  1.6 秋水仙素在倍性育种上的应用  16-17
    1.6.1 秋水仙素在染色体加倍中的应用  16
    1.6.2 秋水仙素的作用机理  16
    1.6.3 秋水仙素的应用  16-17
  1.7 云南彩色马蹄莲的发展前景  17-18
  1.8 研究的目的和意义  18-19
2 材料与方法  19-23
  2.1 材料  19-20
    2.1.1 供试材料  19-20
    2.1.2 主要仪器  20
    2.1.3 主要试剂  20
  2.2 方法  20-23
    2.2.1 2n 配子诱导  20-21
    2.2.2 2n 配子细胞学观察  21
    2.2.3 花粉粒观察  21
    2.2.4 彩色马蹄莲三倍体培育  21-22
    2.2.5 三倍体彩色马蹄莲植株的鉴定  22-23
3 结果与分析  23-29
  3.1 彩色马蹄莲诱导的最佳时期及秋水仙素处理最佳浓度  23
  3.2 秋水仙素诱导后花粉母细胞减数分裂动态细胞学观察  23-24
    3.2.1 秋水仙素对配子染色体行为的影响  23
    3.2.2 秋水仙素诱导后对减数分裂过程中纺锥体的影响  23
    3.2.3 二分体和三分体的形成  23-24
  3.3 秋水仙素处理后花粉粒大小的检测与 2n 花粉频率的测定  24-25
  3.4 秋水仙素处理后种子结果特性分析及测量  25-26
  3.5 种子组培苗扩繁中培养基的选择  26-28
    3.5.1 不同培养基对丛生芽增殖和生长的影响  26-27
    3.5.2 不同培养基对根系诱导的影响  27-28
  3.6 三倍体形态及鉴定  28-29
    3.6.1 形态观察鉴定  28
    3.6.2 气孔鉴定  28-29
    3.6.3 三倍体的细胞学鉴定  29
4 讨论  29-31
  4.1 化学诱导对减数分裂过程中纺锤体的影响  29-30
  4.2 诱导过程中各减数分裂行为对二分体、三分体及四分体的影响  30
  4.3 秋水仙素诱导对彩色马蹄莲配子染色体数目变化的影响  30-31
  4.4 秋水仙素对于彩色马蹄莲诱导后代的影响  31
  4.5 利用 2n 配子诱导技术获得彩色马蹄莲三倍体植株的优势  31
5 结论  31-33
附图  33-37
附表  37-41
主要试剂的配比方法  41-42
参考文献  42-47
致谢  47

彩色马蹄莲2n配子育种研究

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