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新疆烟粉虱生物型及B型烟粉虱对吡丙醚抗药性风险评估

作　者: 段晓东
导　师: 马德英
学　校: 新疆农业大学
专　业: 动物学
关键词: 烟粉虱生物型吡丙醚抗性遗传力风险评估交互抗性
分类号: S433
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

本文研究了新疆烟粉虱的生物型及B型烟粉虱对昆虫生长调节剂毗丙醚抗药性的时空规律、对其它类杀虫剂的交互抗性,分析和评价了新疆B型烟粉虱对毗丙醚抗药性产生的可能原因及抗药性风险,提出当前形势下,昆虫生长调节剂吡丙醚在新疆烟粉虱综合治理及抗药性治理中的地位和应用策略。主要研究结果如下：1.采用mtDNA COI序列和SCAR分子标记技术监测了新疆乌鲁木齐市和吐鲁番地区的烟粉虱生物型。结果表明,Q型烟粉虱已经入侵新疆,可能有两个以上不同来源,传入地点与江苏(Jiangsu-Q)、武汉(Wuhan-Q)等地Q型烟粉虱密切相关。由乌鲁木齐市花卉市场采集到的HH-1与吐鲁番地区温室不同寄主上采集到的LJ、XHS、QZ烟粉虱与Morocco Casablan-Q, France Gironde-Q, USA California-Q, Jiangsu-Q、Wuhan-Q等5个己知Q型烟粉虱个体COI基因序列相比,同源性为100%。由吐鲁番地区烟草上采集的YC烟粉虱与以上5个己知Q型烟粉虱个体COI基因序列相比,具有共同的3个碱基的区别,是第3位点上的T→G,7位点上的C→T,57位点上的G→C,同源性为99.6%。另外,来自野外杂草、花卉市场、温室、棉田的被测样本JK-S、HH-2、ZH-O、TC、TC2、TC3烟粉虱种群与Bejing-B. Guangdong-B、Hubei-B, USA Florida-B等4个已知B型烟粉虱个体COI基因序列相比,同源性为100%。2.应用着卵叶片浸渍法和浸叶法比较测定了新疆部分地区B型烟粉虱对不同类型杀虫剂的敏感性。结果表明,由于长期用药防治烟粉虱,在新疆不同区域和寄主上B型烟粉虱对杀虫剂的敏感性出现了分化。被测种群对毒死蜱、噻虫嗪及天然除虫菊酯的敏感度低,LC50值分别为71.662-330.855 mg·L-1、223.028-242.420 mg·L-1和107.117-164.639mg·L-1,属于抗性治理的重点品种；对吡虫啉、溴氰菊酯和氟虫腈的LC50值分别为43.47-67.496 mg-L-1、27.881-61.688 mg·L-1 21.808-43.768 mg-L"1,具有较高的抗药性风险,应当重点监测其抗性发展程度；对吡虫清、苦参·烟碱乳油等药剂敏感性高,属于重点保护的农药品种,可以用于新疆烟粉虱的化学防治。另外,除了大剂量、高频率使用杀虫剂的温室烟粉虱品系ZH-O对毗丙醚产生了超过3000倍的抗性外,其余各品系对吡丙醚表现敏感,该药剂仍可作为烟粉虱治理的重要品种之一。3.根据Tabashnik的抗药性现实遗传力分析方法,估算了新疆B型烟粉虱对吡丙醚抗药性的现实遗传力,并对烟粉虱对毗丙醚的抗药性风险进行评估。在室内经过4代的连续筛选,选择压力在50%-70%,筛选后烟粉虱ZH-pyri F4代与筛选前ZH-O F0代相比对吡丙醚的抗性上升了18.50倍,与本地的JK-S敏感品系相比抗性上升超过60000倍。同时,估计了烟粉虱对吡丙醚的抗性现实遗传力为0.3893,假设在田间烟粉虱对吡丙醚抗性的现实遗传力为实验室估计值的一半,h2=0.1946,估计田间抗性风险为,在杀死率为50%-60%,抗性增长10倍,需要6-8代；杀死率为70%-90%,抗性增长10倍,需要3-5代。结果表明,在实验室和田间条件下,新疆B型烟粉虱对吡丙醚均存在产生高水平的抗性风险。4.应用浸叶法测定了汰选后的超级抗毗丙醚种群对不同类型杀虫剂的敏感性变化。结果表明,超级抗毗丙醚的F2代(ZH-pyri F2)和F3代(ZH-pyri F3)种群对氯化烟酰类杀虫剂中的吡虫清和吡虫啉、有机磷类的毒死蜱产生高水平交互抗性。对吡虫清的Rf值达248.04和173.87倍；对吡虫啉的Rf值达60.15和27.50倍；对毒死蜱的Rf值达17.94和68.32倍；对苯基吡唑类的氟虫腈及氨基甲酸脂类的灭多威产生中等水平交互抗性。对氟虫腈的Rf值达30.90和39.22倍；对灭多威的Rf值达6.94和33.22倍。对噻虫嗪、溴氰菊酯、天然除虫菊酯、阿维菌素及苦参·烟碱乳油表现出较低至中等水平的交互抗药性。

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摘要 3-5Abstract 5-9第1章绪论 9-24 1.1 前言 9 1.2 烟粉虱抗药性的发生概况 9-14 1.3 烟粉虱抗药性与生物型的关系 14-16 1.4 研究害虫抗药性遗传力的几种方法 16-23 1.5 本研究的目的和意义 23 1.6 本课题的主要研究内容 23-24第2章新疆烟粉虱生物型测定 24-40 2.1 前言 24-25 2.2 材料与方法 25-28 2.2.1 试验材料 25 2.2.2 DNA提取相关试剂 25 2.2.3 PCR相关试剂 25 2.2.4 基因组DNA的提取方法及检测 25-26 2.2.5 PCR反应条件 26 2.2.6 琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物及目的片段的切胶回收 26-27 2.2.7 PCR产物纯化 27 2.2.8 序列测定与分析 27-28 2.3 结果与分析 28-30 2.3.1 PCR扩增产物 28 2.3.2 烟粉虱不同生物型mtDNA COI的序列差异 28-30 2.3.3 烟粉虱不同生物型mtDNA COI的遗传距离和系统发育树分析 30 2.4 小结与讨论 30-40第3章新疆B型烟粉虱对不同类型杀虫剂的敏感性测定与分析 40-49 3.1 前言 40 3.2 材料与方法 40-42 3.2.1 供试虫原 40-41 3.2.2 供试药剂 41 3.2.3 抗药性的测定方法 41-42 3.3 结果与分析 42-46 3.3.1 不同浓度琼脂的保湿效果 42-43 3.3.2 CO_2麻醉法转移成虫结果 43 3.3.3 冷冻法转移成虫结果 43-44 3.3.4 新疆B型烟粉虱对吡丙醚杀虫剂的敏感性测定 44 3.3.5 新疆B型烟粉虱对氯化烟酰类杀虫剂的敏感性测定 44-45 3.3.6 新疆B型烟粉虱对有机磷类杀虫剂的敏感性测定 45 3.3.7 新疆B型烟粉虱对除虫菊酯类杀虫剂的敏感性测定 45 3.3.8 新疆B型烟粉虱对氨基甲酸酯类杀虫剂灭多威的敏感性测定 45 3.3.9 新疆B型烟粉虱对苯基吡唑类杀虫剂氟虫腈的敏感性测定 45 3.3.10 新疆B型烟粉虱对生物源杀虫剂的敏感性测定 45-46 3.4 小结与讨论 46-49第4章新疆B型烟粉虱对吡丙醚杀虫剂抗性遗传力分析 49-56 4.1 前言 49 4.2 材料与方法 49-51 4.2.1 供试虫原 49-50 4.2.2 试虫饲养方法 50 4.2.3 供试药剂 50 4.2.4 生物测定 50 4.2.5 抗性筛选方法 50 4.2.6 抗性风险的评估和抗性发展速率的预测方法 50-51 4.3 结果与分析 51-54 4.3.1 吡丙醚原药与制剂的对比试验 51-52 4.3.2 新疆B型烟粉虱对吡丙醚的室内筛选和抗性稳定性 52 4.3.3 新疆B型烟粉虱对吡丙醚的抗性现实遗传力分析 52-53 4.3.4 新疆B型烟粉虱对吡丙醚抗性发展速率的预测 53-54 4.4 小结与讨论 54-56 4.4.1 抗性的发展 54-55 4.4.2 新疆B型烟粉虱对吡丙醚杀虫剂的抗性风险分析 55-56第5章新疆B型烟粉虱对吡丙醚杀虫剂的交互抗性研究 56-63 5.1 研究概况 56 5.2 材料与方法 56-57 5.2.1 供试昆虫 56-57 5.2.2 供试药剂 57 5.2.3 生物测定 57 5.3 结果与分析 57-61 5.3.1 ZH-pyri汰选后的烟粉虱种群对吡丙醚的抗性变化 57-58 5.3.2 ZH-pyri抗吡丙醚种群对氯化烟酰类杀虫剂的交互抗性 58 5.3.3 ZH-pyri抗吡丙醚种群对有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂的交互抗性 58 5.3.4 ZH-pyri抗吡丙醚种群对苯基吡唑类杀虫剂氟虫腈的交互抗性 58-59 5.3.5 ZH-OR抗吡丙醚种群对拟除虫菊酯类杀虫剂溴氰菊酯的交互抗性 59 5.3.6 ZH-pyri抗吡丙醚种群对生物源类杀虫剂的交互抗性 59-61 5.4 小结与讨论 61-63 5.4.1 吡丙醚杀虫剂对烟粉虱的交互抗性分析 61-62 5.4.2 合理用药,综合防治 62-63第6章结论 63-65 6.1 新疆烟粉虱生物型测定 63 6.2 B型烟粉虱对不同类型杀虫剂的敏感性测定 63-64 6.3 新疆B型烟粉虱对吡丙醚抗药性现实遗传力及抗药性风险评估 64 6.4 抗吡丙醚B型烟粉虱对不同杀虫剂的交互抗性 64-65参考文献 65-72致谢 72-73作者简介 73

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