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“高热综合症”病猪血清中未知病毒检测方法的建立

作　者: 竺春
导　师: 余旭平
学　校: 浙江大学
专　业: 预防兽医学
关键词: 高热综合症未知病毒血清检测细小病毒
分类号: S858.28
类　型: 硕士论文
年　份: 2007年
下　载: 8次
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内容摘要

2001年7月开始,在浙江省和周边地区大面积爆发了一种主要表现为病猪持续高温、食欲废绝、皮肤发红为主要特征的猪病,有极高的发病率和死亡率，给养殖业带来了极大的破坏。“猪高热综合症”的临床症状和病理现象比较复杂,与呼吸综合征、断奶仔猪多系统衰竭综合征、仔猪渗出性皮炎、猪肾病皮炎综合症以及猪呼吸综合征有某些相似之处,因此不能由单一的病理现象来判断其为何种病原所致。它其实是由多种病原在不同层次上协同作用的结果,一般认为是由PRRS,PCV2等病毒引起动物体免疫抑制,从而导致其它病毒和细菌的继发感染。但迄今为止,各地对该病的病原还没有一个统一的认识,对该病也还没有一个统一的命名,有认为是“蓝耳病”的,“猪瘟”的,“圆环病毒”的等等。国外已经有学者认为可能存在着X因子(即未知病原)导致了该疾病的爆发,而从国内疫苗使用的效果来看,自家组织灭活苗的效果比PRRS-PCV2疫苗的效果要来的好,似乎真的存在着未被发现的病原引起“猪高热综合症”的爆发。而本实验建立的从猪血清中查找出病毒的检测方法,就是为了找出其它可能存在的引起“猪高热综合症”的病毒,为该病的进一步研究提供了依据。本研究以M13噬菌体和NDV病毒作为DNA和RNA模式病毒,分别加入到健康猪血清中,通过核酸抽提,二链扩增,酶切,连接头等一系列步骤后,用接头引物扩增特异性片段,最后对特异性片段进行测序和blast比较分析。实验结果发现扩增出来的特异性片段均为模式病毒的序列片段,无其它细菌或基因组序列片段,确认该检测方法初步建立成功,且对DNA病毒的检测灵敏度达到106GE／ml。初步应用本实验色所建立的检测方法,对病猪血清进行检测,结果发现了PPV和PRRS病毒,进一步证明了该方法的实用性。本实验成功建立了从猪血清中检测未知病毒的检测方法,且验证了此方法的可靠性和实用性,为找出引起“猪高热综合症”的未知病毒,对该病的进一步研究提供了一个有效的方法。理论上,该方法同样适用于其它动物的病毒检测。

全文目录

中文摘要  8-9
Abstract  9-11
第一章文献综述  11-41
  1 猪高热综合症的临床表现概述  11-15
    1.1 流行病学  11
    1.2 临床症状  11-14
    1.3 病理学变化  14
    1.4 浙江省类似疫病的发生情况  14-15
  2 与猪高热综合症相近疾病的研究情况  15-31
    2.1 猪繁殖与呼吸综合征的研究进展  15-21
    2.2 断奶仔猪多系统衰竭综合征的研究进展  21-26
    2.3 仔猪渗出性皮炎的研究进展  26-27
    2.4 猪肾病皮炎综合征研究进展  27-28
    2.5 猪细小病毒研究进展  28-29
    2.6 猪呼吸综合征的研究进展  29-31
  3 相关的细菌性疾病的研究进展  31-39
    3.1 葡萄球菌病  31-36
    3.2 猪链球菌病  36-39
  4 本研究的目的、意义和主要内容  39-41
    4.1 本研究的目的、意义  39-40
    4.2 本研究的主要内容  40-41
第二章猪血清中DNA病毒检测方法的建立  41-52
  1 材料  41-43
  2 方法  43-49
  3 结果  49-51
  4 讨论  51-52
第三章猪血清中RNA病毒检测方法的建立  52-58
  1 材料  52
  2 方法  52-56
  3 结果  56-57
  4 讨论  57-58
第四章检测方法的初步应用  58-61
  1 材料  58
  2 方法  58
  3 结果  58-60
  4 讨论  60-61
本研究创新点及后续研究工作  61-62
参考文献  62-73
攻读硕士学位期间发表和录用的学术论文  73-74
致谢  74

“高热综合症”病猪血清中未知病毒检测方法的建立

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