学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

附睾特异蛋白的鉴定研究

作　者: 齐晓伟
导　师: 于和鸣
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 附睾精子成熟磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PBP) peroxidase 6(PRX6) 双向电泳(2D)
分类号: Q51
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 17次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:鉴定大鼠附睾管腔液中可能参与精子成熟/精子表面修饰的附睾特异蛋白。方法:借助实验性大鼠左侧精索静脉曲张(ELV)动物模型分析和比较附睾中特异改变的蛋白成分,采用的主要实验技术包括:双向电泳结合质谱分析及数据库检索,免疫印迹与免疫组织化学鉴定技术以及基因分析技术,作进一步鉴定确认。结果:1,ELV模型动物多个附睾蛋白成分明显高于假手术动物。对其中之一,22 kD蛋白经质谱分析及数据库检索提示为磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PBP),其分子量为22 kD,pⅠ6.0。经免疫印迹确认为附睾特异来源。2D-Western在22 kD的位置显示六个平行的识别点(串珠状),此外,抗体还识别24 kD和43 kD多个点。2,附睾头段与尾段管腔液蛋白成分有明显差异。2D凝胶显示约100-150个斑点,择其中差异显著的8个斑点,分别标为EP-1～EP-8,送交质谱分析。数据检索提示EP-1是丝/苏氨酸蛋白激酶16(STK16);EP-2和EP-3是附睾蛋白DE;EP-4是细胞色素P450同源序列蛋白;EP-5和EP-6是附睾视黄酸结合蛋白成分;EP-8是peroxiredoxin6(PRX6);EP-7未鉴定出结果。3,对EP-1和EP-8的进一步分析显示,EP1/STK16鉴定结果为阴性;而EP-8确认为附睾PRX6蛋白;2D-Western结果显示,在28 kD和25 kD位置抗体特异性识别平行点(串珠状),并且免疫印记免疫组化及mRNA鉴定均证实PRX6蛋白在附睾头部的表达高于尾部。结论:本研究鉴定的大鼠附睾PBP可能以多种分子形式存在,包括糖基化修饰,该蛋白与精子表面修饰的关系需进一步研究;EP-8/PRX6作为附睾新发现的双功能酶可能在精子成熟和储存过程中具有抗氧化保护作用,确切功能值得深入研究。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-7
前言  7-9
主要实验材料与仪器  9-21
  主要实验材料  9-10
  主要实验仪器  10
  主要实验方法  10-21
结果  21-35
讨论  35-42
小结  42-43
参考文献  43-46
综述  46-53
附录:英文缩写词  53-54
个人简历  54-55
致谢  55-57
附件:蛋白斑点的质谱检测和数据检索结果  57-65

附睾特异蛋白的鉴定研究

内容摘要

全文目录

相似论文