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检测汞离子的仿细胞膜生物传感器的研制及其性能研究
作 者: 张楠曦
导 师: 岳秀丽
学 校: 哈尔滨工业大学
专 业: 微生物学
关键词: 汞离子 仿生学 纳米粒子传感器 铽 荧光淬灭
分类号: TP212.3
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
汞是一种即使在浓度非常低的条件下也具有高度毒性和生物积累性的重金属元素。一旦释放到环境中,不可降解,只能被稀释或者转换。汞对人类的损伤非常可怕,它可以在人的大脑,肾脏,和一些器官中聚集。因此发展一项快速灵敏的方法检测环境中的汞离子十分重要。目前,大量的分析方法已经应用于检测Hg2+中,通常用于分析Hg2+的方法有仪器分析法、荧光探针检测法以及电化学传感器等。但是,在实际应用中,这些方法都有一定的局限性,比如仪器分析法通常需要对样品进行复杂的前处理工作;许多荧光探针在制备过程中需要苛刻的反应条件,在应用于检测时水溶性不好,容易受到其他金属离子的干扰;电化学传感器容易受到温度的影响,在进行检测前需要稳定电压;最重要是这些方法检测的时间过长,无法实行在线快速检测。二氧化硅一直是生物矿化模拟的热门对象。传统方法来合成二氧化硅纳米粒子经常需要许多如高温、强酸、强碱等苛刻条件。而通过仿生学原理为制备二氧化硅纳米粒子开辟了一个新天地。本课题明确引入仿生学概念,以生物矿化为机理,通过模拟矿物质在生物体内形成的过程,指导荧光二氧化硅纳米粒子的合成。稀土元素例如Tb、Eu具有许多优势。由于具有优良光学性,已经广泛的应用于超灵敏的生物分析法中,本文制备了一种基于Tb的新型仿细胞膜结构的纳米传感器,通过荧光淬灭的原理,实现对Hg2+的检测。首先了通过利用氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)使二氧化硅纳米粒子修饰上氨基,通过氨基可以将金属螯合剂乙二胺四乙酸(EDTA)修饰到二氧化硅纳米粒子表面。EDTA可以与稀土元素Tb配位,形成[Tb(EDTA)(H2O)3]复合物。这时纳米粒子并没有荧光强度。当纳米粒子与羧酸钙盐(CaDPA)接触时,DPA会与[Tb(EDTA)(H2O)3]复合物中的水竞争,将水替换下来,从而形成[Tb(EDTA)(DPA)]结构,此时荧光强度显著增强。当Hg2+出现时,Hg2+把Tb3+替换下来,从而形成了[Hg(EDTA)(DPA)]复合结构,导致基于铽的纳米粒子荧光发生淬灭。通过向纳米粒子传感器中加入不同浓度的Hg2+以考察传感器的灵敏度。实验证明,当CaDPA浓度为100μM,纳米粒子的浓度为3.0mg/mL时,纳米粒子的荧光强度最好;在应用于检测Hg2+时,仅需几秒钟就可完成检测;纳米粒子的荧光强度与Hg2+的浓度呈现良好的线性关系,经过拟合计算得出检测限为50μM;传感器在pH7.0或7.5时展现良好的检测效果;其它金属离子对检测没有干扰作用,即传感器对Hg2+呈现良好的选择性,可以实现检测。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-10 第1章 绪论 10-27 1.1 汞的污染来源和危害 10-13 1.1.1 汞的存在形式 10 1.1.2 汞离子的污染源 10-12 1.1.3 人体吸收汞的途径 12 1.1.4 汞污染的危害 12-13 1.2 国内外检测 Hg~(2+)的发展现状 13-18 1.2.1 分析仪器法 13-14 1.2.2 荧光传感器用于检测重金属 14-17 1.2.3 基于稀土元素的荧光传感器 17-18 1.3 纳米粒子仿生合成 18-20 1.3.1 生物矿化 18 1.3.2 基于生物矿化原理的仿生合成 18-19 1.3.3 二氧化硅纳米粒子的仿生合成 19-20 1.4 荧光二氧化硅纳米粒子传感器 20-24 1.4.1 荧光二氧化硅纳米粒子的性质 20-22 1.4.2 设计二氧化硅纳米粒子传感器 22 1.4.3 荧光二氧化硅纳米粒子用于检测重金属 22-24 1.5 课题的研究背景和研究内容 24-27 1.5.1 课题的研究背景 24-25 1.5.2 课题的研究内容 25-27 第2章 实验材料方法和表征 27-36 2.1 实验试剂 27-28 2.2 实验设备 28-29 2.3 纳米粒子的表征 29-30 2.3.1 傅里叶变换红外光谱分析 29 2.3.2 动态激光散射仪分析 29 2.3.3 扫描电子显微镜表征 29-30 2.3.4 能谱分析 30 2.3.5 透射电子显微镜表征 30 2.4 结果与讨论 30-34 2.4.1 傅立叶变换红外光谱分析 30-31 2.4.2 动态激光散射仪分析 31-32 2.4.3 扫描电子显微镜表征分析 32-33 2.4.4 能谱分析 33-34 2.4.5 透射电子显微镜表征分析 34 2.5 本章小结 34-36 第3章 传感器的制备 36-41 3.1 仿生制备两种纳米粒子 36-38 3.1.1 制备内部包裹 FITC 表面修饰氨基的的二氧化硅纳米粒子 37-38 3.1.2 制备表面修饰氨基的二氧化硅纳米粒子 38 3.2 将 EDTAD 修饰到二氧化硅纳米粒子表面 38-39 3.3 将稀土元素铽修饰到二氧化硅纳米粒子表面 39 3.4 本章小结 39-41 第4章 生物传感器用于检测 Hg~(2+)的性能研究 41-54 4.1 两种纳米粒子的初步分析 41-42 4.1.2 荧光纳米粒子浓度对荧光强度的影响 41 4.1.3 确定检测 Hg~(2+)的反应时间 41 4.1.4 两种纳米粒子检测 Hg~(2+)的初步研究 41 4.1.5 两种纳米粒子的稳定性分析 41-42 4.2 实验条件的优化方法及传感器的性能研究 42-44 4.2.1 选取最佳 CaDPA 浓度 43 4.2.2 选取最佳纳米粒子浓度 43 4.2.3 选取最佳 pH 值 43 4.2.4 传感器检测 Hg~(2+)性能的研究 43-44 4.2.5 确定体系的检测限 44 4.2.6 共存离子抗干扰实验 44 4.3 结果与讨论 44-52 4.3.1 纳米粒子浓度对荧光强度的影响 44-46 4.3.2 确定检测 Hg~(2+)的反应时间 46 4.3.3 两种纳米粒子检测 Hg~(2+)的初步研究 46-48 4.3.4 两种纳米粒子的稳定性分析 48 4.3.5 选取最佳 CaDPA 浓度 48-49 4.3.6 选取最佳纳米粒子浓度 49-50 4.3.7 选取最佳 pH 值 50 4.3.8 确定体系的检测限 50-52 4.3.9 共存离子抗干扰实验 52 4.4 本章小结 52-54 结论 54-56 参考文献 56-61 致谢 61
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中图分类: > 工业技术 > 自动化技术、计算机技术 > 自动化技术及设备 > 自动化元件、部件 > 发送器(变换器)、传感器 > 生物传感器、医学传感器
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