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贯流硅胶在生物色谱中的应用

作　者: 尹晨茹
导　师: 徐丽
学　校: 华中科技大学
专　业: 中药学
关键词: 贯流硅胶 生物分配胶束色谱 透皮实验 二苯甲酮类紫外吸收剂 抗癌中药 细胞膜色谱 SPE
分类号: R318.08
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


贯流硅胶作为一种新近发展起来的色谱固定相表现出良好的色谱性能。它同时具有中孔和大孔结构,前者有利于增大比表面积,后者有利于加快传质提高柱效并降低柱压[1]。在本论文中,我们以贯流硅胶为色谱基质,将其应用于生物分配胶束色谱(Biopartitioning Micellar Chromatography, BMC)、生物膜色谱(Cell Membrane Chromatography, CMC)以及生物膜固相萃取(Cell Membrane Solid Phase Extraction, CM-SPE)三种模式,分别用于模拟研究二苯甲酮类物质的毒性及透皮性、中药中抗癌活性成分的筛选。第一章利用BMC建立的定量保留-活性关系(Quantitative Retention-Activity Relationships, QRARs)来研究二苯甲酮类紫外吸收剂的生物毒性和透皮性。实验考察了流动相中brij35浓度(0.01,0.02,0.03M)以及流动相pH值(pH6.5,7.4)对紫外吸收剂保留行为的影响,并且将它们在六个色谱条件下的保留参数log K与毒性参数log BCF(生物富集因子(Bioconcentration Factor, BCF))和透皮分数(T)进行了多元线性回归并建立QRARs模型。log BCF与log K的二项式模拟结果的相关系数R2在0.9398～0.9753范围内；T与log K的二项式模拟结果的相关系数R2在0.7569～0.8434之间。结果表明基于贯流C18硅胶的BMC能够很好的模拟二苯甲酮类紫外吸收剂的生物毒性及透皮性。第二章采用以贯流C18硅胶为固定相基质的BMC系统,考察了流动相brij35浓度(0.01,0.02,0.03,0.04M)以及pH值(pH6.5,7.4)对十余种化药保留行为的影响,并利用其相关参数建立了口服药代参数模型,对西地那非及其类似物的口服药代参数进行了预测。第三章采用CMC及CM-SPE两种模式对几种中药中潜在的抗癌活性成分进行了筛选。将宫颈癌Hela细胞膜涂覆于贯流硅胶表面,成为细胞膜材料。该材料分别用于色谱柱固定相和SPE填料,利用癌细胞膜上丰富的表皮生长因子受体对莪术、当归、白花蛇草、黄连、山豆根、败酱草几种中药进行抗癌活性成分的筛选。

全文目录


目录  4-6
中文摘要  6-7
Abstract  7-9
前言  9-11
第一章 基于贯流硅胶的生物分配胶束色谱用于二苯甲酮类紫外吸收剂毒性及透膜性的研究66  11-30
  1 引言  11
  2 实验部分  11-16
    2.1 试剂  11
    2.2 仪器与设备  11-12
    2.3 样品准备  12-13
    2.4 容量因子的定义  13
    2.5 离体皮肤透皮实验  13-16
  3 结果和讨论  16-29
    3.1 贯流硅胶的表征与贯流 C18柱色谱性能的初步评价  16-18
    3.2 紫外吸收剂在 BMC 系统上保留行为的考察  18-21
    3.3 QRARs 模型的建立  21-29
  4 结论  29-30
第二章 生物分配胶束色谱用于药物口服药代参数的模拟  30-44
  1 引言  30
  2 实验部分  30-31
    2.1 试剂  30
    2.2 仪器与设备  30-31
    2.3 样品制备  31
  3 结果与讨论  31-43
    3.1 流动相中 brij35 浓度对物质保留时间的影响  31-33
    3.2 流动相 pH 值对物质保留时间的影响  33-35
    3.3 QRARs 模型的建立  35-41
    3.4 西地那非及其类似物的口服药代参数预测  41-43
  4 总结  43-44
第三章 细胞膜涂覆贯流硅胶用于细胞膜色谱及 SPE 筛选几种中药中抗癌活性成分  44-51
  1 引言  44
  2 实验部分  44-45
    2.1 试剂  44
    2.2 仪器与设备  44
    2.3 细胞膜涂覆贯流硅胶材料的制备  44-45
    2.4 样品制备  45
    2.5 SPE 操作步骤  45
  3 结果和讨论  45-51
    3.1 细胞膜涂覆贯流硅胶色谱柱初步性能评价  45-47
    3.2 CMC 在中药抗癌活性成分中的筛选应用  47-48
    3.3 SPE 模式筛选中药中抗癌活性成分  48-51
  4 结论  51
参考文献  51-55
综述-中药活性成分筛选方法概述  55-75
  1 整体动物模型  56
  2 组织、器官模型  56-57
  3 细胞层面模型  57-58
  4 分子层面（受体、酶、离子通道等）模型  58-61
  5 分子层面（拟相分子）模型  61-64
    5.1 以卵磷脂为介质的筛选  61-62
    5.2 以 brij35 为介质的筛选  62-64
  6 基因层面模型  64
  7 计算机虚拟筛选模型  64-65
  8 总结  65-66
  参考文献  66-75
致谢  75-76
硕士期间发表论文  76

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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医用一般科学 > 生物医学工程 > 一般性问题 > 生物材料学
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