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合生元对胃肠手术后肠粘膜屏障功能保护作用的基础与临床研究
作 者: 赵明利
导 师: 于健春
学 校: 北京协和医学院
专 业: 临床医学
关键词: 胃肠手术后 肠内营养 合生元 肠屏障功能 益生菌 保护作用 双歧杆菌 甘露醇比值 结肠粘膜 膳食纤维 内毒素测定 革兰氏阴性菌 结肠菌群 浓度比 PCT enteral 门脉 手术前 肠粘膜屏障 置管术
分类号: R96
类 型: 博士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
研究背景:近年来,益生元和益生菌在用于肠内营养保护肠粘膜屏障方面倍受关注。益生菌是指维持结肠菌群的细菌;而益生元是为健康结肠菌提供食物的可发酵性底物,如多聚果糖、菊粉等;尽管二者最佳使用量尚在研究中,但将二者结合即合生元,从理论和初步研究来看,较益生元和益生菌单独应用更趋合理,尤其在保护肠屏障方面备受关注。为此,我们设计前瞻、随机、对照的实验和临床研究,进一步探讨益生元、益生菌、合生元应用在保护肠屏障方面的作用。第一部分动物实验(一)建立手术后肠屏障损坏的动物模型目的:建立手术创伤肠屏障损坏的动物模型。方法:8只SD大鼠禁食12小时后,行盲肠切除+胃造口置管手术并联合两次使用阿莫西林50mg+甲硝唑20mg进行干预。干预前后测定尿乳果糖/甘露醇比值和肠道内容物益生菌浓度,手术及抗生素干预后取门脉血、肝、肺、肠系膜淋巴结测定细菌移位率,取门脉血测定血清内毒素浓度,取升结肠起始段测量结肠粘膜厚度。结果:手术联合抗生素干预后大鼠结肠乳杆菌浓度的对数值降低2.47±0.51,P<0.01;双歧杆菌浓度的对数值降低2.60±0.62,P<0.01。结肠粘膜厚度为202.8±11.0μm,显著低于正常大鼠的均值227±24μm,P<0.01。尿乳果糖/甘露醇比值较术前增加0.251±0.009,P<0.01。门脉血内毒素浓度为0.0253±0.0026EU/ml,显著高于正常大鼠均值0.0187±0.0027EU/ml,P<0.01。组织标本细菌移位率为68.75%(22/32)。结论:盲肠切除+胃造口置管手术联合使用阿莫西林和甲硝唑可有效建立手术后肠屏障损坏的动物模型。(二)合生元对胃肠手术后大鼠肠屏障功能的保护作用目的:研究合生元对胃肠手术后大鼠肠屏障功能的保护作用。方法:采用前瞻随机对照方法,将32只大鼠随机分入整蛋白组(n=8)、益生菌组(n=8)、益生元组(n=8)或合生元组(n=8);建立肠粘膜损伤模型后,分别给予整蛋白肠内营养、整蛋白肠内营养+双歧杆菌三联活菌、整蛋白含膳食纤维肠内营养、整蛋白含膳食纤维肠内营养+双歧杆菌三联活菌。术后第6天测定尿乳果糖/甘露醇比值、肠道益生菌和革兰氏阴性菌浓度、细菌移位率、门脉血清内毒素浓度和结肠粘膜厚度。结果:益生菌组和合生元组肠道乳杆菌浓度分别为(O.828±0.366)×107cfu/g和(1.424±0.928)×108cfu/g,显著高于整蛋白组(0.046±0.037)×108cfu/g和益生元组(0.074±0.046)×108cfu/g,P<0.05;合生元组的双歧杆菌浓度为(2.246±1.112)×10’cfu/g显著高于益生菌组(0.876±0.701)×108cfu/g,益生菌组双歧杆菌浓度又显著高于整蛋白组(0.072±0.051)×107cfu/g和益生元组(0.096±0.094)×107cfu/g,P<0.05)。合生元组尿L/M比值(0.78±0.43)低于其余三组(整蛋白组1.45±0.40,益生菌组1.08±0.22,益生元组1.35±0.38),P<0.05)。合生元组结肠粘膜厚度(228.2±13.9μm)显著高于其余三组(整蛋白组198.5±10.3μm,益生菌组199.8±11.8μm,益生元组206.2±11.7μm),P<0.01)。合生元组细菌移位率为显著低于整蛋白组(11/32vs.20/32,P<0.05);但与益生菌组(13/32)和益生元组(17/32)无显著差异。结论:益生菌可提高结肠益生菌浓度;合生元可提高结肠益生菌浓度,降低尿L/M比值,增加结肠粘膜厚度,降低细菌移位率。合生元对胃肠手术后大鼠肠屏障功能的保护明显优于单独使用益生菌和益生元的作用。第二部分:临床研究:肠内营养和合生元对胃肠手术后患者肠粘膜屏障的保护作用目的:研究肠内营养及合生元对胃肠手术后患者肠屏障功能的保护作用。方法:采用前瞻随机对照方法,35名拟行胃肠手术的患者签署知情同意书,随机分入整蛋白组(n=6)、益生菌组(n=7)、益生元组(n=6)、合生元组(n=7)或肠外营养组(n=9),术后分别使用整蛋白肠内营养、整蛋白肠内营养+双歧杆菌三联活菌、整蛋白含膳食纤维肠内营养、整蛋白含膳食纤维肠内营养+双歧杆菌三联活菌、全肠外营养(TPN)。手术前、术后第1天和术后第8天测定尿乳果糖/甘露醇比值、血清内毒素浓度、降钙素原(PCT).C反应蛋白、血常规和肝肾功能。记录术后肠动力恢复情况、并发症及用药情况。结果:(1)29名患者完成观察:整蛋白组(n=5)、益生菌组(n=6)、益生元组(n=5)、合生元组(n=5)、肠外营养组(PN组)(n=8)。(2)整蛋白组血清前白蛋白较PN组高51mg/L(P<0.05);整蛋白组lg(HOMA-IR)值低于PN组0.232(P<0.05)。整蛋白组在提高ALB浓度、降低CRP水平方面优于其他肠内营养组,但没有显著差异。(3)益生菌组在进一步缩短手术后排气时间、降低尿L/M比值方面优于其他肠内营养组,但没有显著差异。(4)益生元组在减少体重损失方面优于其他肠内营养组,益生元略增加了因腹胀用药的次数,但均没有显著差异。(5)合生元组PCT值较PN组低0.098ng/ml(P<0.01);内毒素浓度较PN组低0.0183EU/ml(P<0.05)。合生元在减少解热药使用次数方面优于其他肠内营养组,但没有显著差异。(6)肠内营养组(EN组)(整蛋白组+益生菌组+益生元组+合生元组)术后排气时间较PN组提前约9小时(P<0.05);手术后第8天EN组血清前白蛋白浓度较PN组高37mg/L(P<0.05);EN组血清PCT较PN组低0.074ng/ml(P<0.05);EN组尿L/M比值较PN组低0.046,EN组血清内毒素浓度较PN组低0.0144EU/ml(P<0.01);EN各组lg(HOMA-IR)水平较PN组降低0.174(P<0.05);肠内营养在减少腹泻、腹胀,提高HGB、ALB浓度,降低CRP浓度,减少发热及抗生素、解热药使用方面均优于肠外营养,但无统计学差异。结论:肠内营养可缩短术后排气时间,促进蛋白质合成,减轻胰岛素抵抗,并降低内毒素浓度、尿L/M比值以及血清PCT浓度。合生元能显著降低血清PCT浓度和内毒素浓度。合生元对胃肠手术后患者肠屏障功能具有明显的保护作用。
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全文目录
缩略词表 4-5 中文摘要 5-8 ABSTRACT 8-10 第一部分:合生元对胃肠手术后大鼠肠粘膜屏障的保护作用 10-41 前言 10-12 第一节:手术后肠粘膜屏障损伤模型的建立和验证 12-25 一、材料与方法 12-19 二、实验结果 19-23 三、讨论 23-25 四、结论 25 第二节:合生元对大鼠肠粘膜屏障损伤模型的作用 25-41 一、材料与方法 25-29 二、实验结果 29-37 三、讨论 37-40 四、结论 40-41 第二部分:肠内营养和合生元对胃肠手术后患者肠粘膜屏障的保护作用 41-61 前言 41-44 一、材料与方法 44-49 二、临床观察结果 49-57 三、讨论 57-60 四、结论 60-61 全文总结 61-62 参考文献 62-69 文献综述:合生元在外科临床肠内营养的应用 69-80 参考文献 76-80 毕业生信息 80-81 致谢 81-82 附件1:受试者知情同意书 82-83 附件2:主管医生治疗方案通知书 83-84 附件3:病人信息登记表 84-86 彩图 86-93
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
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