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罗格列酮对LX-2细胞PPARγ和NF-κB的mRNA表达的影响

作　者: 钟岚
导　师: 张一
学　校:
专　业: 内科学
关键词: PPARγ 肝星状细胞罗格列酮 NF-κB
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：检测PPARγ激动剂罗格列酮对LX-2细胞增殖及其NF-κBmRNA和PPARγ mRNA表达的影响。方法：经不同浓度罗格列酮（0μmol/L,1μmol/L，5μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，100μmol/L）分别作用LX-2细胞48h后，采用CCK8法检测细胞增殖，RT-PCR半定量法检测NF-κB和PPARγ的mRNA表达，ELISA法检测细胞培养上清液中的I型胶原的含量。结果：1、CCK8实验结果显示罗格列酮对LX-2细胞的增殖抑制情况，药物浓度为1μmol/L，5μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，100μmol/L,抑制率分别为8.29%，14.43%，16.23%，18.29%，27.01%，34.67%，39.48%。2、空白对照组和罗格列酮干预组的半定量RT-PCR的结果分析为：NF-κB/β-action mRNA空白对照组：1.091±0.045，罗格列酮干预组：0.557±0.035PPARγ/β-action mRNA空白对照组：0.979±0.015，罗格列酮干预组：1.621±0.046两组结果间比较差异有统计学意义，P<0.05。NF-κBmRNA和PPARγmRNA的表达存在显著相关关系（相关指数为-0.951，P=0.000，P<0.01）。3、空白对照组和罗格列酮干预组的ELISA方法分别检测细胞培养上清液中的I型胶原含量（ng/ml）的结果分析：空白对照组：131.057±2.115，罗格列酮干预组：33.093±0.729两组结果间比较差异有统计学意义，P<0.05。结论：PPARγ特异性激动剂罗格列酮通过PPARγ途径抑制LX-2细胞增殖，下调NF-κBmRNA的表达，减少I型胶原生成。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-6
第1章引言  6-9
第2章罗格列酮对 LX-2 细胞 PPARγ和 NF-κB 的 mRNA 表达的影响  9-24
  2.1 材料  9-11
    2.1.1 细胞株  9
    2.1.2 主要试剂  9-10
    2.1.3 主要器材  10-11
  2.2 方法  11-16
    2.2.1 主要液体的配制  11
    2.2.2 细胞实验  11-12
    2.2.3 实验分组  12
    2.2.4 CCK-8 法测定细胞增殖  12-13
    2.2.5 酶联免疫吸附实验（ELISA）检测各 I 型胶原的表达量  13-14
    2.2.6 逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测 PPARγ和 NF-κBmRNA 的表达  14-16
    2.2.7 统计学处理  16
  2.3 结果  16-20
    2.3.1 CCK-8 法检测 LX-2 细胞的结果  16-17
    2.3.2 ELISA 检测 LX-2 细胞 I 型胶原含量的变化  17-18
    2.3.3 RT-PCR 检测 LX-2 细胞 NF-κB 和 PPARγ的 mRNA 表达的变化  18-20
  2.4 讨论  20-24
第3章结论  24-25
致谢  25-26
参考文献  26-29
攻读学位期间的研究成果  29-30
综述  30-41
  参考文献  37-41

罗格列酮对LX-2细胞PPARγ和NF-κB的mRNA表达的影响

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