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乌司他丁联合维拉帕米对大鼠急性肺缺血再灌注损伤的保护作用

作 者: 饶汕
导 师: 戴天阳
学 校: 泸州医学院
专 业: 外科学
关键词: 肺脏 缺血再灌注损伤 乌司他丁 维拉帕米
分类号: R965
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:本实验通过建立大鼠急性肺缺血再灌注损伤(the acute lung ischemia reperfusion injury,TALIRI)模型,对联合应用乌司他丁维拉帕米对大鼠急性肺缺血再灌注损伤保护作用及其相关机制做初步实验研究。方法:1.建立大鼠急性肺缺血再灌注损伤模型:取健康清洁大鼠(SD)90只,体重200~240g,随机分为未阻断组(A组),缺血再灌注组(B组),乌司他丁预处理组(C组),维拉帕米预处理组(D组),以及乌司他丁联合维拉帕米预处理组(E组),每组18只。A组:开胸后不阻断肺门:B组:开胸阻断肺门45min后放开放再灌注;C组:开胸前15min尾静脉注射乌司他丁,余处理同B组;D组:开胸前15min尾静脉注射维拉帕米,余处理同B组;E组:分别在开胸前15min尾静脉注射乌司他丁与维拉帕米,余处理同B组。分别在缺血后45min、2小时及6小时3个时相点各处死6只大鼠,留取左肺标本;2.在缺血45min、2小时及6小时3个时相点分别取左下肺组织天枰称重后计算湿干重比;取左上肺组织进行病理学观察,测定左上肺组织匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、髓过氧化物酶(MPO)含量、一氧化氮(NO)活性及免疫组化检测肺泡表面活性物质相关蛋白-A(SP-A)的表达水平。结果:1.左下肺干湿重比(W/D):A组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h左下肺组织W/D比值分别为3.74±0.20%、3.70±0.19%、3.30±0.50%,B组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h左下肺组织W/D比值分别为6.40±0.42%、6.33±0.40%、5.37±0.41%,C组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h左下肺组织W/D比值分别为4.90±0.55%、4.50±0.32%、4.61±0.71%,D组缺血45min、再2h、再灌注6h左下肺组织W/D比值分别为4.89±0.47%、4.52±0.22%、4.64±0.64%,E组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h左下肺组织W/D比值分别为4.55±0.32%、4.10±0.45%、4.86±0.43%。B组W/D高于A组(P<O.01),C、D、E组显著低于B组(P<0.05)。缺血45min、6h时间点B组与A、C、D、E组比较,W/D值均高于B组。B组、C组、D组、E组6h时间点与2h时间点比较统计学无明显差异(P>0.05)。2.左上肺组织病理学观察结果:A组缺血45min、2h、6h组大鼠肺组织结构清晰肺泡完整,肺泡无充血水肿、无炎性渗出等改变,组间病理形态评分无显著性差异。B组各时间点大鼠肺组织均见大量炎性细胞浸润表现等,以2h最明显。C组、D组、E组各时间点大鼠肺组织有炎性细胞浸润、肺萎缩。3.左上肺组织MDA浓度测定:A组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织MDA浓度分别为0.96±0.12nmol/mgprot、0.98±0.25nmol/mgprot、1.14±0.21nmol/mgprot,B组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织MDA浓度分别为1.78±0.16nmol/mgprot、1.80±0.19nmol/mgprot、1.88±0.22nmol/mgprot,E组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织MDA浓度分别为1.08±0.17nmol/mgprot、1.12±0.09nmol/mgprot、1.20±0.16nmol/mgprot。□B组、C组、D组、E组不同时间点MDA浓度比A组明显降低(p<0.05),C组、D组、E组不同时间点MDA浓度比B组明显降低(p<O.05)。E组不同时间点MDA浓度比C组、D组明显降低(p<0.05)。4.左上肺组织SOD活性测定:A组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织SOD活性分别为62.83±1.13U/mgprot、63.29±1.40U/mgprot、65.21±2.60U/mgprot,B组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织SOD活性分别为38.45±1.65U/mgprot、34.12±2.35U/mgprot、33.10±1.33U/mgprot,E组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织SOD活性分别为54.31±5.84U/mgprot、55.29±2.23U/mgprot、55.87±2.45U/mgprot。B组、C组、D组、E组不同时间点SOD浓度比A组明显降低(p<0.05),C组、D组、E组不同时间点SOD活性比B组明显升高(p<O.05)。E组不同时间点SOD活性比C组、D组升高(p<0.05)。5.左上肺组织MPO活性测定:A组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织MPO活性分别为0.66±0.10U/g、0.67±0.10U/g、0.73±0.11U/g,B组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织MPO活性分别为0.82±0.05U/g、0.96±0.12U/g、1.00±0.05U/g,E组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织MPO活性分别0.70±0.05U/g、0.76±0.10U/g、0.79±0.04U/g。B组、C组、D组、E组不同时间点MPO活性与A组比较明显增高(p<0.05)。B组不同时间点MPO活性比C组、D组、E组组明显升高(p<O.05)。E组不同时间点MPO活性比C组、D组明显降低(p<0.05)。6.左上肺组织NO活性测定:A组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织NO活性分别为0.85±0.18μmol/L、0.92±0.22μmol/L、0.98±0.14μmol/L,B组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织NO活性分别为0.49±0.19μmol/L、0.54±0.15μmol/L、0.60±0.14μmol/L,E组缺血45min、再灌注2h、再灌注6h肺组织NO活性分别为0.74±0.17μmol/L、0.70±0.09μmol/L、0.88±0.17μmol/L。B组、C组、D组、E组不同时间点NO活性与A组比较明显降低(p<0.05),B组不同时间点NO活性比C组、D组、E组组降低更明显(p<O.05)。E组不同时间点NO活性较C组、D组高(p<0.05)。7.左上肺组织免疫组织化学方法测定SP-A表达水平及免疫染色灰度值:A组吸光度为112.7±8.3,B组为157.5±6.5,C组为118.6±6.9,D组为121.2±3.2,E组为115.9±6.7。A组、C组、D组、E组SP-A表达均强于B组(p<0.05)。C组、D组与E组之间无明显统计学差异(p>0.05)。结论:1.乌司他丁组与维拉帕米组联合治疗组的MDA含量、MPO活性比B组、C组、D组降低,SOD活性、NO活性比B组、C组、D组显著增高,起到保护肺组织的作用。进一步证实了MDA含量、MPO活性增高、SOD活性、NO活性的水平降低与肺缺血再灌注损伤有关。2.在肺缺血再灌注损伤前联合应用乌司他丁和维拉帕米能保护大鼠肺分泌PS的功能从而减轻肺损伤。3.单独使用乌司他丁、维拉帕米与缺血再灌注组相比,均可减轻肺组织损伤,对肺脏起一定的保护作用,乌司他丁联合维拉帕米对肺脏的保护作用优于单药的使用。

全文目录


摘要  4-8
Abstract  8-14
前言  14-16
材料与方法  16-26
结果  26-40
讨论  40-45
结论  45-46
参考文献  46-51
英汉缩略词对照表  51-52
综述  52-59
  参考文献  56-59

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