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PPARγ、NF-κB及COX-2在大鼠肝损伤模型中的表达及法医学意义

作　者: 党翠
导　师: 焦炎
学　校: 山西医科大学
专　业: 法医学
关键词: 法医学损伤时间 PPARγ NF-κB COX-2
分类号: D919.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：研究大鼠肝脏损伤后不同时间过氧化物酶体增殖物激活受体y(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、细胞核因子-KB(nuclear factor kappa B, NF-κB)及环氧合酶2(cyclooxygenase2, COX-2)在肝脏组织中的表达变化,分析其时序性变化与损伤时间的关系,探讨其是否可以作为法医学工作实践中推断早期肝脏损伤时间的敏感指标。方法：健康成年雄性清洁级Sprague-Dawley大鼠54只,体重250±30g(由山西医科大学实验动物中心提供),随机分为对照组(n=6)、生前损伤组(n=42)及死后损伤组(n=6)。大鼠称重后,10%水合氯醛以3ml/kg的剂量腹腔注射麻醉,采用自由落体撞击法复制出大鼠肝脏钝性撞击伤模型,并于损伤后0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h机械性处死,提取肝脏组织迅速放入4%多聚甲醛中固定16h。死后损伤组为死后1h制模,均取相同部位肝脏,同上述方法处理。用苏木素-伊红染色技术(hematoxylin and eosin, HE)观察肝脏组织在损伤后的病理组织学改变,Super Vision两步法检测损伤后不同时间PPARγ、NF-κB及COX-2的表达。利用MIAS-2000医学图像分析系统测定免疫组化未复染切片的阳性单位,并将各损伤组与对照组及死后损伤组进行比较,用SPSS16.0对所得数据进行统计学分析。结果：(1)HE染色结果：正常对照组可见肝小叶结构清晰,肝细胞形态结构正常,排列整齐,未见炎性细胞浸润。损伤组可见随着损伤时间的延长,肝小叶结构紊乱,肝窦扩张充血并出现逐渐加重的肝细胞水肿变性坏死,肝细胞核深染固缩,大量炎性细胞浸润。(2)对照组肝细胞仅有低水平NF-κB阳性表达,随损伤时间的推移肝细胞染色增强,于8h时棕黄色反应物聚集成簇,阳性单位达峰值。12-24h仍可见大量粗大棕黄色颗粒沉积,阳性表达有所下降但仍维持在一个相对稳定的高水平。COX-2的阳性表达主要定位在Kupffer细胞、血管内皮细胞、胆管内皮细胞和肝细胞,黄色或棕黄色颗粒弥漫于细胞浆。COX-2在正常肝组织仅有少量表达,阳性表达于损伤后依次升高,2h达高峰,后持续回落。PPARγ主要表达在肝细胞,集中于中央静脉及汇管区。对照组即可见阳性表达,伤后阳性表达出现小幅度升高,4h达高峰,随后显著下调,降至对照组水平以下。经统计学方差分析：各损伤组与对照组及与相邻上组的阳性单位比较差异均有统计学意义(P<0.05),死后损伤组与对照组无明显表达差异(P>0.05)。结论：(1)检测PPARγ、NF-κB及COX-2蛋白的表达可鉴别肝脏生前伤和死后伤；(2)大鼠肝损伤后24h内PPARγ、NF-κB与COX-2的表达呈现规律性,可望作为肝脏早期损伤时间推断的参考指标。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-11
实验材料和方法  11-16
结果  16-19
附图  19-22
附表  22-24
讨论  24-30
结论  30-31
参考文献  31-35
综述  35-43
  参考文献  40-43
个人简介  43-44
致谢  44

PPARγ、NF-κB及COX-2在大鼠肝损伤模型中的表达及法医学意义

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