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白癜风发病特点临床研究及肌球蛋白X对人角质形成细胞丝状伪足形成的影响

作　者: 李乃浩
导　师: 宋智琦
学　校: 大连医科大学
专　业: 皮肤病与性病学
关键词: 白癜风肌球蛋白Ⅹ（MyoⅩ）丝状伪足 HaCat细胞
分类号: R758.41
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：进行白癜风发病特点临床研究，并探讨肌球蛋白Ⅹ对人角质形成细胞丝状伪足形成的影响。方法：1．通过白癜风临床观察表对白癜风的发病特点进行临床研究。2．借助小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）介导的RNA干扰（RNAinterference，RNAi）技术，采用MyoⅩ基因siRNA转染处理HaCat细胞，并以RT-PCR和Western印迹方法观察转染处理前后HaCat细胞中MyoⅩ基因的mRNA和蛋白水平的变化。3．扫描电镜观察MyoⅩ基因siRNA转染处理前后HaCat细胞丝状伪足的形态特征的变化。结果：1．200例白癜风患者的临床观察中，86%患者都伴有微量元素的缺乏，其中以铜、硒缺乏为多。2．所设计的siRNA能有效下调MyoⅩ基因mRNA及蛋白表达水平。3．扫描电镜观察siRNA转染下调MyoⅩ基因表达后HaCat细胞丝状伪足数量减少。结论：1．白癜风的发病与微量元素的缺乏相关。2．MyoⅩ参与HaCat细胞的丝状伪足的形成过程，抑制MyoⅩ在HaCat细胞中的表达，可以减少HaCat丝状伪足的形成。

全文目录

摘要  7-8
Abstract  8-10
第一部分白癜风发病机制的临床研究  10-14
  前言  10-11
  方法  11-12
  结果  12
  讨论  12-13
  参考文献  13-14
第二部分肌球蛋白Ⅹ对人角质形成细胞丝状伪足形成的影响  14-25
  前言  14-15
  材料和方法  15-21
    一、材料  15-17
      1 细胞株  15
      2 MyoⅩ siRNA 序列  15
      3 试剂  15-16
      4 主要仪器  16-17
    二、方法  17-21
      1. 细胞培养  17
      2. MyoⅩ基因 siRNA 转染  17
      3. 转染后 HaCat 细胞 MyoⅩ基因 mRNA 水平表达检测  17-20
      4. 转染后 HaCat 细胞 MyoⅩ基因 mRNA 水平表达检测  20
      5. 扫描电镜观察  20-21
  结果  21-23
    1．荧光显微镜下 FAM-siRNA 的观察  21
    2．转染后 HaCat 细胞 MyoⅩ基因 mRNA 水平表达检测  21-22
    3．转染后 HaCat 细胞 MyoⅩ基因蛋白水平表达检测  22
    4．扫描电镜下转染前后 HaCat 细胞伪足的形态特征  22-23
    5．统计学分析  23
  讨论  23-25
结论  25-26
参考文献  26-31
综述  31-41
  参考文献  36-41
致谢  41-42

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