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海藻酸钙—纳米羟基磷灰石骨修复材料的制备及生物相容性研究

作 者: 王彦梅
导 师: 何家才
学 校: 安徽医科大学
专 业: 口腔临床医学
关键词: 海藻酸钙 纳米羟基磷灰石 复合材料 骨髓基质干细胞 生物相容性
分类号: R783.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 15次
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内容摘要


目的制备海藻酸钙-纳米羟基磷灰石复合材料,体外评价其生物相容性,探讨其作为骨修复材料的可行性。方法联合应用化学交联及冷冻干燥技术制备海藻酸钙—纳米羟基磷灰石(nanohydroxyapatite,nHA)骨修复材料,然后通过扫描电镜(scanning electron microscopy, SEM)和X光衍射(X-ray diffraction, XRD)对材料的性能进行表征,液体置换法测定材料孔隙率。将第五代骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)接种至复合材料(composite material, CM)上,倒置相差显微镜及SEM观察细胞的生长情况。制备材料浸提液并将其与骨髓基质干细胞共培养,MTT法检测细胞接种后1、3、5天的相对增值率(relative growth rate, RGR)并评估材料的毒性分级。新鲜犬血加入材料浸提液进行溶血试验,紫外分光光度计(ultraviolet spectrophotometer, US)测定吸光度(absorbance, A)值并计算溶血率。结果制备的海藻酸钙-纳米羟基磷灰石复合材料具有多孔性,孔隙率高达(88.6±4.5)%。倒置相差显微镜及SEM观察可见细胞在材料周围及表面伸展充分、生长旺盛。材料浸提液培养的细胞具有较好的活力,材料毒性分级为1级。溶血试验结果显示复合材料的溶血率为1.28%,满足医用生物材料的溶血试验要求。结论本研究制备的复合材料具有较高的孔隙率和良好的细胞及血液相容性,是一种颇有前景的骨修复及再生材料。

全文目录


中英文缩略词表  6-8
中文摘要  8-9
英文摘要  9-11
1. 引言  11-15
  1.1 骨种子细胞  11-12
  1.2 成骨因子  12-13
  1.3 支架材料  13-15
2. 材料与方法  15-21
  2.1 实验材料  15-17
    2.1.1 材料和试剂  15-16
    2.1.2 实验动物  16
    2.1.3 主要仪器  16
    2.1.4 部分试剂的配置  16-17
  2.2 实验方法  17-21
    2.2.1 复合材料的制备及表征  17-18
      2.2.1.1 材料的合成  17-18
      2.2.1.2 材料的表征  18
    2.2.2 材料的孔隙率测定  18
    2.2.3 复合材料的生物相容性研究  18-21
      2.2.3.1 BMSCs对复合材料反应的实验  18-21
        2.2.3.1.1 BMSCs的原代培养  18-19
        2.2.3.1.2 BMSCs的传代培养  19
        2.2.3.1.3 直接接触试验  19-20
        2.2.3.1.4 体外细胞毒性试验  20-21
      2.2.3.2 溶血试验  21
  2.3 统计学分析  21
3. 结果  21-25
  3.1 材料的表征  21-23
    3.1.1 材料的形貌  22
    3.1.2 材料的孔隙率  22
    3.1.3 材料的结晶度分析  22-23
  3.2 BMSCs对复合材料的反应  23-24
    3.2.1 BMSCs倒置相差显微镜观察  23
    3.2.2 BMSCs与复合材料共培养的形态学观察  23
    3.2.3 材料浸提液对BMSCs的毒性试验  23-24
  3.3 溶血试验结果  24-25
4. 讨论  25-28
  4.1 海藻酸耗-纳米轻基碟灰石骨修复材料的合成  25-26
  4.2 海藻酸耗-纳米轻基喊灰石骨修复材料的生物相容性  26-28
  4.3 展望和不足  28
5. 结论  28-29
参考文献  29-33
附图  33-36
附录  36-37
致谢  37-38
综述  38-46
  参考文献  44-46

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中图分类: > 医药、卫生 > 口腔科学 > 口腔矫形学 > 牙科材料学
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