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涎腺腺样囊性癌细胞ACC-3细胞株ALDH1~+细胞的生物学功能的研究与探讨

作 者: 宋占利
导 师: 安峰
学 校: 河北北方学院
专 业: 病理学与病理生理学
关键词: 乙醛脱氢酶1 涎腺腺样囊性癌 肿瘤干细胞
分类号: R739.8
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


涎腺腺样囊性癌又称为圆柱瘤或者筛状癌,它缘于涎腺上皮,约占口腔颌面外科中上皮源性肿瘤的10%,是比较常见的口腔颌面恶性肿瘤。肿瘤干细胞学说认为肿瘤起源于肿瘤干细胞,是正常干细胞累积突变的结果。肿瘤组织中存在极少具有自我更新的能力和多向分化潜能的细胞,被称之为肿瘤干细胞,是肿瘤增殖生长、转移和复发的根源,肿瘤复发转移的关键问题之一是由于肿瘤细胞的耐药性。近年来,肿瘤干细胞理论的提出,可以很好的解释肿瘤细胞的耐药问题,受到学术界的广泛关注,肿瘤干细胞已成为肿瘤研究的热点。然而肿瘤组织中肿瘤干细胞的数量极少,如何分离和鉴定这群细胞,对肿瘤干细胞的研究起到至关重要的作用。乙醛脱氢酶1是乙醛脱氢酶(ALDH)家族成员之一,是催化细胞内乙醛氧化为乙酸的细胞溶质酶。通过氧化视黄醇为视黄酸参与基因的表达和组织分化。乙醛脱氢酶1在人体各种组织中都有表达,在维持正常组织的发育和内环境的稳定中发挥重要作用,同时发现其在免疫细胞中也表达。综合近年来关于ALDH1与肿瘤干细胞的各项研究结果表明,ALDH1在多种组织类型的肿瘤干细胞呈高表达,而高表达的细胞具有干细胞的特性。目前,以ALDH1活性作为功能性标志物已成功运用于乳腺癌、视网膜母细胞瘤、头颈部鳞状细胞癌、前列腺癌、结肠癌等实体瘤的肿瘤干细胞的分离和鉴定。本研究主要通过对涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞株的流式分选,分选出其中ALDH1+细胞及ALDH1-细胞,将ALDH1+细胞及ALDH1-细胞以及一组未分选的ACC-3细胞分成三组,分别进行肿瘤球的培养、MTT细胞增殖实验、平板克隆实验以及transtwell小室测定细胞迁徙实验等一系列体内外实验测定其细胞的增殖、更新、克隆、运动能力。通过实验证明ALDH1+细胞、ALDH1-细胞以及未分选的ACC-3细胞的增殖、更新、克隆、运动能力各不相同。ALDH1+增殖、更新、克隆、运动能力明显高于未分选的ACC-3细胞以及ALDH-1细胞,所得数据具有统计学意义。通过实验结果显示,涎腺腺样囊性癌ACC-3细胞株中ALDH1+细胞的自我增殖,更新及克隆和迁徙能力明显高于未分选的ACC-3细胞及ALDH-细胞,因此,ALDH+细胞可能作为涎腺腺样囊性癌ACC-3的干细胞表面标志物,并具有肿瘤干细胞特性。通过本实验结果建立一个检测和分离涎腺腺样囊性癌干细胞的方法,并为继续深入探讨涎腺腺样囊性癌的发病机制和防治措施奠定基础。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-7
英文缩写  7-8
前言  8-10
实验仪器及材料  10-12
实验方法与步骤  12-14
结果  14-16
附图  16-20
讨论  20-23
结论  23-24
参考文献  24-27
综述  27-46
  参考文献  42-46
致谢  46-47
个人简历  47

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 口腔、颌面部肿瘤
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