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姜黄素对人喉癌Hep-2细胞放疗敏感性的实验研究

作 者: 曹彦洋
导 师: 刘伟琦
学 校: 河南科技大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 姜黄素 喉癌细胞 放疗增敏 细胞凋亡
分类号: R739.65
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的:探讨姜黄素对人喉癌Hep-2细胞的放疗敏感性影响及其机制。方法:不同浓度姜黄素(100、50、25、20、12.5、6.25、0μmol/L)分别作用于人喉癌Hep-2细胞24h、48h、72h后,加入DMSO或SDS应用MTT法检测姜黄素的细胞毒性和选用的姜黄素的放疗增敏浓度。不同浓度紫杉醇(0.39、0.78、1.57μmol/L)与20μmol/L姜黄素联合作用Hep-2细胞24h。克隆形成实验观察姜黄素对Hep-2细胞的放射敏感性的影响。流式细胞术检测姜黄素诱导细胞的凋亡率、细胞周期分布。结果:姜黄素对人喉癌Hep-2细胞有明显抑制作用,不同的作用浓度之间的细胞增殖的抑制率差异有统计学意义(P<0.05);不同的作用时间之间的差异有统计学意义(P<0.05);姜黄素对Hep-2细胞增殖的抑制率呈现明显的时间和浓度依赖性。当姜黄素的浓度≤20μmol/L时,其24h的细胞抑制率≤10%,因而选取20μmol/L的浓度作为放疗增敏观察的实验浓度。紫杉醇+姜黄素联合用药组对Hep-2细胞抑制率大于单纯紫杉醇组,两药表现为相加作用。经20μmol/L姜黄素预处理后,进行放射线照射的Hep-2细胞的增殖率明显降低,与单纯放疗组、单纯姜黄素对比细胞增殖的抑制作用明显增强(P<0.05)。不同浓度姜黄素(0、20、25、50μmol/L)作用Hep-2细胞后,细胞的凋亡率分别为(2.68±1.07)%、(10.92±0.95)%、(18.87±2.34)%、(35.60±0.68)%,在与对照组的凋亡率(2.68±1.07)%相比,有统计学意义(P<0.05)。姜黄素及姜黄素联合放射线组的细胞周期多阻滞在辐射敏感细胞时相G2/M期。结论:姜黄素可提高人喉癌Hep-2细胞放射敏感性,可能与姜黄素引起肿瘤细胞的周期阻滞,诱导肿瘤细胞的凋亡有关;紫杉醇与姜黄素联合化疗有减毒增效作用。

全文目录


摘要  2-3
ABSTRACT  3-7
第1章 综述  7-19
  1.1 姜黄素概述  7-11
    1.1.1 姜黄素特性  7-9
    1.1.2 姜黄素抗肿瘤作用分子机制  9-11
    1.1.3 姜黄素与化疗药物协同抗肿瘤作用  11
  1.2 放疗增敏现状  11-14
    1.2.1 放疗增敏剂  11-13
    1.2.2 姜黄素对于肿瘤细胞的放疗增敏作用  13-14
  1.3 姜黄素对喉癌 Hep-2 细胞株的研究现状  14-15
  1.4 展望  15-19
第2章 引言  19-21
第3章 材料与方法  21-27
  3.1 实验材料  21-22
    3.1.1 实验细胞株  21
    3.1.2 实验主要试剂  21
    3.1.3 主要仪器  21
    3.1.4 主要试剂配制  21-22
  3.2 实验方法  22-26
    3.2.1 细胞培养  22-23
    3.2.2 细胞传代  23
    3.2.3 细胞冻存及复苏  23
    3.2.4 细胞计数  23-24
    3.2.5 细胞放疗  24
    3.2.6 MTT 法——姜黄素对人喉癌细胞 Hep-2 增殖的影响  24
    3.2.7 实验增敏浓度的选择  24-25
    3.2.8 姜黄素与紫杉醇联用对 Hep-2 的抑制作用  25
    3.2.9 克隆形成实验测定细胞放疗敏感性  25-26
    3.2.10 姜黄素作用 Hep-2 细胞的细胞凋亡检测  26
    3.2.11 姜黄素作用 Hep-2 细胞的细胞周期检测  26
  3.3 统计学分析  26-27
第4章 结果  27-33
  4.1 姜黄素对 Hep-2 细胞增殖的抑制作用  27
  4.2 DMSO 与 SDS 对实验放疗增敏浓度的选择  27-28
  4.3 姜黄素与紫杉醇合用对 Hep-2 的抑制作用  28-29
  4.4 姜黄素对 Hep-2 细胞的放射敏感性的作用  29-30
  4.5 姜黄素作用 Hep-2 细胞的细胞凋亡检测  30
  4.6 姜黄素作用 Hep-2 细胞的细胞周期的检测  30-33
第5章 讨论  33-41
  5.1 姜黄素对 Hep-2 细胞增殖的抑制作用结果分析  35-36
  5.2 姜黄素与紫杉醇合用对 Hep-2 的抑制作用的结果分析  36-37
  5.3 姜黄素对 Hep-2 细胞的放射敏感性的作用的结果分析  37-41
第6章 结论  41-43
参考文献  43-49
缩略语词汇表  49-51
致谢  51-53
攻读硕士学位期间的研究成果  53

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 耳鼻咽喉肿瘤 > 喉肿瘤
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