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依西美坦联合阿司匹林对乳腺癌MCF-7细胞的协同效应及其机制研究

作 者: 胡丽霞
导 师: 潘跃银
学 校: 安徽医科大学
专 业: 肿瘤学
关键词: 依西美坦 阿司匹林 MCF-7 联合作用 协同效应
分类号: R737.9
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


背景:乳腺癌是现今全世界妇女癌症死亡的主要原因,占癌症总新发病例的23%和癌症总死亡人数的14%。大约有75%的乳腺癌是雌激素依赖性的,肿瘤表达雌激素受体并获得雌激素促使肿瘤的生长。第三代芳香化酶抑制剂(来曲唑、阿那曲唑和依西美坦)现在被广泛推荐用于辅助治疗绝经后乳腺癌的雌激素敏感的患者,芳香化酶抑制剂已经成为雌激素依赖的转移性乳腺癌患者的标准一线治疗方案。,在乳腺癌组织中环氧化酶(COX)-1和COX-2均可过度表达。非甾体抗炎药可通过抑制COX-1和COX-2而影响乳腺癌的发生。近几年,联合使用药物的方法可以提高癌症治疗的疗效。它们可能通过调节不同的信号转导通路,起到协同抗肿瘤细胞增殖和凋亡的作用。因此,在这项研究中,我们主要通过细胞增殖抑制、细胞周期和信号转导通路的改变来研究依西美坦联合阿司匹林对乳腺癌MCF-7细胞作用。目的:本实验的目的主要是研究依西美坦和阿司匹林对乳腺癌MCF-7细胞的联合作用。方法:采用MTT法研究依西美坦、阿司匹林单药或两药联合对乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用,计算半数抑制率(IC50)。使用计算CI的方法,研究这两种药物之间的体外协同作用。采用流式细胞仪检测依西美坦、阿司匹林单药或两药联合对乳腺癌MCF-7细胞周期的影响。采用Western blot检测依西美坦、阿司匹林单药或两药联合对乳腺癌MCF-7细胞COX-1, COX-2和Bcl-2表达的影响。结果:MTT检测结果显示,与依西美坦和阿司匹林单药相比,联合用药能显着降低乳腺癌MCF-7细胞的增殖能力(CI<1)。此外,依西美坦和阿司匹林联合用药具有协同抗增殖作用,能显着阻滞细胞周期于G0/G1期和对COX-1和Bcl-2的表达产生了较强的抑制作用。结论:依西美坦联合阿司匹林作用于乳腺癌MCF-7细胞72h可产生协同效应(CI<1),推测其机制可能依西美坦联合阿司匹林可阻滞乳腺癌MCF-7细胞周期于G0/G1期和下调Bcl-2及COX-1的表达有关。这些研究结果表明,依西美坦联合阿司匹林可能会成为治疗雌激素依赖型乳腺癌的一个有用的方法。

全文目录


英文缩略词表  6-8
中文摘要  8-10
Abstract  10-12
前言  12-15
1 实验材料  15-19
  1.1 细胞株  15
  1.2 药物及试剂  15
  1.3 仪器与设备  15-16
  1.4 试剂配制  16-19
2 实验方法  19-28
  2.1 细胞培养与传代  19-20
  2.2 细胞活力测定  20-21
  2.3 体外增殖抑制实验  21-22
  2.4 药物联合作用评价  22
  2.5 流式细胞仪分析细胞周期  22-23
  2.6 蛋白质印迹  23-26
  2.7 前列腺素E2(PGE2)水平的测定  26-27
  2.8 统计分析  27-28
3 结果  28-37
  3.1 依西美坦阿司匹林对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用  28-30
  3.2 依西美坦与阿司匹林联合应用对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用  30-31
  3.3 显微镜下观察依西美坦、阿司匹林单药或两药联合72h对乳腺癌MCF-7细胞的作用  31-32
  3.4 依西美坦、阿司匹林单药或两药联合对细胞周期的影响  32-34
  3.5 依西美坦、阿司匹林单药或两药联合对COX-1、COX-2表达和PGE2产生的影响  34-36
  3.6 依西美坦、阿司匹林单药或两药联合对Bcl-2蛋白的影响  36-37
4 讨论  37-40
5 结论  40-41
参考文献  41-48
附录  48-49
致谢  49-50
综述  50-60
  参考文献  56-60

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 乳腺肿瘤
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