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蛋白激酶CK2ɑ及抑制剂TBB对人甲状腺癌细胞株生长增殖的影响

作 者: 谷迪西
导 师: 肖建英
学 校: 辽宁医学院
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: 蛋白激酶CK2ɑ 甲状腺癌 SW579细胞 FTC133细胞 四溴苯三唑 蛋白激酶B
分类号: R736.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要


目的观察蛋白激酶CK2ɑ(protein kinase CK2ɑ)在人甲状腺癌细胞株SW579和FTC133中的表达;研究CK2ɑ抑制剂四溴苯三唑(TBB)对甲状腺鳞癌SW579细胞株生长增殖及CK2ɑ和Akt表达与磷酸化水平的影响,进一步探讨TBB抗甲状腺癌的作用机制。方法1. RT-PCR和Western blotting方法检测蛋白激酶CK2ɑ在人甲状腺癌细胞株SW579和FTC133中mRNA和蛋白质水平的表达;2.体外培养SW579细胞,实验分为阴性对照组(未处理组和DMSO组)、Wortmannin对照组(终浓度为100nmol·L-1)和TBB组(终浓度为25μmol·L-1)。药物作用24h后,MTT比色法测定细胞生长抑制率,同时测定蛋白激酶CK2的活性。采用RT-PCR方法检测SW579细胞CK2ɑ和Akt的mRNA表达;采用Western blotting方法检测SW579细胞CK2ɑ和Akt的蛋白表达及Akt的T308和S473位点的磷酸化水平,分析各处理组CK2ɑ和Akt基因表达的变化及各处理因素与Akt的T308和S473磷酸化水平的关系。结果1.蛋白激酶CK2ɑ在滤泡状甲状腺癌细胞株FTC133和甲状腺鳞癌SW579细胞中的mRNA和蛋白水平均呈高表达,但两个细胞株之间没有显著性差异。2.与阴性对照组比较,TBB组SW579细胞生长抑制率明显增加(P<0.01),细胞内CK2的活性明显降低(P<0.01)。RT–PCR结果表明,与阴性对照组和Wortmannin对照组比较,TBB组CK2ɑ的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),Akt的mRNA表达水平无明显变化(P>0.05)。Western blotting结果表明,与阴性对照组比较,TBB组CK2ɑ蛋白表达水平明显降低(P<0.01),同时Akt的T308和S473位点的磷酸化状态受到抑制(P<0.01),但总Akt蛋白水平无明显变化。结论1.蛋白激酶CK2ɑ过表达可能与甲状腺癌的发生和发展有关。2. TBB对甲状腺癌SW579细胞生长增殖具有显著抑制作用,其机制与降低SW579细胞CK2ɑ表达,进而再下调Akt的T308和S473位点的磷酸化水平与活性有关。

全文目录


中文论著摘要  4-6
英文论著摘要  6-8
英文缩略语  8-9
前言  9-10
实验材料与方法  10-16
实验结果  16-22
讨论  22-24
结论  24-25
本研究创新性的自我评价  25-26
参考文献  26-29
附录  29-39
  综述  29-36
    参考文献  33-36
  在学期间科研成绩  36-37
  致谢  37-38
  个人简介  38-39

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 内分泌腺肿瘤 > 甲状腺肿瘤
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