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MAP1-LC3在HepG2细胞中的表达及罗格列酮对其表达的影响

作　者: 邓雅尹
导　师: 官阳
学　校: 华中科技大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 肝癌细胞 微管相关蛋白1-轻链3 自噬 罗格列酮
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：通过观察微管相关蛋白1-轻链3（MAP1-LC3）在肝癌细胞HepG2中的表达以及罗格列酮刺激对其表达的影响，探讨罗格列酮与HepG2细胞的MAP1-LC3表达及自噬水平之间的关系。方法：体外培养的HepG2细胞分别采用不同浓度的罗格列酮药液刺激，其浓度梯度为：10、30、50μmol/L（CCK-8试验另设不同浓度梯度），在体外分组培养24h。利用CCK-8试剂盒检测HepG2细胞的增殖情况；免疫组织化学染色检测HepG2细胞内LC3的表达；电镜观察药物作用前后细胞超微结构的改变；MDC荧光染色法检测细胞内自噬泡的变化；流式细胞仪检测细胞的凋亡情况。结果：①CCK-8法显示，不同浓度罗格列酮药液（10、20、40、80、160、320μmol/L）刺激HepG2细胞24h后，细胞的增殖活性受到抑制，且随药物浓度的升高，HepG2细胞的生长抑制率越明显。②免疫组织化学染色显示，HepG2细胞低表达LC3，其阳性部位主要见于胞浆。随罗格列酮浓度的升高，细胞内LC3的表达增强。③电镜观察显示，罗格列酮能明显提高HepG2细胞内自噬泡及自噬溶酶体的数量。④罗格列酮处理24h后，MDC（一种特殊的荧光染料）荧光染色显示：以空白组作对照，药物浓度增高的同时，阳性HepG2细胞内的绿色荧光颗粒也增多，荧光强度增强。⑤流式细胞仪检测结果显示：与对照组相比，随着罗格列酮浓度的增加，细胞凋亡的百分率增加。结论：①罗格列酮具有抑制肝癌细胞HepG2增殖、诱导其发生自噬的作用，且作用存在量效关系。②未受罗格列酮作用的HepG2细胞，其MAP1-LC3的表达水平较低，可能与肝癌细胞的快速生长有关。③罗格列酮作用后，HepG2细胞中MAP1-LC3的表达显著增强。提示罗格列酮抑制HepG2细胞增殖可能与诱导MAP1-LC3的表达上调而增强细胞的自噬作用有关。

全文目录


主要中英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-12
实验材料  12-16
实验方法  16-22
实验结果  22-27
附图 1  27-28
附图 2  28-29
附图 3  29-30
附图 4  30-31
附图 5  31-32
讨论  32-35
参考文献  35-37
综述  37-47
  参考文献  44-47
致谢  47

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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