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8-溴-7-甲氧基白杨素对肝癌Huh-7细胞系肿瘤球形成细胞自我更新的影响

作　者: 戴勇
导　师: 廖爱军
学　校: 南华大学
专　业:
关键词: 肝细胞癌 肝癌干细胞样细胞 8-溴-7-甲氧基白杨素 自我更新
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的研究新型白杨素合成类似物8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)抑制源自人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC) Huh-7细胞系细胞肿瘤球形成细胞即肝癌干细胞样细胞(liver cancer stem cell like cells, LCSLCs)增殖活性、自我更新能力和下调β-catenin蛋白表达作用及其机制的探讨。方法体外培养人肝癌Huh-7细胞系细胞，并用干细胞条件培养基悬浮培养法富集和扩增LCSLCs，采用肿瘤球形成法检测不同浓度的BrMC对LCSLCs自我更新能力的影响。MTT比色法测定BrMC对LCSLCs细胞活性的影响；异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)标记CD133抗体流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析BrMC对LCSLCs细胞的干细胞标志物CD133表达的影响。同时，蛋白免疫印迹分析BrMC对LCSLCs细胞β-catenin蛋白表达的影响。结果采用干细胞条件培养基悬浮培养7天，在体外培养人肝癌Huh-7细胞系细胞中得到呈典型非粘附三维生长的肝癌球体细胞即LCSLCs。MTT比色法测定结果表明，不同浓度BrMC处理人肝癌Huh-7细胞系细胞和LCSLCs，细胞活性明显下降，成剂量依赖性(P＜0.05),与亲本Huh-7细胞系细胞比较，其抑制LCSLCs细胞活性作用更强(P＜0.05)。肿瘤球形成法检测结果显示，在5.0～20.0μM浓度范围内，BrMC以浓度依赖方式减少LCSLCs的肿瘤球数目(P＜0.05)。FITC-CD133标记FCM分析结果发现BrMC以浓度依赖方式降低LCSLCs的干细胞标志蛋白CD133表达(P＜0.05)。Western blot法检测显示BrMC以浓度依赖方式降低LCSLCs细胞β-catenin蛋白表达(P＜0.05)。结论1. BrMC具有抑制LCSLCs细胞活性以及自我更新能力作用。2. BrMC可能通过下调细胞β-catenin蛋白表达抑制LCSLCs自我更新能力。

全文目录


主要缩略词及英文索引  4-5
中文摘要  5-7
Abstract  7-9
前言  9-12
材料与方法  12-18
实验结果  18-23
讨论  23-25
结论  25-26
参考文献  26-31
综述  31-40
  参考文献  37-40
攻读硕士学位期间完成、发表论文情况  40-41
致谢  41

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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